家畜繁殖學(xué)-第六章-人工授精

1、第六章 人工授精,Chapter 6 Artificial Insemination,本章內(nèi)容,第一節(jié) 概述 Section 1 Introduction第二節(jié) 采精 Section 2 Semen collection第三節(jié) 精液品質(zhì)檢查 Section 3 Semen quality examination 第四節(jié) 精液的稀釋 Section 4 Se

2、men extend and extenders第五節(jié) 精液保存 Section 5 Semen storage第六節(jié) 輸精 Section 6 Insemination,第一節(jié) 概 述,一、概念二、意義三、AI發(fā)展概況,一、AI 概念 利用器械采集公畜的精液，經(jīng)檢查和處理后，再用器械將精液輸入到母畜生殖道的適當(dāng)部位，使之妊娠，以此來代替公母畜自然交配一種科學(xué)配種方法。,,二、人工授精的優(yōu)越性

3、,提高了優(yōu)良種公畜的配種效能和種用價(jià)值，降低了飼養(yǎng)管理費(fèi)用；,加速家畜品種改良，促進(jìn)育種工作；,防止各種疾病，特別是生殖道傳染病的傳播；,有利于提高母畜的受胎率；,克服地域限制和雜交改良的大小懸殊困難；,優(yōu)越性,為開展胚胎移植、同期發(fā)情等繁殖技術(shù)研究提供了有效手段。,,三、人工授精的局限性,通過人工授精可能使不良公畜的影響范圍更大；,必須投入一定資金，進(jìn)行房舍建設(shè)和設(shè)備購置；,必須進(jìn)行人員的技術(shù)培訓(xùn)， 不良的操作會(huì)造成更嚴(yán)重的問題。,

4、四、AI的發(fā)展簡況,我國人工授精技術(shù)發(fā)展史,,,,,1935年,60-70年代,70-80年代初,在江蘇句容馬場試驗(yàn)成功；,在北方開展馬、綿羊人工授精，推動(dòng)馬、細(xì)毛羊品種育種；,60年代開展牛人工授精，70年代冷凍精液；,豬人工授精，尤江蘇好，并建立良種推廣站。,50年代,第二節(jié) 采 精,一、采精前的準(zhǔn)備 Preparations二、采精方法 Collecting methods三、采精頻率

5、 Frequency of semen collection,第三節(jié) 精液品質(zhì)檢查,檢查的目的檢查精液品質(zhì)的優(yōu)劣，判定種公畜的配種能力 檢查公畜的繁殖問題 確定精液可稀釋的倍數(shù) 檢查精液的處理方法是否正確采精時(shí)精液是否受到污染和采精技術(shù)好壞程度的工作。,內(nèi)容： 外觀檢查 顯微鏡檢查（精子活率、密度、形態(tài)） 微生物檢查 精子代謝能力檢查

6、 其他檢查（受胎效果）,一、精液外觀性狀檢查法（一）精液量(ml) 奶牛：5-10；肉牛：4-8； 綿羊：0.8-1.2 ； 豬：150-300；山羊：0.5-1.5；馬：30-100,（二）顏色與氣味 一般為乳白色或灰白色。氣味略有腥味。,(三)云霧狀 濃份精液因精子密度大、活力強(qiáng)，使精液翻騰呈現(xiàn)旋渦云霧狀。（四）pH值 牛、羊精液pH值為6.5-6.9, 豬、馬為

7、7.4-7.5。一般同種精液pH值較低的品質(zhì)較好。（五）雜質(zhì) 如被毛、脫落上皮、炎性分泌物、灰塵、纖絲。,二、精子活率檢查精子活率：在顯微鏡下觀察，在一個(gè)視野內(nèi)向直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子占全部精子總數(shù)的百分率。?一般在37-38°C溫度下進(jìn)行評定，牛、羊精液尚需用生理鹽水作稀釋后才能評定。 ?活力一般用0-1.0的10級(jí)評分，一般新鮮采精液活率應(yīng)該為0.7~0.8左右。,三、精子密度的檢

8、查精子密度：是指單位體積（ml）精液內(nèi)所含有的精子數(shù)。,(一）目測法：在低倍顯微鏡下根據(jù)精子之間的距離來定，分為密、中和稀三等。,（二）血細(xì)胞計(jì)數(shù)法： 精子數(shù)量/ml=5×5×10×1000×稀釋倍數(shù),,（三）光電比色法：是根據(jù)精子的透光性而測定精子數(shù)的方法。透光性越高，則精子數(shù)越少，透光性越差，則精子數(shù)越多?，F(xiàn)在甚至可與計(jì)算機(jī)聯(lián)接，立即知道被測精液的活率和密度。,（四）流式細(xì)胞

9、儀,四、精子的形態(tài)檢查1、精子畸形率：頭部、頸部、尾部，觀察200個(gè)精子，求出比例。用于輸精的精子畸形率不得超過20%。 頭部：巨大，細(xì)小，缺失，雙頭，輪 廓不明顯，皺縮 頸部：臌大，纖細(xì)，彎曲，不全，原 生質(zhì)滴 尾部：屈折，帶原生質(zhì)滴，雙尾，折 斷，纖細(xì),畸形精子類型圖,雙頭和雙尾精子,頂體與精子受精能力直接有關(guān)，牛超過

