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1、實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一觀察觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布在細(xì)胞中的分布(必修一P26)一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模撼醪秸莆沼^察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法二實(shí)驗(yàn)原理:1甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色,可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。2鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)使染色休中的DNA和蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。
2、三方法步驟:操作步驟注意問(wèn)題解釋取口腔上皮細(xì)胞制片載玻片要潔凈,滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞將載玻片在酒精燈下烘干防止污跡干擾觀察效果保持細(xì)胞原有形態(tài)消毒為防止感染,漱口避免取材失敗固定裝片(細(xì)胞已死亡)水解將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸溶液中,用300C水浴保溫5min改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,促進(jìn)染色體的DNA與蛋白質(zhì)分離而被染色沖冼涂片用蒸餾水的緩水流
3、沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸染色滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min兩種溶液混合,現(xiàn)配現(xiàn)用觀察先低倍鏡觀察,選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察使觀察效果最佳實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(必修一P18)一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簢L試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)二實(shí)驗(yàn)原理:某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。1可
4、溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。如:加熱葡萄糖Cu(OH)2葡萄糖酸Cu2O↓(磚紅色)H2O,即Cu(OH)2被還原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍(lán)色。3蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。)三實(shí)驗(yàn)材料1做可溶性
5、還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn),應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因?yàn)榻M織的顏色較淺,易于觀察。)2做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡3~4小時(shí)(也可用蓖麻種子)。3做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。四、實(shí)驗(yàn)試劑斐林試劑(包括甲液:質(zhì)量濃度為0.1gmLNaOH溶液和乙液:質(zhì)量濃度為0.05gmLCuSO4溶液)、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑(包括A液:質(zhì)量濃度為0.1gmLNaO
6、H溶液和B液:質(zhì)量濃度為0.01gmLCuSO4溶液)、體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液,碘液、蒸三、蛋白質(zhì)的鑒定操作方法注意問(wèn)題解釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過(guò)濾。)黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購(gòu)新鮮豆?jié){以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻;再加入雙縮脲試劑B液3~4滴,搖勻,溶液變紫色。A液和B液也要分開(kāi)配制,儲(chǔ)存。鑒定時(shí)先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,為Cu2與蛋
7、白質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時(shí)加入,會(huì)導(dǎo)致Cu2變成Cu(OH)2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)顏色??捎玫扒宕娑?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。附:淀粉的檢測(cè)和觀察用試管取2ml待測(cè)組織樣液,向試管內(nèi)滴加2滴碘液,觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察考點(diǎn)提示:考點(diǎn)提示:(1)常見(jiàn)還原性糖與
8、非還原性糖有哪些?(2)還原性糖植物組織取材條件?(3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響?(4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用?(5)還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序?yàn)椋海?)花生種子切片為何要薄?(7)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí),若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?(8)脂肪鑒定中乙醇作用?(9)雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?(1)葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性
9、糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。(2)含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。(3)加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會(huì)使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。(4)混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。(5)淺藍(lán)色棕色磚紅色(6)只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。(7)切片的厚薄不均勻。(8)洗去浮色。(9)不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織
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