如何寫好基金申請書

1、1,南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院腎內(nèi)科,如何寫好自然科學研究基金申請書,侯凡凡,2,科技活動的目標導向分類,考慮應用目標,追求基本認識,基礎(chǔ)研究（波爾象限）,應用基礎(chǔ)研究（巴斯德象限）,應用研究（愛迪生象限）,數(shù)據(jù)積累活動,,,,,,,《巴斯德象限：基礎(chǔ)科學與技術(shù)創(chuàng)新》 D.E.司托克斯,生物學只受認知需求推動，不受實際應用引導的研究活動,農(nóng)學、林學、畜牧獸醫(yī)科學、水產(chǎn)學、基礎(chǔ)醫(yī)學、臨床醫(yī)學、預防醫(yī)學與衛(wèi)生學、軍事醫(yī)學與特種醫(yī)學、藥學、中醫(yī)

2、學與中藥學既尋求擴展知識的邊界，又受到應用目的影響的研究活動,單純的應用研究，不尋求對某一學科領(lǐng)域的全面認識,3,國家自然科學基金支持的范圍,基礎(chǔ)研究（波爾象限）,應用基礎(chǔ)研究（巴斯德象限）,應用研究（愛迪生象限）,數(shù)據(jù)積累活動,,,只受認知需求推動，不受實際應用引導的研究活動,既尋求擴展知識的邊界，又受到應用目的影響的研究活動,單純的應用研究，不尋求對某一學科領(lǐng)域的全面認識,支持,其它資助渠道973863863支

3、撐計劃平臺項目,自然科學基金：支持基礎(chǔ)研究，堅持自由探索，發(fā)揮導向作用。促進學科均衡協(xié)調(diào)可持續(xù)發(fā)展。,4,研究項目系列,面上項目,重點項目,實質(zhì)性國際合作項目,重大項目,面上項目：學科－全面均衡布局，人才－developing scientist, developed scientist,重大研究計劃,,,,,,,,聯(lián)合基金項目,5,人才項目系列,創(chuàng)新研究群體科學基金,國家杰出青年科學基金（含外籍）,

4、青年科學基金,基礎(chǔ)科學人才培養(yǎng)基金,地區(qū)科學基金,,,,,,,青年科學基金：穩(wěn)定青年隊伍，培育后繼人才，扶持獨立科研，激勵創(chuàng)新思維。地區(qū)科學基金：扶植地區(qū)人才，促進區(qū)域發(fā)展。,,海外及港澳青年學者合作研究基金,,6,科研基金標書的寫作,,要有一個好的故事 一個內(nèi)容新穎、有意義的故事 一個完整的故事 一個能夠?qū)崿F(xiàn)的故事要寫好這個故事 要讓別人對這個故事感興趣 要讓別人讀懂這個故事 要

5、讓別人相信這個故事,7,自然科學研究的創(chuàng)新性和價值,,創(chuàng)新性是研究課題的靈魂創(chuàng)新的關(guān)鍵是一個“創(chuàng)”字（內(nèi)毒素和動脈粥樣硬化的故事）創(chuàng)新要有一定的根據(jù)（理論根據(jù)、預試驗）要體現(xiàn)創(chuàng)新的價值,8,科研基金標書的寫作,,要有一個好的故事 一個內(nèi)容新穎、有意義的故事 一個完整的故事 一個能夠?qū)崿F(xiàn)的故事要寫好這個故事 要讓別人對這個故事感興趣 要讓別人讀懂這個故事 要讓別人相信這個故事,9,自

6、然科學基金申請書的完整性,,項目的背景、提出假設(shè)的依據(jù)（國內(nèi)外研究現(xiàn)狀）、假設(shè)、研究要解決的主要問題、研究的學術(shù)意義和應用價值、小結(jié)、參考文獻注意研究技術(shù)路線的完整,10,蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物促使腎臟細胞氧化應激：慢性腎臟病進展的新機制,11,一、項目的立項依據(jù)（一）研究意義及其背景（二）國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及分析1．蛋白質(zhì)是體內(nèi)氧化應激損傷的主要原初靶 ……，蛋白質(zhì)的氧化先于脂質(zhì)過氧化，且羥自由基與蛋白質(zhì)

7、直接相互作用的可能性要比與DNA作用大20倍（DeAtley SM, et al. Pharmacol Toxicol 1998; Reinheckel T, et al. Free Radic Biol Med 1998）。因此目前普遍認為，蛋白質(zhì)是體內(nèi)ROS損傷的主要原初靶。人體內(nèi)蛋白質(zhì)庫巨大，其中最易被氧化修飾的白蛋白又是循環(huán)中主要的蛋白質(zhì)（Witko-Sarsat V, et al, J Immuno 1998）。因此，闡明蛋白