10、 14%，豬超過4.3%時(shí)會(huì)直接影響受胎率。,2、精子頂體異常率,精子頂體異常圖,五、精子代謝能力檢查（一）精子生存時(shí)間和生存指數(shù) 精子生存時(shí)間：指精子在體外一定條件下（稀釋液、稀釋倍數(shù)、保存溫度和方法等）的總生存時(shí)間。具體算法：所有間隔時(shí)間累加后減去最后兩次間隔時(shí)間的一半即為精子的存活時(shí)間。精子生存指數(shù)：相鄰兩次檢查的間隔時(shí)間與平均活力的積之和。?是精子存活時(shí)間與精子活率下降變化的一項(xiàng)綜合指標(biāo)。?精子生

11、存時(shí)間越長，則生存指數(shù)越大，說明精子生活力越強(qiáng)，品質(zhì)越好。,生存時(shí)間：48-8/2=44h,生存指數(shù)： h×平均活率=16.8,（二）美藍(lán)褪色試驗(yàn) 美藍(lán)是氧化還原劑，氧化呈藍(lán)色，還原呈無色，精子在美藍(lán)溶液中，呼吸時(shí)氧化脫氫，美藍(lán)獲得H+后便使藍(lán)色還原為無色。因此，根據(jù)美藍(lán)褪色時(shí)間可測知精液中存活精子數(shù)量多少，判定精子的活率和密度高低。 （三）精液果糖分解測定 精液果糖分解能

12、力與精子活力密切相關(guān)，因此測定一億精子每小時(shí)消耗果糖的mg數(shù)來表示 精子的果糖分解能力，甚至反映精子活率和密度的高低。,第四節(jié) 精液的稀釋 Section 4 Semen dilution,一、精液稀釋的目的 Aims of semen dilution二、稀釋液的成分及作用 Composition of extenders (diluents)三、稀釋液的種類和配制 T

13、ypes and make-up of extenders (diluents)四、精液稀釋方法和稀釋倍數(shù) Methods and multiple of semen dilution,一、精液稀釋目的1、精液稀釋定義：往精液中加入適宜于精子體外存活，保持其受精能力的溶液。2、精液稀釋目的（1）擴(kuò)大精液量—增加可配母畜頭數(shù)；（2）延長存活時(shí)間；（3）便于運(yùn)輸和保存。,,二、精液稀釋液的成分及作用,,,擴(kuò)

14、大容量用。如生理鹽水、等滲葡萄糖等。,,,提供精子營養(yǎng)、能量。如糖類、卵黃、奶類。,,,有激素類、酶類、維生素類。,營養(yǎng)物質(zhì),其它添加劑,稀釋劑,,,,,,,保護(hù)劑,保護(hù)精子免受外界影響。如甘油、抗菌劑。,三、稀釋液的種類和配置（一）稀釋液的種類 1、現(xiàn)用稀釋液 奶類和等滲糖類為主。 2、常溫保存稀釋液 用于常溫保存精液，pH較低。 3、低溫保存稀釋液 用于低溫保存精液，含有卵黃和

15、奶類等抗冷休克物質(zhì)。 4、冷凍保存稀釋液 用于冷凍保存精液，含抗凍物質(zhì)如甘油DMSO 。,,（二）稀釋液的配制方法,用具先清洗、消毒、干燥,先配制基礎(chǔ)液,水浴消毒,準(zhǔn)確稱取藥品、量取定量的蒸餾水,冷卻后按比例加入抗生素、卵黃、甘油,溶解過濾,冷 卻,,,,,,,,四、稀釋方法和稀釋倍數(shù),立即稀釋 精液經(jīng)檢查合格后應(yīng)立即進(jìn)行稀釋，越快越好 等溫稀釋 稀釋時(shí)，稀釋液的溫度和精液的溫度必須調(diào)整一致，以30-35℃為宜；

16、緩慢稀釋 稀釋時(shí)，將稀釋液沿精液瓶或玻璃棒緩慢倒入，同時(shí)搖動(dòng)精液瓶稀釋； 分次稀釋 若作高倍稀釋，應(yīng)先低倍后高倍，分次進(jìn)行稀釋； 稀釋后立即鏡檢，活力應(yīng)和稀釋前一樣； 稀釋后精液立即進(jìn)行分裝（一般按一頭母畜的輸精量）保存。,（一）稀釋方法,（二）稀釋倍數(shù) 確定精液稀釋倍數(shù)應(yīng)依據(jù)精液的密度、活率及有效精子數(shù)。,家畜精液的稀釋倍數(shù),稀釋倍數(shù)的計(jì)算,原精液的有效精子數(shù) 密度×使用前精液活力 稀釋后要達(dá)到的有效精

17、子數(shù) 每劑量要求的有效精子數(shù)÷劑量 計(jì)算稀釋倍數(shù) 原精液的有效精子數(shù)÷稀釋后要達(dá)到的有效精子數(shù) 精液分裝數(shù)的計(jì)算 原精液量×稀釋倍數(shù)÷劑量,現(xiàn)行的精液保存方式有三種：常溫保存（15-25 ℃）低溫保存（0-5 ℃）冷凍保存（-79 ℃或-196 ℃）,第五節(jié) 精液的保存Section 5 Semen Storage,,,,,液態(tài)保存,,固態(tài)保存,一、常溫保存（15-

