天然多胺修飾物ST-01抗肝癌藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：天然多胺綴合物因具有良好的靶向抗腫瘤作用已引起了人們的廣泛關(guān)注。本文以本實(shí)驗(yàn)室篩選出活性較好的新型天然多胺修飾物ST-01為研究對(duì)象，采用人肝癌細(xì)胞系Hep G2、SMMC-7721及荷瘤小鼠等模型，評(píng)價(jià)其體內(nèi)外抗肝癌作用及分子機(jī)制。
　　方法：采用MTT法檢測(cè)不同濃度ST-01對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep G2和SMMC-7721增殖的影響；利用生物倒置顯微鏡觀察ST-01對(duì)肝癌細(xì)胞形態(tài)的影響；采用MDC熒光染色法及多維全景流式細(xì)胞

2、儀檢測(cè)ST-01對(duì)肝癌Hep G2和SMMC-7721的細(xì)胞自噬及細(xì)胞周期的影響；免疫印跡法檢測(cè)對(duì)自噬相關(guān)蛋白BECN1、p62和LC3，細(xì)胞周期相關(guān)蛋白Cyclin B1，Cdc2和p-Cdc2表達(dá)的影響；基于荷瘤小鼠模型，評(píng)價(jià)ST-01對(duì)荷瘤小鼠生存時(shí)間的影響。
　　結(jié)果：ST-01作用人肝癌Hep G2和SMMC-7721細(xì)胞24h及48h后，呈劑量及時(shí)間依賴性地抑制細(xì)胞增殖，24h時(shí)IC50分別為(12.97±2.18)μ

3、M和(12.46±2.31)μM；48h時(shí)IC50分別為(4.66±0.53)μM和(4.46±0.25)μM。形態(tài)學(xué)觀察、MDC熒光染色檢測(cè)及流式細(xì)胞儀檢測(cè)均表明ST-01可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞發(fā)生自噬，且細(xì)胞周期阻滯于G2/M期；此外，自噬抑制劑3-MA可逆轉(zhuǎn)ST-01對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的抑制作用。免疫印跡實(shí)驗(yàn)表明ST-01可誘導(dǎo)自噬標(biāo)記性蛋白BECN1、LC3-II表達(dá)上調(diào)，p62表達(dá)下調(diào)；自噬抑制劑3-MA可部分逆轉(zhuǎn)上述蛋白表達(dá)。此外，ST