hpv感染與宮頸癌2015

1、HPV感染與宮頸癌Human Papillomavirus(HPV) and Cervical Cancer,看看這位英年早逝的藝人，她死于宮頸癌……,主要內(nèi)容,什么是宮頸癌？關(guān)于HPV宮頸病變與HPV感染有什么關(guān)系？HPV實驗室檢測宮頸癌的篩查如何預防宮頸癌？,一、什么是宮頸癌？,什么是子宮頸癌？,子宮頸癌又稱宮頸侵潤癌，簡稱宮頸癌，由癌前病變逐步發(fā)展而來的。是目前唯一病因明確、可以預防的惡性腫瘤。,子宮頸癌現(xiàn)狀,女性第

2、二大常見惡性腫瘤全世界每年新病例數(shù)為56.5萬在發(fā)展中國家宮頸癌的發(fā)生率為發(fā)達國家6倍，有50%的病例發(fā)生在中國和印度中國每年新病例為18.15萬中國每年有3萬多的婦女死于宮頸癌,發(fā)展中國家的新發(fā)病例多是晚期患者,未能早期診斷細胞學檢查未能普及陰道鏡應用條件受到限制民眾對宮頸癌的防范意識欠缺,發(fā)病年齡,原位癌的發(fā)病年齡為35-39歲浸潤癌為40-49歲,宮頸癌的新動向,近年來由于生活方式的改變發(fā)病率: 有上升趨勢

3、發(fā)病年齡: 趨向年輕化,哪些婦女更容易患宮頸癌,性生活過早早孕多產(chǎn)或多次人工流產(chǎn)自己或性伴侶有多個性伴侶曾經(jīng)或正患有生殖道HPV感染有或曾經(jīng)患有其它性病吸煙、吸毒和營養(yǎng)不良內(nèi)分泌紊亂或免疫力低下的婦女,現(xiàn)在基本明確宮頸癌的病因就是高危型HPV的持續(xù)性感染感染HPV病毒到發(fā)展成浸潤癌需要大約十年的歷程，只要定期進行婦科健康檢查，就可以及早發(fā)現(xiàn)子宮頸癌癌前病變并加以治療，就可預防子宮頸癌的發(fā)生,宮頸癌可以預防和治愈,二、關(guān)于

4、HPV(human papillomavirus,人乳頭狀瘤病毒),電鏡下HPV,乳多空病毒科A屬成員直徑50-55nm無被摸正20面體構(gòu)成的病毒殼體,HPV,乳頭瘤病毒科屬小DNA病毒乳頭瘤病毒的基因組主要編碼三組基因三個癌基因，包括E5、E6和E7，負責調(diào)節(jié)癌細胞轉(zhuǎn)化過程；兩個調(diào)節(jié)基因，包括E1和E2，負責調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄和病毒基因組的復制；兩個結(jié)構(gòu)蛋白基因，包括L1和L2，組成病毒顆粒,HPV,具有正常細胞永生化能力及高度

5、種屬特異性和特殊嗜上皮性，病毒DNA以整合形式存在于宿主細胞中病毒DNA儲存于具生發(fā)活性的基底細胞，呈隱性狀態(tài)HPV僅限于在人上皮中具有一定分化程度的角質(zhì)形成細胞內(nèi)才能增殖皮膚、粘膜的柱狀上皮和鱗狀上皮是HPV侵犯最敏感之處HPV不進入血液，不產(chǎn)生病毒血癥,HPV傳染,屬于常見的性傳播感染 直接的皮膚-皮膚接觸是傳播的最有效途徑病毒不通過血液或體液傳播（例如精液）,HPV感染,10－30％成人感染HPV,性活躍人群甚至更高（

6、50％－80％）好發(fā)年齡20-29歲(40%) 潛伏期: 3 周– 8 月(平均 2.8 月),HPV感染轉(zhuǎn)歸,1%－2%發(fā)生臨床可見的濕疣大多數(shù)感染無癥狀，成為潛伏感染或亞臨床感染(SPI), 與機體天然免疫有關(guān)一般1－2年內(nèi)自行清除,70%女性可以于二年內(nèi)通過自身免疫消除,SOURCE: GRAPH ADAPTED FROM R. L. WINER ET AL., AMERICAN JOURNAL OF EPIDEMIOLO

7、GY 157, 218 (2003),美國某大學467女性大學生常規(guī)婦檢:HPV的PCR檢測結(jié)果：生殖道HPV檢出率46% 5年后60％的女性被查出過HPV感染70％女性一年內(nèi)生殖道HPV自行清除,HPV分型,最重要的分類學單元是型(type) 與宮頸癌相關(guān)程度較為清楚的HPV型歸為高危型HPV（16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73 ）和疑似高危型HPV

8、（ 26, 53, 66 ） 與尖銳濕疣等良性疾病相關(guān)的HPV被歸入低危型HPV（ 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81，89 ），一般認為這類HPV的感染不會誘導宮頸癌的發(fā)生,三、宮頸病變與HPV感染有什么關(guān)系？,,,HPV致宮頸癌進展示意,8—10年（100%治愈）,2—5年（死亡）,,,,正常,低度病變,高度病變,原位癌,侵潤癌,,,,,,,宮頸癌前病變,宮頸上皮細胞內(nèi)瘤變 （C

