結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室生物安全

1、結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室生物安全,自治區(qū)疾控中心結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室,什么是生物安全,生物安全是指對(duì)由現(xiàn)代生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用過程中可能產(chǎn)生的負(fù)面影響，所采取的有效預(yù)防和控制措施.,保護(hù)人（實(shí)驗(yàn)人員、同事、實(shí)驗(yàn)室輔助人員）物品(標(biāo)本和器材等) 環(huán)境(空氣、土壤、水),生物安全的目的,國(guó)家發(fā)展與改革委員會(huì)科技部建設(shè)部國(guó)家環(huán)保部國(guó)家質(zhì)檢總局（中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可中心）國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委農(nóng)業(yè)部民航局其它有關(guān)部門,實(shí)驗(yàn)室管理部門,國(guó)家對(duì)病原微生物實(shí)

2、行分類管理，對(duì)實(shí)驗(yàn)室實(shí)行分級(jí)管理。 國(guó)家實(shí)行統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和要求。,基本規(guī)定,病原微生物的分類和管理,國(guó)家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類：　　第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物?！　〉诙惒≡⑸铮侵改軌蛞鹑祟惢蛘邉?dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、

3、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物?！　〉谝活悺⒌诙惒≡⑸锝y(tǒng)稱為高致病性病原微生物。,第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類病原微生物，是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。,結(jié)核分枝桿菌危害等級(jí),根據(jù)衛(wèi)生部病原微生物危害等級(jí)分類，結(jié)核分枝桿菌屬于第二類，即指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)

4、重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。,實(shí)驗(yàn)室的設(shè)立與管理,國(guó)家根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)病原微生物的生物安全防護(hù)水平，并依照實(shí)驗(yàn)室生物安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，將實(shí)驗(yàn)室分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)。,,,BSL-1,,,BSL-2,,,BSL-3,,,,,,原則：定向氣流,設(shè)施設(shè)備,標(biāo)準(zhǔn)操作程序,個(gè)人防護(hù)裝備,管理,,,,,實(shí)驗(yàn)室生物安全控制要素,結(jié)核菌是通過氣溶膠傳播,,涂片培養(yǎng)液的傾倒和轉(zhuǎn)移；高速混合含菌液體；

5、滴加、接種培養(yǎng)物；取樣器和振蕩器的使用；容器內(nèi)外壓力不同時(shí)打開容器,可能產(chǎn)生氣溶膠的操作,實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備操作及其危險(xiǎn)性,在實(shí)驗(yàn)室中使用離心機(jī)、攪拌機(jī)、勻漿機(jī)、振蕩器、超聲波粉碎儀和混合儀處理含有感染性結(jié)核菌的材料時(shí)，以及打開培養(yǎng)容器；凍干和過濾也可以產(chǎn)生感染性氣溶膠,保證實(shí)驗(yàn)室通風(fēng),保證實(shí)驗(yàn)室的窗戶可以通風(fēng)將含有氣溶膠的空氣與室外空氣進(jìn)行交換，以排出或稀釋氣溶膠濃度。,如果實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了正確的試驗(yàn)操作，那么與患者的一次不加防護(hù)的咳嗽相

6、比，在操作中產(chǎn)生的氣溶膠是很少的。,實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn),給予口罩或面巾 教會(huì)如何較衛(wèi)生的方式咳嗽 分開的區(qū)域侯診 盡快接受相關(guān)檢查(在排隊(duì)前) 轉(zhuǎn)診到專門的結(jié)核病診斷和治療場(chǎng)所(機(jī)構(gòu)),對(duì)結(jié)核病可疑癥狀者或結(jié)核病患者應(yīng)該采取：,根據(jù)我國(guó)發(fā)布的《人間傳染的病原微生物名錄》的要求，對(duì)于結(jié)核分枝桿菌大量活菌操作須在符合生物安全三級(jí)（BSL-3）的環(huán)境中進(jìn)行； 樣本檢測(cè)，包括樣本的病原菌分離純化、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)、生化鑒定、免疫學(xué)

7、實(shí)驗(yàn)、PCR核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測(cè)活動(dòng)，可以在符合生物安全二級(jí)（BSL-2）的環(huán)境中進(jìn)行。,結(jié)核分枝桿菌實(shí)驗(yàn)操作要求,用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜，柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，適用于生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1、2、3的媒質(zhì)的操作。Ⅱ級(jí)生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍的一類生物安全柜。,Ⅱ級(jí)生物安全柜,安全柜的最佳放置位置,安全柜應(yīng)該放在什么地方？盡量隔離安全柜降低人流盡量離開風(fēng)管出口盡量離開門和窗口,注