8、質(zhì)氧化修飾及其產(chǎn)物在人類疾病中的作用將為研究氧化應激相關(guān)性疾病的發(fā)病學提供新的理論，并為其干預提供新的途徑或靶標。,12,（二）國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及分析2．蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物參與人類疾病的發(fā)病學 ……我們和其它學者的工作已證實，在許多人類重要慢性疾病，如糖尿病（Kalousova, et al, Physiol Res, 2002）、代謝綜合征（Atabek ME，et al，Eur J Pediatr 200

9、6）、動脈粥樣硬化（Kaneda H，Atherosclerosis 2002）、慢性腎臟?。℉ou FF，J Am Soc Nephrol 2004，Witko-Sarsat V, et al, J Immunol 1998）等都存在蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物潴留，其中某些蛋白質(zhì)修飾產(chǎn)物、如AGE已被證實參與了許多慢性疾病的發(fā)病學如透析相關(guān)性淀粉樣變（Hou FF，et al，J Am Soc Nephrol 2002）、CKD的免疫功能障礙

10、（Hou FF，et al，Kidney Int 2001； Li JT，et al，Scan J Immunol，2007）、糖尿病微血管病變（Baynes JW，et al，Diabetes 1999）和老年性癡呆（Yan SD，et al，Nature 1996）等。這些證據(jù)表明，蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物蓄積不僅是氧化應激的后果（或標志物），其本身可能作為致病介質(zhì)參與人類多種重要疾病的發(fā)生或發(fā)展。,13,（二）國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及分析3．

11、蛋白質(zhì)修飾產(chǎn)物AOPP是一類促細胞炎癥、促血管病變的生物介質(zhì) ……最近我們團隊的體外研究證實，從CKD和糖尿病患者體內(nèi)分離、純化的AOPP以及體外合成的AOPP均能激活人血管內(nèi)皮細胞，這一病理過程是通過激活內(nèi)皮細胞NADPH氧化酶依賴的、氧應激敏感的細胞內(nèi)信號途徑實現(xiàn)的（Guo ZJ，et al，Arterioscler Thromb Vasc Biol，in press）。整體模型研究證實，AOPP慢性

12、負荷導致動脈血管壁AOPP沉積，促進正常新西蘭白兔的大動脈壁產(chǎn)生細胞炎癥和脂滴沉積，并加速高脂血癥家兔動脈粥樣斑塊的形成（Liu SX , Hou FF, et al，Arterioscler Thromb Vasc Biol，2006）。這些研究結(jié)果提示，AOPP在循環(huán)和組織的蓄積可能導致包括血管在內(nèi)的人體細胞的氧化應激和損傷。,14,（三）項目的預試驗結(jié)果 ……（四）本項目的假設(shè) 氧化應激

13、所致的蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物潴留能導致腎細胞氧化應激和損傷，是促進慢性腎臟病進展的重要機制。,15,（五）本項目擬研究的主要內(nèi)容本項目的主要研究目的有三方面：1）證實AOPP潴留導致腎臟細胞氧化應激，促進腎臟病變進展，探尋CKD“共同發(fā)病途徑”的新機制；2）揭示AOPP促細胞應激的機制，闡明這類新致病物質(zhì)導致腎臟病變進展的分子基礎(chǔ)；3）探尋在不同層面阻斷AOPP作用的干預方法，研究其對CKD進展的影響，為臨床延緩或防治CKD進展提供

14、新靶標。（六）本項目的學術(shù)意義和應用前景（七）小結(jié),16,科研基金標書的寫作,,要有一個好的故事 一個內(nèi)容新穎、有意義的故事 一個完整的故事 一個能夠?qū)崿F(xiàn)的故事要寫好這個故事 要讓別人對這個故事感興趣 要讓別人讀懂這個故事 要讓別人相信這個故事,17,自然科學基金申請書的可行性,,避免從文獻中來到文獻中去必須有自己的預試驗資料必須提供足夠的研究背景注意團隊成員的研究背景及其與

