微生物檢測資料

1、柯赫法則：柯赫法則：1、在每一相同病例中都出現(xiàn)這種微生物；2、要從寄主分離出這樣的微生物并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)出來；3、用這種微生物的純培養(yǎng)接種健康而敏感的寄主，同樣的疾病會重復發(fā)生；4、從試驗發(fā)病的寄主中能再度分離培養(yǎng)出這種微生物金黃色葡萄球菌引起急性腸胃炎；沙門氏菌引起傷寒、霍亂；溶血性鏈球菌引起猩紅熱；志賀氏菌引起菌痢。肉毒梭菌致死率可達30%—60%，產(chǎn)生的毒素是自然界毒性最強的蛋白質(zhì)，也可用來治療障礙性疾病微生物檢測：微生物檢測：就

2、是應用微生物學的理論、方法和技術，對食品或藥品在研制、生產(chǎn)、保藏過程中進行質(zhì)量檢測和安全性評價的專業(yè)技術學科。主要研究外界環(huán)境和食品或藥品中微生物的種類、數(shù)量、性質(zhì)、活動規(guī)律及其對人和動物健康的影響。微生物檢驗意義微生物檢驗意義是衡量食品和藥品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標之一，是判定被檢食品或藥品能否食用或藥用的科學依據(jù)之一。是判斷食品和藥品加工原料、生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生情況及對成品被污染的程度作出正確的評價，為衛(wèi)生管理工作提供科學依據(jù)。微生物檢驗貫徹“

3、預防為主”的衛(wèi)生方針，有效的防止或減少食物中、藥品毒害、人獸共患病的發(fā)生。保障人民身體健康。提高產(chǎn)品質(zhì)量，避免經(jīng)濟損失。微生物檢測對象微生物檢測對象(1)食品(2)化妝品(3)藥品(4)一次性用品及其他生活用品(5)應施檢疫的出口動物產(chǎn)品(6)環(huán)境(7)有關國際條約或其他法律、法規(guī)規(guī)定的強制性衛(wèi)生檢驗的進出口商品二、微生物檢測技術的發(fā)展迫切需求靈敏度更高、特異性更強、簡便快捷的微生物檢測技術和方法，建立和完善適應國際貿(mào)易的各類產(chǎn)品微生物

4、檢測技術和體系迫在眉睫。傳統(tǒng)檢驗技術顯微技術顯微技術，實驗室中常用的有普通光學顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡和電子顯微鏡等。利用血細胞計數(shù)器在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常見的微生物計總數(shù)的方法。革蘭氏染色技術：是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法。培養(yǎng)計數(shù)法：平板菌落計數(shù)法平板菌落計數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當稀釋之后其中的微生物充分分散成單個細胞取一定量的稀釋樣液涂在平板上經(jīng)過培養(yǎng)由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落即一個單菌落

5、應代表原樣品中的一個單細胞。統(tǒng)計菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。現(xiàn)代微生物檢測技術現(xiàn)狀趨勢：現(xiàn)狀趨勢：都致力于快速、簡便、特異、敏感、低耗且實用的檢測技術和方法的研究研究的技術手段產(chǎn)生了很大的變革：已由培養(yǎng)水平逐步向分子水平邁進；近年來興起的基因芯片技術及自動微生物檢測系統(tǒng)，將從根本上改變微生物的檢測方法；氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用等現(xiàn)代儀器分析法也應用于微生物檢測中。微生物檢驗的質(zhì)量控制措施：微生物檢驗的質(zhì)量控制

6、措施：(1)應嚴格按照國家規(guī)定對試驗儀器、設設備、器具進行定期的檢定、維護和保養(yǎng)。(2)嚴格控制培養(yǎng)基、試劑、染色及診斷血清的質(zhì)量(3)確保菌株的良好保存，標準菌株和從樣品中分離出的菌株，其保存方法有多種，最理想的為真空冷凍干燥法，但這種方法的操作技術難度大，花費高，需特殊設備，（1）采集好的樣品送檢要及時，一般不應超過3h，否則應保持在15℃的環(huán)境中。（2）不得加入防腐劑（3）對于易死亡病原菌的樣品，可采用運送培養(yǎng)基，如：小腸結腸炎耶

