微生物檢測(cè)資料

1、柯赫法則：柯赫法則：1、在每一相同病例中都出現(xiàn)這種微生物；2、要從寄主分離出這樣的微生物并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)出來(lái)；3、用這種微生物的純培養(yǎng)接種健康而敏感的寄主，同樣的疾病會(huì)重復(fù)發(fā)生；4、從試驗(yàn)發(fā)病的寄主中能再度分離培養(yǎng)出這種微生物金黃色葡萄球菌引起急性腸胃炎；沙門氏菌引起傷寒、霍亂；溶血性鏈球菌引起猩紅熱；志賀氏菌引起菌痢。肉毒梭菌致死率可達(dá)30%—60%，產(chǎn)生的毒素是自然界毒性最強(qiáng)的蛋白質(zhì)，也可用來(lái)治療障礙性疾病微生物檢測(cè)：微生物檢測(cè)：就

2、是應(yīng)用微生物學(xué)的理論、方法和技術(shù)，對(duì)食品或藥品在研制、生產(chǎn)、保藏過(guò)程中進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)和安全性評(píng)價(jià)的專業(yè)技術(shù)學(xué)科。主要研究外界環(huán)境和食品或藥品中微生物的種類、數(shù)量、性質(zhì)、活動(dòng)規(guī)律及其對(duì)人和動(dòng)物健康的影響。微生物檢驗(yàn)意義微生物檢驗(yàn)意義是衡量食品和藥品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，是判定被檢食品或藥品能否食用或藥用的科學(xué)依據(jù)之一。是判斷食品和藥品加工原料、生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生情況及對(duì)成品被污染的程度作出正確的評(píng)價(jià)，為衛(wèi)生管理工作提供科學(xué)依據(jù)。微生物檢驗(yàn)貫徹“

3、預(yù)防為主”的衛(wèi)生方針，有效的防止或減少食物中、藥品毒害、人獸共患病的發(fā)生。保障人民身體健康。提高產(chǎn)品質(zhì)量，避免經(jīng)濟(jì)損失。微生物檢測(cè)對(duì)象微生物檢測(cè)對(duì)象(1)食品(2)化妝品(3)藥品(4)一次性用品及其他生活用品(5)應(yīng)施檢疫的出口動(dòng)物產(chǎn)品(6)環(huán)境(7)有關(guān)國(guó)際條約或其他法律、法規(guī)規(guī)定的強(qiáng)制性衛(wèi)生檢驗(yàn)的進(jìn)出口商品二、微生物檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展迫切需求靈敏度更高、特異性更強(qiáng)、簡(jiǎn)便快捷的微生物檢測(cè)技術(shù)和方法，建立和完善適應(yīng)國(guó)際貿(mào)易的各類產(chǎn)品微生物

4、檢測(cè)技術(shù)和體系迫在眉睫。傳統(tǒng)檢驗(yàn)技術(shù)顯微技術(shù)顯微技術(shù)，實(shí)驗(yàn)室中常用的有普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡和電子顯微鏡等。利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常見的微生物計(jì)總數(shù)的方法。革蘭氏染色技術(shù)：是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法。培養(yǎng)計(jì)數(shù)法：平板菌落計(jì)數(shù)法平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞取一定量的稀釋樣液涂在平板上經(jīng)過(guò)培養(yǎng)由每個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖而形成肉眼可見的菌落即一個(gè)單菌落

5、應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)?，F(xiàn)代微生物檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀趨勢(shì)：現(xiàn)狀趨勢(shì)：都致力于快速、簡(jiǎn)便、特異、敏感、低耗且實(shí)用的檢測(cè)技術(shù)和方法的研究研究的技術(shù)手段產(chǎn)生了很大的變革：已由培養(yǎng)水平逐步向分子水平邁進(jìn)；近年來(lái)興起的基因芯片技術(shù)及自動(dòng)微生物檢測(cè)系統(tǒng)，將從根本上改變微生物的檢測(cè)方法；氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用等現(xiàn)代儀器分析法也應(yīng)用于微生物檢測(cè)中。微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制措施：微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

6、措施：(1)應(yīng)嚴(yán)格按照國(guó)家規(guī)定對(duì)試驗(yàn)儀器、設(shè)設(shè)備、器具進(jìn)行定期的檢定、維護(hù)和保養(yǎng)。(2)嚴(yán)格控制培養(yǎng)基、試劑、染色及診斷血清的質(zhì)量(3)確保菌株的良好保存，標(biāo)準(zhǔn)菌株和從樣品中分離出的菌株，其保存方法有多種，最理想的為真空冷凍干燥法，但這種方法的操作技術(shù)難度大，花費(fèi)高，需特殊設(shè)備，（1）采集好的樣品送檢要及時(shí)，一般不應(yīng)超過(guò)3h，否則應(yīng)保持在15℃的環(huán)境中。（2）不得加入防腐劑（3）對(duì)于易死亡病原菌的樣品，可采用運(yùn)送培養(yǎng)基，如：小腸結(jié)腸炎耶