8、 意,,,,A,B,C,D,,,A ， B : 不可 D ，C : 建議,Installation,生物安全柜的使用,準(zhǔn)備：在開始工作前應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)中的操作步驟和所需設(shè)備，充分做好準(zhǔn)備工作。準(zhǔn)備好消毒劑和處理遺撒事件的物品。盡量減少房間內(nèi)的走動(dòng)，保證正常氣流。前窗開至適當(dāng)高度，打開安全柜的燈和風(fēng)機(jī)。讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作,生物安全柜的使用,操作：消毒桌面（75%酒精，使用紫外線作為

9、表面消毒的效果不一定能完全無(wú)菌）安全柜內(nèi)只放本次實(shí)驗(yàn)所需的物品。所有物品離前窗至少15cm，即在隔柵之后，所有污染性的操作盡量遠(yuǎn)離工作區(qū)域的后部。大物體之間要保持一定距離。,生物安全柜的使用,操作：干凈和被污染的物品分開放置；被污染的物品盡量不要進(jìn)入干凈區(qū)域，應(yīng)放置在工作區(qū)域的后部。操作時(shí)物品和手臂不要頻繁穿過前窗。操作完畢后，將物品表面用適當(dāng)?shù)南疽翰潦煤笠瞥觯孟疽翰潦冒踩駜?nèi)面。,,污染區(qū),工作區(qū),清潔區(qū),,,,不要覆

10、蓋前、后、側(cè)邊的隔柵,,,操作完畢后用消毒液擦拭安全柜內(nèi)面,生物安全柜內(nèi)發(fā)生意外應(yīng)急處理,用蘸取消毒液的紗布或紙巾覆蓋濺出物，靜置使消毒液和濺出物接觸至少15分鐘用適當(dāng)?shù)南疽翰潦脼R出物周圍表面或其他容器表面換新手套，凈化安全柜幾分鐘將污染物高壓滅菌,生物安全柜外發(fā)生意外應(yīng)急處理,發(fā)生重大濺灑事故時(shí)，所有人應(yīng)立即離開實(shí)驗(yàn)室，待氣溶膠沉降完全后再處理。,可以在 BSC內(nèi)用火焰 ?,在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免

11、使用明火。使用明火會(huì)對(duì)氣流產(chǎn)生影響。在對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí)，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應(yīng)使用明火。,高壓滅菌器使用,負(fù)責(zé)高壓滅菌的人員應(yīng)接受過良好的培訓(xùn)并持證上崗。滅菌前：檢查滅菌容器的蓋子，將蓋子旋松后再放入消毒物品。容器內(nèi)各種液體約裝八分滿，切勿裝滿。具有揮發(fā)性的物質(zhì)，不可高壓滅菌。滅菌前務(wù)必確定水位在正常要求水位以上。,高壓滅菌器使用,滅菌過程中：隨時(shí)查看所設(shè)定溫度（121度）、壓力是否正確。（121度，30分鐘）

12、滅菌后：開門前務(wù)必確定內(nèi)鍋壓力表已經(jīng)歸零。滅菌器中各項(xiàng)物品及滅菌器本身均高溫，取出物品時(shí)應(yīng)戴手套。隨時(shí)保持鍋內(nèi)清潔，以延長(zhǎng)使用年限。,個(gè)人防護(hù)裝備 (PPE),在生物安全實(shí)驗(yàn)室中，這些器材和用品主要是保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員免于暴露于生物危害物質(zhì)（氣溶膠、噴濺物以及意外接種等）危險(xiǎn)的一種物理屏障。,N95是感染防護(hù)的最低標(biāo)準(zhǔn)，N95口罩非常重要，“NIOSH”認(rèn)證。,,,不合格,個(gè)人防護(hù)裝置選擇原則,要求工作人員應(yīng)掌握的要點(diǎn)必須十分了解和

13、掌握自己工作性質(zhì)和特點(diǎn)所涉及的實(shí)驗(yàn)工作需要使用個(gè)人防護(hù)裝備的類型正確的使用方法使用前應(yīng)仔細(xì)檢查，不使用標(biāo)志不清、破損或泄漏的防護(hù)用品,,個(gè)人防護(hù),出實(shí)驗(yàn)室前，一定要洗手！,廢棄物處理,傳染性廢棄物對(duì)實(shí)驗(yàn)員和環(huán)境危險(xiǎn)性極大.在廢棄物離開實(shí)驗(yàn)室前必須高壓滅菌或去污染處理.,結(jié)核菌污染物品滅菌,結(jié)核分枝桿菌對(duì)濕熱敏感100℃煮沸5min可殺死痰中結(jié)核桿菌。121℃壓力蒸汽30min，可殺滅動(dòng)物臟器、痰或培養(yǎng)基中的結(jié)核分枝桿菌。,生