18、25 ℃），變溫保存1、原理：是利用一定范圍的酸性環(huán)境，抑制精子的活動(dòng)，使精子保持可逆的靜止?fàn)顟B(tài)而不喪失受精力。2、稀釋液：（1）能量物：如葡萄糖 ；（2）緩沖體系：如檸檬酸鈉、碳酸氫鈉 ；（3）抗生素：如青、鏈霉素等。3、方法：隔水降溫。 天熱時(shí)，盡可能降低保存溫度如放入水井、水缸； 天冷時(shí)，放在有暖氣的室內(nèi)。,適合豬精液保存（15～17℃）,二、低溫保存（0-5 ℃）1、原理：利用較低的溫度來減弱精子的活動(dòng)

19、和代謝，從而延長精子的生命。2、低溫保存稀釋液： 除室溫保存液應(yīng)具有的成分外（不充CO2），在牛用的稀釋液還需用加卵黃或牛奶。,為何要添加？,3、保存前的處理（1）稀釋分裝：低溫保存的精液通常用玻璃或塑料瓶分裝，瓶內(nèi)盡量不留空氣，然后封口;（2）降溫處理：通常按0.2℃/min降至保存溫度;（3）保存方法：牛羊精液置于0~5 ℃，豬精液須特殊改造的冰箱或用泡沫盒內(nèi)放冰塊，精液用一塊泡沫墊在上面；（看后圖）（4）低溫保存精液的利

20、用：低溫保存的精液在使用前應(yīng)該用水浴升溫至30℃。4、液態(tài)精液的運(yùn)輸（1）包裝好、做好標(biāo)記（種類、品種、畜號(hào)、時(shí)間）；（2）運(yùn)輸中避光、防震并保持溫度。,三、精液冷凍保存(-79 ℃或-196 ℃) 定義：是利用液態(tài)氮（-196 ℃）或干冰（-79℃） ，作為冷源，將精子和精液冷凍成固體，并在液態(tài)氮或干冰中作超低溫永久保存。 意義： （１）提高優(yōu)良種公畜的配種效能； （２）便于冷凍精

21、液的自動(dòng)化生產(chǎn)； （３）便于引種；　 （４）加快改良和育種； （５）推進(jìn)繁殖新技術(shù)的應(yīng)用； （６）建立動(dòng)物基因庫。,（一）精液冷凍保存原理 目前關(guān)于精液冷凍的原理普遍傾向于玻璃化學(xué)說。原理：利用超低溫使精液和精子快速冷凍，快速越過形成冰晶的溫度范圍（0~-60 ℃）、精液或精子中的水分不形成冰晶，而是形成玻璃化。 同時(shí)在抗凍劑的存在下使精子免受凍傷，在溫度上升至體溫精液解凍

22、后精子能夠保持完整的形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能和受精能力。,液態(tài)→固態(tài),結(jié)晶態(tài)：緩慢降溫形成。水分子有序形成冰晶對精子有害：機(jī)械和滲透壓損傷。玻璃態(tài)：快速降溫形成。水分子無序形成玻璃樣的超微粒結(jié)晶，對精子無害。,（0～-60℃ ）（ -15～-25℃）,,（ -60～-250 ℃ ）,,,1、冷凍時(shí)細(xì)胞的損傷冰晶：在0～-60℃低溫區(qū)，緩慢降溫條件下形成的，降溫越慢，冰晶越大，-15～-25℃對精子危害最大。冰晶的形成對精子造成

23、的機(jī)械損傷和滲透壓損傷是引起精子死亡的主要物理因素。玻璃化：在-60～-250 ℃超低溫區(qū)，從冰晶化區(qū)域內(nèi)開始，就快速降溫，迅速越過冰晶化進(jìn)入玻璃化階段，此階段對精子無害。2、添加冷凍保護(hù)劑（甘油，DMSO等） 作用：增強(qiáng)精子抗凍能力，并對防止冰晶發(fā)生起到重要作用。,（二）精液冷凍保存稀釋液除與精液低溫保存液相同外，尚需用加抗凍劑。 1、牛用：主要有卵黃-檸檬酸鈉-甘油液，卵黃-糖類-甘油液，奶類-甘油液等3種。甘油濃度

24、以5%-7%為宜。 2、豬用：一般采用以葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘油為主要成分的稀釋液，甘油濃度以1%-3%為宜。,（三）冷凍精液的生產(chǎn)程序,一、輸精前的準(zhǔn)備 Preparations二、輸精的基本要求 Requirements三、輸精方法 Methods四、影響人工授精受胎率的因素 Factors influencing the fertility by AI,第六節(jié) 輸 精 Section6

25、Insemination,,一、輸精前的準(zhǔn)備,,,,輸精器械的準(zhǔn)備,1,,精液的準(zhǔn)備,2,,母畜的準(zhǔn)備,,輸精人員準(zhǔn)備,,,,2,3,4,二 、輸精要求,,三、輸精技術(shù),,,,（一）牛的輸精方法,,牛的輸精的注意事項(xiàng),輸精器插入陰道時(shí)，應(yīng)向前上方，避免插入尿道。當(dāng)遇到阻力時(shí)，切忌用蠻力。 握輸精管的手應(yīng)靠住母牛陰戶,使母牛騷動(dòng)時(shí)能一起移動(dòng),避免折斷輸精管或損傷生殖道. 輸精器插入子宮頸管時(shí)，推進(jìn)力量要適當(dāng)，以免損傷子宮頸、子宮體粘膜