7、氏菌、空腸彎曲菌可用CaryBlair運送培養(yǎng)基（4）送檢時，必須認真填寫申請單，注明特殊要求以供檢驗人員參考。四、樣品的處理四、樣品的處理1、基本要求（1）需將供試品制備成供試溶液或懸浮液。供試液的制備不得改變污染微生物的數(shù)量和種類。（2）做多項檢驗（微生物、化學、藥理）時：首先取出規(guī)定量的供試品供微生物學檢驗，其余部分做其他檢驗。（3）供試品收檢后，應及時檢驗，否則，應存放在規(guī)定的儲存條件下。（4）在檢驗之前，應保持原包裝狀態(tài)，嚴禁

8、開啟。（5）供試品的取樣必須在凈化條件下，無菌操作。（6）含有抑菌成分的供試品，消除抑菌成分的干擾。供試液制備的一般方法供試液制備的一般方法液體樣品：液體樣品：直接用吸管吸取準確用量，制成1：10的稀釋液。含CO2的液體，覆蓋滅菌紗布輕輕搖蕩，待全部逸出后檢驗酸性液體用滅菌的碳酸鈉調(diào)至中性后再檢驗有抑菌成分的樣品的處理有抑菌成分的樣品的處理離心沉淀集菌法、樹脂吸附法、加入滅活劑、薄膜過濾法第三章第三章各類微生物檢樣的制備各類微生物檢樣的

9、制備各種蛋制品沙門氏菌增菌培養(yǎng)各種蛋制品沙門氏菌增菌培養(yǎng)：無菌操作稱取檢樣，接種于亞硒酸鹽煌綠或煌綠肉湯增菌培養(yǎng)基中（有玻璃珠），搖勻后，在37℃溫箱中培養(yǎng)20h。水產(chǎn)品水產(chǎn)品采樣：現(xiàn)場采取水產(chǎn)樣品時，按檢驗目的和水產(chǎn)品的種類確定采樣量。別大型魚類和海獸只能割取其局部作為樣品，一般都采完整的個體，待檢驗時再按要求在一定部位采取檢樣。當對一批水產(chǎn)品作質(zhì)量判斷時，仍須采取多個個體作多件檢樣以反映全面質(zhì)量；抑菌性供試品抑菌性供試品抑菌性藥物的

10、判定處理原則判定處理原則（1）對具有抑菌作用但在試驗條件下不影響待檢菌檢出的藥物，不需特殊處理（2）對具有強抗菌作用的抗生素類藥品，暫不做微生物限度檢查（3）對一般性抑菌性供試品，在檢查條件下對待檢菌的檢出或菌數(shù)計數(shù)產(chǎn)生干擾者，要消除抑菌作用。如何判定待檢藥物具有抑菌性判定待檢藥物具有抑菌性？判定：國外藥典一般以加有供試液和不含供試液的檢樣中加入定量的已知菌（50200個mL），經(jīng)培養(yǎng)檢查后，加入的對照菌能正常檢出，加有供試液的菌落數(shù)和

11、未加供試液的菌落數(shù)比較，后者不應超過前者的5倍及10倍，否則表明該供試品具有抑菌作用。抑菌性藥物供試液的制備方法：抑菌性藥物供試液的制備方法：（1）稀釋法：增加稀釋倍數(shù)（2）沉降法：當抑菌性成分溶解度小時（3）離心沉淀法：差速離心法（4）薄膜過濾法：5）中和法：（6）吸附法:第四章第四章衛(wèi)生細菌學檢驗衛(wèi)生細菌學檢驗一、菌落總數(shù)一、菌落總數(shù)(Total(Totalcolonycolonycount)count)是指1mL或1g樣品中所含的