15、項目的聯(lián)系,18,（三）項目的預試驗結(jié)果1．臨床研究提示，糖尿病和非糖尿病CKD患者中80％循環(huán)AOPP水平增高，AOPP水平與大動脈血管病變的發(fā)生率和程度以及腎功能減損的程度密切相關(guān)（楊小兵等，中華內(nèi)科雜志，2005，見附錄首頁1）。……在高脂血癥模型同樣證實，AOPP促進動脈粥樣硬化性病變（Liu SX, Hou FF, et al. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2006）這些臨床研究結(jié)果提示，A

16、OPP潴留與人類血管病變密切相關(guān)。 2．對CKD患者的腎組織活檢標本進行觀察證實，病變腎組織中有AOPP沉積，其主要分布于腎小球足細胞、系膜細胞和腎小管上皮細胞，糖尿病腎病的腎小球結(jié)節(jié)性病變中也存在AOPP沉積（見附圖1）。發(fā)現(xiàn)人類病變腎組織局部存在AOPP沉積不僅為AOPP參與腎臟病變的假設(shè)提供了依據(jù)，也為進一步研究AOPP致病作用的細胞和分子機制提供了靶標。,19,（三）項目的預試驗結(jié)果3．對正常大鼠、非糖尿病CKD（5/6腎切

17、除）以及糖尿?。⊿T2誘導）大鼠三種整體模型的研究表明，持續(xù)注射AOPP修飾的同種白蛋白使循環(huán)AOPP達到與人類疾病狀態(tài)下相似的水平能增加腎組織中AOPP的沉積，增加腎組織的細胞炎癥反應和尿液白蛋白排泄量，導致加速性腎纖維化和進行性腎功能減退（Li HY，Hou FF, et al，J Am Soc Nephrol 2007，見附錄首頁3）。這些體內(nèi)研究證據(jù)提示，AOPP潴留對腎臟有直接損傷作用。 4．對人大血管內(nèi)皮細胞的體外實驗發(fā)現(xiàn)

18、，AOPP能通過活化細胞表面的AGE受體－RAGE誘導內(nèi)皮細胞的氧化應激反應，其細胞內(nèi)信號傳遞依賴于內(nèi)皮細胞NADPH氧化酶的激活（待發(fā)表資料，見附圖5，6，7）。這一發(fā)現(xiàn)非常有意義，因為目前已證實腎臟多種固有細胞表達RAGE和NADPH氧化酶亞單位。這些體外實驗資料提示腎臟固有細胞很可能是AOPP攻擊的靶細胞。,20,可行性分析1．項目假設(shè)已進行前期研究，立論具有充分理論和實驗依據(jù)。2．完成本項目研究所需的大多數(shù)關(guān)鍵技術(shù)……（見技

19、術(shù)路線中引用的文獻）。為順利完成本項目提供了技術(shù)保障。3．在前期研究中已從西藏胡黃連中提取了一種無毒成分L-22，細胞學和動物整體研究證實其能抑制AOPP誘導的內(nèi)皮細胞應激……為研究AOPP病理生物學活性及對其干預創(chuàng)造了條件。4．項目團隊自1996年以來一直從事有關(guān)蛋白質(zhì)修飾與疾病關(guān)系的研究，有豐富的研究經(jīng)驗和比較堅實的研究基礎(chǔ)。在此領(lǐng)域已負責6項國家自然科學基金面上項目。有關(guān)蛋白質(zhì)糖基化（AGE）修飾、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)氧化修飾與疾病關(guān)

20、系的研究已有60余篇論著在國內(nèi)外期刊發(fā)表。5．項目負責單位是廣東省重點專科，下屬實驗室是廣東省醫(yī)學重點實驗室，具有完成項目的設(shè)備和條件。,21,科研基金標書的寫作,,要有一個好的故事 一個內(nèi)容新穎、有意義的故事 一個完整的故事 一個能夠?qū)崿F(xiàn)的故事要寫好這個故事 要讓別人對這個故事感興趣 要讓別人讀懂這個故事 要讓別人相信這個故事,22,自然科學基金寫作的注意事項,,充分體現(xiàn)項目的意義，

21、用事實而不是說大話明確揭示項目的創(chuàng)新性,23,研究意義及其背景 慢性腎臟病（CKD）是一組由糖尿病、高血壓和各種炎癥或代謝性腎臟病變所致的慢性進展性疾病群。CKD進展的最終后果是發(fā)展至終末期腎?。‥SRD，即尿毒癥）。ESRD患者雖能依賴腎替代治療（透析或腎移植）生存，但耗費大量醫(yī)療資源……勿庸置疑，CKD已成為當前重要的“全球公眾健康問題”。國際腎臟病學會已將每年3月第3個周末定為“世界腎臟日”，以喚起全世界對CKD