26、。 如果輸精器后端為膠頭，將精液壓子宮內(nèi)后，不要松開膠頭，以免精液流回輸精器內(nèi)。,,牛的輸精的注意事項(xiàng),輸精器插入陰道時(shí)，應(yīng)向前上方，避免插入尿道。當(dāng)遇到阻力時(shí)，切忌用蠻力。 握輸精管的手應(yīng)靠住母牛陰戶,使母牛騷動(dòng)時(shí)能一起移動(dòng),避免折斷輸精管或損傷生殖道. 輸精器插入子宮頸管時(shí)，推進(jìn)力量要適當(dāng)，以免損傷子宮頸、子宮體粘膜。 如果輸精器后端為膠頭，將精液壓子宮內(nèi)后，不要松開膠頭，以免精液流回輸精器內(nèi)。,,（二）豬的輸精技術(shù),用種公

27、豬試情的 --后備母豬發(fā)現(xiàn)發(fā)情（有壓背反應(yīng)），24h后作第一次輸精，間隔12h第二次輸精； --經(jīng)產(chǎn)母豬發(fā)現(xiàn)發(fā)情12h后第一次輸精，12h后第二次輸精。地方品種均推遲6h； 無種公豬試情的 --后備豬壓背反應(yīng)后6-12h，經(jīng)產(chǎn)豬立即輸精，地方品種均推遲6h。,,,母豬的適時(shí)配種,作好配種準(zhǔn)備：母豬后臀部用溫水沖洗干凈，然后用1%新潔而滅溶液消毒一遍。配種所用公豬尿道出口部也要進(jìn)行消毒，防止陰道炎與子宮炎的

28、發(fā)生。 在檢查到母豬穩(wěn)定發(fā)情（接受壓背測試）后12～18h開始配種，間隔12h再配一次。 后備母豬與經(jīng)產(chǎn)母豬發(fā)情到排卵的時(shí)間有所不同，后備母豬為24～38h，經(jīng)產(chǎn)母豬36～48h，穩(wěn)定發(fā)情時(shí)間長短也不一樣，后備母豬為1～2d，經(jīng)產(chǎn)母豬為2～3d，因此兩者適時(shí)配種時(shí)間也有所不同。 另外經(jīng)母豬斷奶后，早期發(fā)情（斷奶后3～4d）和遲發(fā)情（斷奶后5d以上），其發(fā)情與排卵持續(xù)時(shí)間也不同，相應(yīng)的其最適配種時(shí)間也應(yīng)有所不同。,,母豬的輸精,準(zhǔn)備

29、好輸精導(dǎo)管，最好用一次性輸精管； 精液存儲(chǔ)在16-20℃的恒溫箱中； 每天一次進(jìn)行母豬發(fā)情鑒定，出現(xiàn)靜立發(fā)情的當(dāng)天進(jìn)行第一次輸精； 輸精時(shí)清洗雙手，清潔母豬陰戶、潤洗輸精導(dǎo)管，將輸精導(dǎo)管向上、向前插入陰道并按逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)直到鎖定。,,母豬的輸精 （續(xù)）,搖動(dòng)輸精瓶幾次，充分混合精液，剪掉輸精瓶的頂端慢慢地向輸精瓶加壓； 輸精將要持續(xù)5-10min，精液流出陰戶時(shí)，要重新鎖定輸精導(dǎo)管； 輸精后立即用清水和去離子水清洗輸精導(dǎo)管；

30、 記錄公母豬耳號(hào)； 間隔12-24h后重復(fù)輸精。,豬的輸精方法,潤滑輸精管前端,輸精管先朝上再朝前插入，避開尿道口,分開陰門，插入輸精管前端,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)輸精管以鎖住子宮頸,緩慢輸入精液,,,,,母豬自然交配與輸精,母豬輸精示意圖,母豬發(fā)情檢查,輸精操作—擦拭外陰部,輸精器上涂潤滑劑,輸精操作—分開外陰將輸精器前端向下呈45度角向左旋轉(zhuǎn)插入母豬陰道內(nèi),輸精過程,豬的輸精,,一次輸精多次輸精 ----用同一頭公豬精液； 重復(fù)輸精與雙

31、重交配 ----用不同公豬精液。,輸精方式,,輸精注意事項(xiàng),精液的正確保存； 發(fā)情不等于輸精； 假發(fā)情的鑒定； 發(fā)情不明顯母畜的治療； 季節(jié)與受胎率； 輸精部位與受胎率； 嚴(yán)格消毒。,,（三）羊的輸精技術(shù),用試情公羊進(jìn)行發(fā)情鑒定，對接受爬跨的進(jìn)行標(biāo)記； 母羊允許公羊爬跨后的6-12h第一次配種； 母羊保定在保定架內(nèi)或兩將其倒提，前肢著地； 消毒外陰部，開膣器上涂以石蠟油。,,羊輸精操作,開膣器側(cè)扁方向與陰道呈同一方向