9、IN）；包括宮頸非典型增生和宮頸原位癌，反映宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的過程。從細胞學分為CINI、Ⅱ、III級，包含宮頸鱗狀上皮細胞內(nèi)病變和腺細胞內(nèi)病變。,HPV感染多數(shù)不發(fā)展成為宮頸癌，可以在9-16(8-10)個月消失;間隔半年2次HPV（＋）為HPV持續(xù)感染;28%的持續(xù)感染者 ,在2年內(nèi)發(fā)展為CIN1；70% 的持續(xù)感染者4年內(nèi)發(fā)展為CIN2;,宮頸病變與HPV感染的關(guān)系,HPV感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件，其相對危險度或危險度比值比

10、高達250。歸因危險百分比超過95%；HPV陰性者幾乎不會發(fā)生宮頸癌,四、HPV實驗室檢測,臨床常用的HPV檢測方法,病理學檢查細胞學檢查免疫組化檢測原位雜交技術(shù)檢測聚合酶鏈反應( PCR)技術(shù)　DNA芯片分型檢測雜交捕獲DNA分析,病理學檢查,鱗狀上皮疣狀乳頭狀增生表皮角化不全棘層不規(guī)則增厚基底層增生上皮腳延長中表層出現(xiàn)灶狀分布的挖空細胞等。,細胞學檢查,凹空細胞、角化不良及濕疣外底層細胞細胞學診斷HPV感染敏

11、感性較差,免疫組化檢測,檢測HPV的衣殼抗原來進一步明確HPV感染所得陽性反應定位明確,判斷可靠必須在HPV-DNA 復制成熟后才有衣殼裝備敏感性較低,原位分子雜交,用來測定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，檢測重組體DNA。 通過非放射性探針對石蠟組織進行檢測,能作定位檢測,假陽性率低,但靈敏度不高,大大降低了臨床使用價值。,雜交捕獲DNA分析,標本中的HPV-DNA 與液相中的RNA探針結(jié)合,形成特異性的RNA-DNA

12、雜交體,被微孔板內(nèi)的特異抗體所捕獲,然后被所加的發(fā)光底物檢測,其發(fā)光的強度與標本中的DNA 量成比例,因而可對HPV進行半定量檢測效率高,適于大量人群檢測,臨床上操作簡便,DNA裂解 → RNA-DNA雜交→ 抗體捕獲 → 化學發(fā)光 → 計算機判讀,裂解 加入探針 雜交 加入二抗和發(fā)光劑,聚合酶鏈反應( PCR)技術(shù),設(shè)計與HPV-DNA互補的一對特異性核苷酸引物,以HPV-DNA為模板以指數(shù)增長

13、的速率進行體外擴增敏感性最高,可對HPV進行分型,測定病毒載量,發(fā)現(xiàn)新基因型,對基因進行序列分析缺點為樣品間易交叉污染導致假陽性,聚合酶鏈反應( PCR)技術(shù),原理：采用HPV13種型別的特異性引物及熒光探針，應用聚合酶鏈式反應（PCR）結(jié)合Taqman技術(shù)，對HPV13種型的特異性DNA核酸片段進行分型定性檢測。最低檢測限：1.00E+04copies/mL。,聚合酶鏈反應( PCR)技術(shù),感染生殖道的HPV可分為兩種：低危型和

14、高危型。本試劑對生殖道泌尿道分泌物及宮頸細胞中的人乳頭瘤病毒（Human papillomavims，HPV）16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、56型、58型、59型68型這13種型別的特異性DNA核酸片段進行熒光PCR分型定性檢測，可用于臨床對高危型人乳頭瘤病毒感染引起的宮頸癌等疾病的輔助診斷。,五，宮頸癌的篩查,篩查對象,21歲以上有性生活史或具有性生活三年以上的任何婦女。高危人群：有多個性伴

15、侶、性生活過早、HIV / HPV感染、機體免疫功能低下、衛(wèi)生條件差/性保健知識缺乏。某些情況無需進行篩查，如因良性疾病摘除子宮的婦女。,,起始年齡：　　在我國經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)為25－30歲；經(jīng)濟欠發(fā)達地區(qū)為35－40歲。對于高危婦女人群，篩查起始年齡應適當提前。終止年齡：　　65歲后患子宮頸癌的危險性極低，故一般不主張對65歲以上的婦女進行子宮頸癌篩查。,篩查間隔,1、每年一次細胞學檢查，連續(xù)2次（-）， 可3年一次2

16、、連續(xù)2次HPV（-），細胞學檢查（-） 可5～8年一次3、高危人群：最好每年一次 （CIN及以上、特殊職業(yè)、30歲以上高危HPV感染者）,六，子宮頸癌的生物學預防,HPV疫苗,預防性疫苗： 針對健康人群。靶向病毒衣殼蛋白L1和L2，刺激機體產(chǎn)生保護性中和抗體，以阻斷HPV感染。治療性疫苗： 應用對象為已感染人群。靶向病毒的E6、E7蛋白。主要用于清除在上皮基底細胞內(nèi)復制的病毒和HPV導致的異常細胞。,