創(chuàng)傷弧菌檢測方法

1、申報(bào)近海水域創(chuàng)傷弧菌檢出率調(diào)查的檢測方法確定申報(bào)近海水域創(chuàng)傷弧菌檢出率調(diào)查的檢測方法確定1.1.概述概述創(chuàng)傷弧菌是一種可能致命的病原菌，深入了解水體、海產(chǎn)品等各種環(huán)境中創(chuàng)傷弧菌的生態(tài)學(xué)，將有助于降低消費(fèi)者感染創(chuàng)傷弧菌的風(fēng)險(xiǎn)。目前創(chuàng)傷弧菌檢測方法主要有傳統(tǒng)分離鑒定方法、免疫學(xué)及基因檢測方法[1]，介于當(dāng)前本中心的實(shí)驗(yàn)條件，適宜采用傳統(tǒng)分離鑒定方法。以下對該方法進(jìn)行表述。2.2.傳統(tǒng)分離鑒定方法傳統(tǒng)分離鑒定方法2.1儀器與試劑2.1.1創(chuàng)傷

2、弧菌標(biāo)準(zhǔn)菌株創(chuàng)傷弧菌屬于危害程度第三類病原微生物[2]，本實(shí)驗(yàn)室已配備生物安全柜，具有BSL2實(shí)驗(yàn)室水平，滿足第三類病原微生物的操作要求。在準(zhǔn)備階段，需購買創(chuàng)傷弧菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC27562）進(jìn)行方法確認(rèn)。2.1.2選擇性培養(yǎng)基選擇性原理：①以纖維二糖為碳源，創(chuàng)傷弧菌利用纖維二糖后產(chǎn)生黃色菌落，便于與其他菌落區(qū)分。②添加了抗生素，所添加的抗生素對創(chuàng)傷弧菌的抑制作用較小，而對其他大多數(shù)細(xì)菌的生長具有較強(qiáng)的抑制作用。③培養(yǎng)溫度高，在較高溫

3、度條件下，創(chuàng)傷弧菌能正海產(chǎn)品處理：稱取5g可食部分樣品加入200mL堿性蛋白胨進(jìn)行無菌均質(zhì)，置于30℃培養(yǎng)18~24小時(shí)。取培養(yǎng)物進(jìn)行10倍梯度稀釋，選擇3個(gè)連續(xù)的適宜稀釋度劃線選擇性平板，每個(gè)稀釋度涂布2個(gè)平板，于36℃進(jìn)行培養(yǎng)25d。對平板上生長的可疑菌落進(jìn)行生化鑒定。2.2.3分析方法2.2.3.1按檢測時(shí)間整理數(shù)據(jù)，分析創(chuàng)傷弧菌檢出率與季節(jié)（氣候、溫度等條件）的關(guān)系。2.2.3.2按抽樣地點(diǎn)整理數(shù)據(jù)，分析創(chuàng)傷弧菌檢出率與地理環(huán)境

4、的關(guān)系。2.2.3.3比對同一區(qū)域內(nèi)，海水創(chuàng)傷弧菌檢出率與海產(chǎn)品創(chuàng)傷弧菌檢出率的關(guān)系。參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)[1]陳艷，付萍.創(chuàng)傷弧菌檢測方法的研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊，200835(2):9196.[2]中華人民共和國衛(wèi)生部.人間傳染的病原微生物名錄.中華人民共和國衛(wèi)生部制定二○○六年一月十一日.[3]張新中，文萬僥，徐先棟，等.創(chuàng)傷弧菌(Vibriovulnificus)五種選擇性培養(yǎng)基的比較分析[J].現(xiàn)代漁業(yè)信息200722