32、，插入母羊陰道內(nèi)，向下轉(zhuǎn)動(dòng)開膣器，并保持打開狀態(tài)； 準(zhǔn)備好的輸精器前端對準(zhǔn)子宮頸外口，伸入1cm或更深。將精液緩慢注入后抽出； 注意：開膣器應(yīng)保持開張狀態(tài)，以免夾傷陰道粘膜。如果無法找到子宮頸口，應(yīng)撥動(dòng)粘液，使子宮頸口暴露。如果仍無法確認(rèn)，可將精液注入顏色較深的區(qū)域。,www.themegallery.com,,,羊的輸精,（四）家禽的人工授精,家禽精子結(jié)構(gòu),家禽精子由很長的頭部（長1.25µm），頭的前端有尖形的頂體（1

33、.75µm），有一短的中段（4µm）連接著一個(gè)很長的尾部（80µm）。,,家禽精子特性,受精部位在漏斗部。 由于睪丸的環(huán)境溫度及母禽生殖道的特殊構(gòu)造，精子存活時(shí)間比家畜長得多，如公雞精子最長存活35d，火雞達(dá)70d。 雞交配后3-5d受精率有所下降，一周內(nèi)尚可，人工授精后則較長，可以10-14d。 一般種雞放入母雞群后要經(jīng)10-14d才能獲得較高的受精率。,,按摩采精法,一般由二人操作，保定員保定公雞

34、的腿和翅膀，使公雞尾部朝向采精員，呈自然交配姿勢。 采精員用手從雞翼根沿體軀兩側(cè)滑動(dòng)按摩，引起公雞性欲。 采精員右手中指和無名指之間夾著集精管。 按摩數(shù)次后，立即以左手掌將尾羽撥向背部，同時(shí)右手掌緊貼公雞腹部柔軟處，拇指與食指分開，于恥骨下緣抖動(dòng)觸摩數(shù)次，當(dāng)泄殖腔外翻露出退化交配器時(shí)，左手拇指與食指立刻捏住泄殖腔上緣，輕輕壓擠，公雞立刻射精，右手迅速用集精杯接取精液。 采集到的精液置于水溫20-30℃的保溫瓶內(nèi)以備輸精,,雞的輸

35、精,輸精時(shí)間：每天大部分母禽產(chǎn)完蛋后，雞、火雞下午16時(shí)；鵝鴨上午10時(shí)進(jìn)行。 輸精部位：母雞、火雞淺部陰道1-2cm處輸精（或3-4cm），鴨鵝深部陰道4-6cm處輸精，由2-3人操作。 輸精量與次數(shù)：雞每周一次，原精0.025-0.03ml（含精子0.5-1億）；火雞原精0.015-0.023ml（含1-2億），間隔10-12d；鵝、鴨0.8-1億，間隔5-7d。,,雞的輸精方法,輸精方法：助手左手握住雙翅，提起母雞，令雞頭朝上

36、，肛門朝下，右手掌置于母雞恥骨下，在腹部柔軟處施以一定的壓力使泄殖腔開張，輸卵管口翻出。此時(shí)母雞如有糞便即排出，然后將母雞泄殖腔朝向輸精員。 母雞輸卵管開口于泄殖腔內(nèi)左側(cè)上方。 輸精員將輸精管插入輸卵管1cm左右處，注入精液后，輸精器向后拉，同時(shí)解除對母雞腹部的壓力。,1、精液品質(zhì) 2、母畜體況和繁殖機(jī)能 3、適時(shí)輸精 4、技術(shù)水平,四、影響人工授精受胎率的因素,,,,,,,采精場地,采精要有固定的場地，以便雄性動(dòng)

37、物建立起鞏固的條件反射。 采精場地應(yīng)該寬敞、平坦、安靜、清潔，場內(nèi)設(shè)有采精架以保定臺(tái)畜，或設(shè)立假臺(tái)畜，供公畜爬跨進(jìn)行采精。 采精場應(yīng)與精液處理室相連,和公畜舍相近。室內(nèi)采精場的面積一般為10×10米，并附設(shè)噴灑消毒和紫外線照射殺菌設(shè)備。,Company Logo,公豬采精室,馬采精橫木架及母馬保定,牛用采精架,,臺(tái) 畜 的 準(zhǔn) 備,臺(tái)畜有真、假臺(tái)畜之分 真臺(tái)畜 指使用與公畜同種的母畜、閹畜或另一頭種公畜作臺(tái)畜。

38、 真臺(tái)畜應(yīng)健康、體壯、大小適中、性情溫順。 選發(fā)情的母畜比較理想，經(jīng)過訓(xùn)練的公畜也可作臺(tái)畜。 假臺(tái)畜 即采精臺(tái)，是模仿母畜體型高低大小，選用金屬材料或木料做成的一個(gè)具有一定支撐力的支架。 臺(tái)畜采精前應(yīng)清洗、消毒，防止污染精液。,臺(tái) 畜 的 準(zhǔn) 備,豬用假臺(tái)畜,,器械及假陰道的準(zhǔn)備,采精所需要的器械要事先準(zhǔn)備好，力求清潔、干燥、無菌，在使用之前要嚴(yán)格消毒， 每次使用后必須洗刷干凈。,,種公畜的調(diào)教和準(zhǔn)備,利用假臺(tái)畜