7、氏菌、空腸彎曲菌可用CaryBlair運(yùn)送培養(yǎng)基（4）送檢時(shí)，必須認(rèn)真填寫申請(qǐng)單，注明特殊要求以供檢驗(yàn)人員參考。四、樣品的處理四、樣品的處理1、基本要求（1）需將供試品制備成供試溶液或懸浮液。供試液的制備不得改變污染微生物的數(shù)量和種類。（2）做多項(xiàng)檢驗(yàn)（微生物、化學(xué)、藥理）時(shí)：首先取出規(guī)定量的供試品供微生物學(xué)檢驗(yàn)，其余部分做其他檢驗(yàn)。（3）供試品收檢后，應(yīng)及時(shí)檢驗(yàn)，否則，應(yīng)存放在規(guī)定的儲(chǔ)存條件下。（4）在檢驗(yàn)之前，應(yīng)保持原包裝狀態(tài)，嚴(yán)禁

8、開啟。（5）供試品的取樣必須在凈化條件下，無(wú)菌操作。（6）含有抑菌成分的供試品，消除抑菌成分的干擾。供試液制備的一般方法供試液制備的一般方法液體樣品：液體樣品：直接用吸管吸取準(zhǔn)確用量，制成1：10的稀釋液。含CO2的液體，覆蓋滅菌紗布輕輕搖蕩，待全部逸出后檢驗(yàn)酸性液體用滅菌的碳酸鈉調(diào)至中性后再檢驗(yàn)有抑菌成分的樣品的處理有抑菌成分的樣品的處理離心沉淀集菌法、樹脂吸附法、加入滅活劑、薄膜過(guò)濾法第三章第三章各類微生物檢樣的制備各類微生物檢樣的

9、制備各種蛋制品沙門氏菌增菌培養(yǎng)各種蛋制品沙門氏菌增菌培養(yǎng)：無(wú)菌操作稱取檢樣，接種于亞硒酸鹽煌綠或煌綠肉湯增菌培養(yǎng)基中（有玻璃珠），搖勻后，在37℃溫箱中培養(yǎng)20h。水產(chǎn)品水產(chǎn)品采樣：現(xiàn)場(chǎng)采取水產(chǎn)樣品時(shí)，按檢驗(yàn)?zāi)康暮退a(chǎn)品的種類確定采樣量。別大型魚類和海獸只能割取其局部作為樣品，一般都采完整的個(gè)體，待檢驗(yàn)時(shí)再按要求在一定部位采取檢樣。當(dāng)對(duì)一批水產(chǎn)品作質(zhì)量判斷時(shí)，仍須采取多個(gè)個(gè)體作多件檢樣以反映全面質(zhì)量；抑菌性供試品抑菌性供試品抑菌性藥物的

10、判定處理原則判定處理原則（1）對(duì)具有抑菌作用但在試驗(yàn)條件下不影響待檢菌檢出的藥物，不需特殊處理（2）對(duì)具有強(qiáng)抗菌作用的抗生素類藥品，暫不做微生物限度檢查（3）對(duì)一般性抑菌性供試品，在檢查條件下對(duì)待檢菌的檢出或菌數(shù)計(jì)數(shù)產(chǎn)生干擾者，要消除抑菌作用。如何判定待檢藥物具有抑菌性判定待檢藥物具有抑菌性？判定：國(guó)外藥典一般以加有供試液和不含供試液的檢樣中加入定量的已知菌（50200個(gè)mL），經(jīng)培養(yǎng)檢查后，加入的對(duì)照菌能正常檢出，加有供試液的菌落數(shù)和

11、未加供試液的菌落數(shù)比較，后者不應(yīng)超過(guò)前者的5倍及10倍，否則表明該供試品具有抑菌作用。抑菌性藥物供試液的制備方法：抑菌性藥物供試液的制備方法：（1）稀釋法：增加稀釋倍數(shù)（2）沉降法：當(dāng)抑菌性成分溶解度小時(shí)（3）離心沉淀法：差速離心法（4）薄膜過(guò)濾法：5）中和法：（6）吸附法:第四章第四章衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)一、菌落總數(shù)一、菌落總數(shù)(Total(Totalcolonycolonycount)count)是指1mL或1g樣品中所含的