22、防治的關(guān)注。因此，研究如何防止或延緩CKD進展，降低ESRD的發(fā)生率不僅是當前醫(yī)學界面臨的挑戰(zhàn)，也是保護我國有限醫(yī)療資源，關(guān)乎社會經(jīng)濟發(fā)展的重要課題。,24,項目的創(chuàng)新點：本項目提出的“蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物潴留促進腎細胞應激和損傷，是促進CKD進展的重要機制”是一新的假說。迄今為止，尚未對蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物在腎臟病變自身發(fā)展中的作用和機制進行深入研究，本項目是對這一未知領(lǐng)域進行的新探索。蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物見于多種人類重要疾病，項目將

23、為深入了解氧化應激導致細胞和組織損傷的機制提供新信息，為防治redox相關(guān)的其他重要疾病提供新途徑。為干預蛋白質(zhì)氧化修飾產(chǎn)物的致病作用開拓一條新途徑,25,科研基金標書的寫作,,要有一個好的故事 一個內(nèi)容新穎、有意義的故事 一個完整的故事 一個能夠?qū)崿F(xiàn)的故事要寫好這個故事 要讓別人對這個故事感興趣 要讓別人讀懂這個故事 要讓別人相信這個故事,26,自然科學基金寫作的注意事項,,用淺顯的

24、語言去描述深奧的問題像剝洋蔥一樣，一層層地說明問題不要硬抄連自己也不明白的東西,27,技術(shù)路線必須清晰、可行,,AOPP-白蛋白,AOPP-白蛋白＋干預劑,正常白蛋白,單純培養(yǎng)基,足細胞,微血管內(nèi)皮細胞,觀察,1. 應激功能表型：凋亡速率裂隙膜蛋白合成分布細胞骨架分布頂端決定簇表達2. 受體和信號途徑,,系膜細胞,腎小管上皮細胞,1. 應激功能表型：細胞氧應激O2－生成酶活性2. 受體和信號途徑,1. 應激功能表型：

25、細胞增殖表達細胞外基質(zhì)分泌生長、細胞因子2. 受體和信號途徑,1. 應激功能表型：表達促炎癥、促纖維化因子轉(zhuǎn)分化2. 受體和信號途徑,觀察,觀察,觀察,共同培養(yǎng),,主要研究方案（體外研究）,,,,,,,,,,,,,,,28,研究內(nèi)容的體量要合理,,研究內(nèi)容要突出重點要能在規(guī)定的時間內(nèi)完成,29,科研基金標書的寫作,,要有一個好的故事 一個內(nèi)容新穎、有意義的故事 一個完整的故事 一個能夠?qū)崿F(xiàn)的故事

26、要寫好這個故事 要讓別人對這個故事感興趣 要讓別人讀懂這個故事 要讓別人相信這個故事,30,自然科學基金寫作的注意事項,,揚長避短，不要試圖申請你和你的團隊沒有任何基礎(chǔ)的項目用證據(jù)說明項目是有可能實現(xiàn)的用證據(jù)說明你的團隊有能力完成這個項目（詳細提供以往的工作基礎(chǔ)和發(fā)表的論文）,31,近年發(fā)表的與本項目有關(guān)的論著（下劃線者為通訊作者）國外期刊已發(fā)表的論文Li HY, Hou FF, Zhang X, Che

27、n PY, Liu SX, Feng JX, Liu ZQ, Shan YX, Wang GB, Zhou ZM, Tian JW, Xie D. Advanced oxidation protein products accelerate fibrosis in a remnant kidney model. J Am Soc Nephrol, 2007；18 (2): 528~538 (IF 7.371 [2006年])Hou F

28、F, Xie D, Zhang X, Chen PY, Zhang WR, Liang M, Guo ZJ, Jiang JP，Renoprotection of optimal antiproteinuric doses (ROAD) study: a randomized controlled study of benazepril and losartan in chronic renal insufficiency，J Am S

29、oc Nephrol， 2007；18 (6)：1889～1898 (IF 7.371 [2006年])Feng JX, Hou FF, Liang M, Wang GB, Zhang X, Li HY, Xie D, Tian JW, Liu ZQ. Restricted intake of dietary advanced glycation end products retards renal progression in th

30、e remnant kidney model. Kidney Int, 2007；71 (9) : 901~911 (IF 4.773 [2006年])Li JT, Hou FF, Guo ZJ, Shan YX, Zhang X, Liu ZQ. Advanced glycation end products upregulate C-reactive protein synthesis by human hepatocytes t