39、采精，要事先對種公畜進(jìn)行調(diào)教，使其建立條件反射。調(diào)教的方法有如下幾種： 外激素法：在假臺(tái)畜上涂抹發(fā)情母畜的陰道粘液或尿液； 誘情法：誘使公畜進(jìn)行爬跨發(fā)情母畜，但不讓交配而把其拉下，待公畜性沖動(dòng)達(dá)到高峰時(shí)，令其爬跨假臺(tái)畜采精； 旁觀法：讓其目睹另一頭已調(diào)教好的公畜爬跨假臺(tái)畜，然后再誘其爬跨。,采精前種公畜的準(zhǔn)備,包括體表的清潔消毒和誘情（性準(zhǔn)備）兩個(gè)方面。 采精前應(yīng)擦拭公畜下腹部，用0.1%高錳酸鉀溶液等洗凈其包皮外并抹干，

40、用生理鹽水清洗包皮腔內(nèi)積尿和其他殘留物并抹干。 在采精前，需以不同誘情方法使公畜有充分的性興奮和性欲，一般采取讓公畜在臺(tái)畜附近停留片刻，進(jìn)行2-3次假爬跨。,,人 員 的 準(zhǔn) 備,采精員應(yīng)具有熟練的技術(shù)，采精時(shí)注意人畜的安全； 應(yīng)有固定的工作服與鞋，并保持整潔； 采精前應(yīng)剪短指甲，并戴上一次性手套。,,采精方法,,,,,假陰道法,手握法,按摩法,電剌激法,適用于各種家畜和部分小動(dòng)物,是當(dāng)前公豬采精普遍應(yīng)用的方法,主要用于禽

41、類和犬類,主要用于野生動(dòng)物的采精,,假陰道法,４０～４５度溫水,固定膠圈,外殼,漏斗,集精瓶,,羊用假陰道,牛用假陰道,牛用假陰道,假陰道的準(zhǔn)備,,,無破損漏洞：假陰道不得漏水或漏氣。,無菌：凡接觸精液的部分均須經(jīng)消毒。,適宜溫度：假陰道內(nèi)腔溫度38-40℃， 集精杯也應(yīng)保持34-35℃。,適當(dāng)壓力：借助注入水和空氣來調(diào)節(jié) 假陰道的壓力。,適當(dāng)潤滑度：假陰道前段1/3-1/2處 到外口周圍涂抹潤滑劑。,應(yīng)具備 五個(gè)條件,Comp

42、any Logo,,注溫水,充氣,不太理想的狀態(tài)（但可以用）,牛羊假陰道安裝充氣后理想的狀態(tài),牛假陰道采精法,公牛假陰道采精,公馬假陰道采精法,手 握 法,適用于豬的采精。 采精員要戴上滅菌膠手套，蹲在假臺(tái)畜左側(cè)，待公豬爬跨臺(tái)畜后，當(dāng)陰莖從包皮內(nèi)開始伸出時(shí)，立即緊握龜頭，待其抽送片刻后，鎖定公豬的龜頭。 待陰莖充分勃起時(shí)，順勢牽引向前，就能導(dǎo)致公豬射精另一只手持帶有一次過濾網(wǎng)的的集精杯收集精子濃厚部分的精液，其它稀薄精液及顆粒狀

43、膠凍分泌物排出時(shí)可隨時(shí)棄掉。,豬手握法采精,集精杯處理與集精,筒握法采精： 用普通的假陰道，但前端末裝集精瓶，當(dāng)公豬陰莖插入假陰道后，在假陰道漏斗部握住公豬龜頭采精的方法。,,電刺激采精法 通過電極隔直腸壁選擇一定的頻率通電，刺激輸精管壺腹，使公畜陰莖勃起并射出精液。一般在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行。?這一方法一般用于未經(jīng)采精訓(xùn)練或膽小不易控制的動(dòng)物，如各種野生動(dòng)物和喪失交配能力但種用價(jià)值高的公畜。,

44、電刺激采精裝置,,采精員用手經(jīng)直腸壁找到公畜的精囊腺和輸精管壺腹部，輕柔按摩?？蛇_(dá)到使公畜陰莖部分勃起而射精。?該法適用于牛、犬和家禽。,按摩法采精,公牛精囊腺按摩采精,公牛輸精管壺腹部按摩采精法,,定義：指在一定時(shí)間內(nèi)（通常為次／周）采精 的次數(shù)。公牛：每周2-3/次周 豬、馬：因?yàn)樯渚看?，隔日一?綿、山羊：配種季節(jié)內(nèi)，每天可采精多次，并連續(xù)數(shù)周?一般在觀察到精子尾部有未脫落的原生質(zhì)

45、小滴，說明采精頻率過高，此時(shí)應(yīng)減少或停止采精。,采 精 頻 率,采精頻率是以雄性生產(chǎn)精子的能力來決定。 例如： 每克睪丸組織每天產(chǎn)生2500萬精子 1頭公豬的1對睪丸重 1000克 1次射精量為　　　　 250ml 每ml精子數(shù)為　　　 2億 則2500萬×1000克× 7日＝1750億精子/周 每次射精

46、精子數(shù)為250ml ×２＝500億 每周采精次數(shù)為1750億÷500億＝2.5次?采精頻率過低則經(jīng)濟(jì)上不劃算，過高則阻礙公畜的生長發(fā)育和縮短其使用壽命。,正常成年公畜采精頻率及其精液特征,,,保證精液適宜pH值，利于精子的存活。如檸檬酸鹽、Tris、磷酸氫二鉀,延長精子在體外存活時(shí)間。如糖類、氨基乙酸,抗冷物質(zhì)中卵磷脂和乳脂的雙向親和性對保護(hù)精子不受或減弱冷打擊。如卵黃、奶類,抗凍劑有提高

