有機錫致疣荔枝螺性畸變的分子機制研究.pdf

1、本文主要探討有機錫污染致海洋軟體動物出現(xiàn)異常形態(tài)特征——性畸變的分子機制,選取了受有機錫污染后高頻率出現(xiàn)性畸變的疣荔枝螺為實驗材料,從性別形態(tài)特征、蛋白質(zhì)、DNA以及RNA等水平對雌、雄和性畸變不同階段個體進行了研究,主要研究結(jié)果如下:
　　對有機錫污染差異顯著的兩個采樣點進行疣荔枝螺性別形態(tài)調(diào)查分析,從輕度污染的南澳島采集到的疣荔枝螺性畸變率極低(性畸變率僅為0.57％),而由污染嚴(yán)重的廣澳灣采集到的該螺性畸變率幾乎達到100%

2、,表明有機錫污染與其性畸變現(xiàn)象關(guān)系密切;大多數(shù)畸變個體處在初級和中期階段,畸變程度嚴(yán)重的個體較少,證明性畸變現(xiàn)象是一個漸近的過程。
　　通過從蛋白質(zhì)水平檢測疣荔枝螺個體間的差異,證明有機錫污染導(dǎo)致性畸變個體的多項生化指標(biāo)出現(xiàn)了有規(guī)律的變化。其中SDS-PAGE和同工酶分析表明,隨著雌螺性畸變個體逐漸在形態(tài)上出現(xiàn)與雄性個體相似的器官,其體內(nèi)蛋白表達情況和表達量也有向雄性個體發(fā)展的趨向;SOD、LPO和CAT活性(或含量)測定的結(jié)果顯

3、示,SOD隨著性畸變程度的加重,其在螺體內(nèi)的活力先下降后上升,即在性畸變初期階段(I1階段)活力開始降低,在性畸變第二階段(I2階段)活力降到最低點,隨后活力又呈上升趨勢;而LPO含量和CAT活力隨著性畸變的加重,在螺體內(nèi)的變化趨勢與SOD的變化相反,為先上升后下降,變化的轉(zhuǎn)折點也出現(xiàn)在I2階段。
　　本項研究選用了40個隨機引物對采自汕頭廣澳灣的雄性、雌性及性畸變不同階段疣荔枝螺個體進行了RAPD-PCR擴增,結(jié)果有10個引物能

4、擴增出清晰DNA片段,共擴增出170條片段,其中差異性片段40條,證實了來自污染區(qū)螺的DNA出現(xiàn)了不正常的變化,推測致使其DNA變化的原因可能與有機錫的污染有一定的相關(guān)性。另外對來自mRNA差異顯示的片段進行引物設(shè)計,用此引物對螺個體基因組DNA進行檢測,結(jié)果也證實了有機錫污染對其DNA的隨機性損傷作用。
　　另外,本研究通過mRNA差異顯示技術(shù),檢測到1條雌、雄性別間cDNA差異表達片段,對此片段進行回收,并進行二次擴增、克隆和