生物學(xué)實驗 瓊脂糖凝膠的電泳

1、實驗四實驗四DNADNA的瓊脂糖凝膠電泳的瓊脂糖凝膠電泳帶電荷的物質(zhì)在電場中的趨向運動稱為電泳。電泳的種類多，應(yīng)用非常廣泛，它已成為分子生物學(xué)技術(shù)中分離生物大分子的重要手段。瓊脂糖凝膠電泳由于其操作簡單、快速、靈敏等優(yōu)點，已成為分離和鑒定核酸的常用方法。實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康模赫莆窄傊悄z電泳的原理，學(xué)習(xí)瓊脂糖凝膠電泳的操作。熟練DNA電泳的點樣技術(shù)。實驗材料實驗材料：基因組DNA。實驗原理實驗原理：在pH值為8.0～8.3時，核酸分子堿基

2、幾乎不解離，磷酸全部解離，核酸分子帶負(fù)電，在電泳時向正極移動。采用適當(dāng)濃度的凝膠介質(zhì)作為電泳支持物，在分子篩的作用下，使分子大小和構(gòu)象不同的核酸分子泳動率出現(xiàn)較大的差異，從而達到分離核酸片段檢測其大小的目的。核酸分子中嵌入熒光染料（如EB）后，在紫外燈下可觀察到核酸片段所在的位置。實驗步驟實驗步驟：1用膠帶將洗凈、干燥的制膠板的兩端封好，水平放置在工作臺上；2調(diào)整好梳子的高度；3稱取0.24g瓊脂糖于30ml0.5TBE中，在微波爐中使

3、瓊脂糖顆粒完全溶解，冷卻至4550C時倒入制膠板中；4凝膠凝固后，小心拔去梳子，撕下膠帶；7)電泳緩沖液（0.5TBE）的組成及其離子強度影響DNA的遷移率，無離子存在時，核酸基本不泳動，離子強度過大產(chǎn)熱厲害，熔化凝膠并導(dǎo)致DNA變性，一般采用1TAE，1TBE，1TPE（均含EDTApH8.0）。2溴化乙錠（EB）為致癌劑，操作時應(yīng)戴手套，盡量減少臺面污染。3電泳指示劑：核酸電泳常用的指示劑有兩種，溴酚藍（bromophenolblu