47、精液冰點(diǎn)，少量滲入精子可降低冷凍損傷（減少冰晶形成），從而達(dá)到抗凍作用。如甘油、乙二醇,抑制精液中和操作中帶入的微生物的繁殖。如青、鏈霉素,緩沖物質(zhì),非電解質(zhì)和弱電解質(zhì),防冷休克物質(zhì),抗凍物質(zhì),抗菌物質(zhì),稀釋液的保護(hù)劑,,1、酶類：H2O2酶，分解精子代謝過程中產(chǎn)生的H2O2，消除其危害，利于維持精子活率。β-淀粉酶能促進(jìn)精子獲能，提高受胎率。 2、激素：OT、PG等，促進(jìn)母畜生殖道的蠕動(dòng)。 3、維生素：VB1、VB2、V

48、C，利于精子存活。 4、其他：CO2、乙酸、植物汁等，可降低稀釋液的pH值，有助于精子保存。,,,其他添加劑,顆 粒 凍 精 優(yōu) 點(diǎn),設(shè)備簡單，生產(chǎn)容易，適合小規(guī)模生產(chǎn) 體積小、易污染、不易標(biāo)記、損耗多 要用解凍液解凍 主要在肉牛、羊中應(yīng)用,,牛細(xì)管精液,細(xì)管凍精的優(yōu)點(diǎn),無污染：保存、輸精時(shí)不與外界接觸，安全衛(wèi)生； 便于標(biāo)記：表面可印上各種標(biāo)記； 劑量準(zhǔn)確： 使用方便：解凍時(shí)直接投入水浴中解凍，輸精時(shí)剪

49、 去一端后用輸精槍輸精。,,冷凍精液的稀釋,分一次與多次稀釋法。 一次稀釋：牛羊精液 多次稀釋（豬精液） 第一次稀釋：根據(jù)計(jì)算的稀釋倍數(shù)用不含抗凍劑的稀釋液在室溫下進(jìn)行等溫稀釋，再放在500毫升的燒杯中與第二液一起緩慢降溫至5-8 ℃； 第二次稀釋：在5-8 ℃平衡后進(jìn)行等溫稀釋。,,降溫和平衡（1）降溫：指精液采出稀釋后由30℃溫度經(jīng)1~2h緩慢降至5 ℃ ，以防低溫打擊。（2）平衡：指加含甘油稀釋液對精子

50、作用的時(shí)間。?平衡目的：使精子有一段適應(yīng)低溫的時(shí)間，使甘油充分滲透進(jìn)入精子體內(nèi)，達(dá)到滲透的活性物質(zhì)平衡，產(chǎn)生抗凍作用。 ?一般將降溫至5 ℃的精液于這一溫度下平衡1-2h或3-5h。,精 液 平 衡,,細(xì)管分裝,低溫分裝：在第二次稀釋后進(jìn)行分裝標(biāo)記、平衡，最后冷凍；或在平衡結(jié)束后分裝。 優(yōu)點(diǎn)：對精子損傷小，解凍后活力好； 缺點(diǎn)：對設(shè)備要求高。 常溫分裝：一次稀釋后即進(jìn)行分裝標(biāo)記，然后進(jìn)行精液降溫與平衡。 優(yōu)點(diǎn)：不需要低

51、溫操作臺(tái)； 缺點(diǎn)：對精子損害較大。 細(xì)管上要對供精者的種畜站、品種、公畜號(hào)、生產(chǎn)日期進(jìn)行標(biāo)記；,,精液的冷凍,冷 源 干冰（-79 ℃）、液氮（-196 ℃） 冷凍用品 冷凍面：氟板（聚四氟乙烯）、銅紗網(wǎng)、鋁板； 冷凍槽：程序冷凍儀、液氮槽、廣口保溫瓶； 冷凍方法 干冰埋藏法； 液氮熏蒸法；,顆粒凍的冷凍,銅紗網(wǎng)或氟板浸入液氮預(yù)冷； 將預(yù)冷后冷凍面固定在離液氮面1-3cm高處進(jìn)行冷凍； 每個(gè)凍精顆粒0.

52、1ml。,收集顆粒精液,,,細(xì)管凍精的冷凍,程序冷凍儀冷凍 將平衡后的細(xì)管凍精放細(xì)管架上，置冷凍儀中降溫冷凍。 沒條件的，可將平衡后的細(xì)管用毛巾擦干，放入銅紗網(wǎng)上； 將銅紗網(wǎng)降至距液氮面1-2 cm的高度平衡4-5分鐘后沉入液氮中。,冷凍精液的解凍,顆粒凍精的解凍； 細(xì)管凍精的解凍；,,,顆粒凍精的解凍,濕解凍：用于牛羊凍精解凍。 方法：用解凍管裝0.5-1ml解凍液，37-40℃水浴后，放入一顆凍精，待2/3溶解即可取出，檢

53、查合格的用于輸精。 干解凍：用于豬凍精解凍。 方法：用一鋁盒，50-60 ℃水浴，均勻倒入一個(gè)劑量凍精，待其大部分溶解后取出鋁盒，加入20-30 ml的解凍液，檢查合格的用于輸精。,,,,,顆粒凍精解凍液,一般采用2.9%的檸檬酸鈉作解凍液。 牛羊顆粒凍精也可用VB12注射液作解凍液。 如解凍后要保存則用檸檬酸鈉0.3%，葡萄糖5.0%，EDTA0.1%配方。 豬的凍精解凍液用常溫保存稀釋液BTS。 如果解凍液中加入2mmo

54、l的咖啡因有利于提高受胎率。,,,細(xì)管凍精的解凍,將水溫調(diào)整到38-40℃； 將提漏提至罐口下3-5cm處，用鑷子夾住細(xì)管的超聲波封口端，迅速移入溫水中水?。?迅速搖動(dòng)細(xì)管，凍精由乳白色變透明后即可取出，用手甩動(dòng)使之全部溶解。,,檢查（1）顆粒精液解凍后取一小滴檢查活力；（2）細(xì)管精液可推出一點(diǎn)檢查活力，如平時(shí)都按常規(guī)操作亦可不檢。?我國規(guī)定牛凍精解后的活率在0.4，水牛在0.3以上才能用于AI。 解凍后的精液處理

55、 應(yīng)盡快用于輸精，不能長時(shí)間保存，更不能再次冷凍。,,解凍中要注意的事項(xiàng),解凍時(shí)動(dòng)作要迅速而準(zhǔn)確； 存放凍精的提筒離開液氮面太久，不能提出液氮罐頸口； 夾取凍精的鑷子要先預(yù)冷。,,冷凍精液品質(zhì)要求,活力0.3-0.35以上、頂體完整率40%以上； 每劑量中不得檢出細(xì)菌1000個(gè)，大腸桿菌3個(gè)。 顆粒凍精 形狀一致，不連片，大小均勻，體積0.1ml； 無氣泡（在液氮中不漂?。?； 總有效精子數(shù)1200萬個(gè)（牛）

56、； 細(xì)管凍精 每劑有效精子數(shù)1000萬個(gè)（牛）；,,冷凍精液保存與運(yùn)輸（1）凍精保存 合格的凍精，包裝妥善并做好標(biāo)記（站名、家畜品種、種畜號(hào)、凍精日期、劑型批號(hào)、精子活率、數(shù)量等），置入液氮罐內(nèi)，保存過程中，溫度恒定，精液品質(zhì)不變，才能達(dá)到長期保存的目的。 （2）凍精運(yùn)輸 專人負(fù)責(zé)，用液氮容器盛裝，內(nèi)充滿液氮，有保護(hù)外套，小心輕放。裝在車上要安放平穩(wěn)、拴牢，嚴(yán)防撞擊和傾倒。切不可斜放、疊放或壓入其他物品。避免暴曬

57、和強(qiáng)烈震動(dòng)，如長途運(yùn)輸，要及時(shí)補(bǔ)充液氮。,液氮罐結(jié)構(gòu),1、內(nèi)外殼體2、內(nèi)槽3、夾層4、頸管5、罐蓋塞6、提筒,從液氮罐取凍精,,,輸精器械的準(zhǔn)備,用品：與精液接觸的用品，必須經(jīng)過清洗、消毒滅菌，不能有任何不利于精子存活的化學(xué)物質(zhì)殘留。用前最好用稀釋液或生理鹽水沖洗，確保對精液無毒害作用； 輸精器：最好一頭母畜準(zhǔn)備一個(gè)輸精槍或槍頭，一次性輸精器只能一畜一支； 開膣器：最好一畜一個(gè)，用前在消毒劑中浸過，用涼開水沖過后，放入干燥

58、箱中干燥后，放涼使用（冬季應(yīng)防止過冷）。,,人工授精器械,1： 處羊開膣器   2：成羊羊開膣器    3：牛開膣器   4：細(xì)管專用剪    5：羊用輸精槍 （0.25,0.5ml通用型）6： 羊用輸精器 （鮮精）  7：牛用輸精器

59、60;（鮮精）   8：牛用輸精器（凱蘇槍）    9：牛用輸精器（普通型） 10：牛用輸精槍（0.25,0.5ml通用型）11：牛用輸精槍（卡簧槍）12： 全握式牛用輸精槍（日式槍）13：內(nèi)窺鏡,,輸精器械,豬的輸精管,牛、羊輸精管,各種當(dāng)前使用的一次性輸精器,各種牛用輸精器實(shí)物外觀圖,,,應(yīng)正確解凍后輸精，活力0.35以上。,精液的準(zhǔn)備,,,,,,冷凍

60、保存,,輸精量及有效精子數(shù),,,母畜的準(zhǔn)備,,,,,,,,,,,,,,輸精人員準(zhǔn)備,操作人員應(yīng)指甲剪短，銼光； 輸精人員可戴一次性長臂手套操作，也可洗凈雙手即可； 牛輸精時(shí)，手臂要伸入到直腸內(nèi)，應(yīng)清洗雙手，戴長臂手套醮少量水或石蠟油或肥皂水，也可不戴手套操作。,,,牛的直腸把握輸精法,母牛進(jìn)行發(fā)情鑒定； 冷凍精液解凍，裝槍； 母牛保定，左手（或右手）伸入直腸，排出宿糞； 外陰清洗并擦干； 左手下壓陰門，將套管連同外膜插入陰道