中藥藥理實踐教學講義

1、藥理教研室,中藥藥理（實踐）教學講義,一、實驗須知 二、炮制對延胡索鎮(zhèn)痛作用的影響（熱板法） 三、附子炮制前后對小鼠中毒情況的影響 四、天麻對小鼠睡眠的影響 五、天南星抗小鼠驚厥作用 六、茵陳蒿湯對家兔的利膽作用（插管法） 七、麻黃對正常大鼠足跖部汗液分泌的影響（著色法） 八、人參對小鼠抗疲勞作用的觀察,目錄,實驗前應(yīng)掌握受試藥物的現(xiàn)代中藥藥理學研究內(nèi)容；結(jié)合中醫(yī)藥理論分析實驗結(jié)果，評價其對中醫(yī)藥理論的論證和闡明作用；

2、思考中藥藥理實驗設(shè)計的一般思路。,實驗須知,一、炮制對延胡索鎮(zhèn)痛作用的影響（熱板法）,實 驗 原 理 與 目 的,可溶性生物堿,,,水煎醇沉液(4g原藥材/ml),,水煎醇沉液(4g原藥材/ml),醋制延胡索,生延胡索,,,ip,ip,雌性,藥品、動物與給藥方法,,,55±0.5ºC,15 ～20ºC,5-30秒,,,給藥后15分鐘測定,給藥后45分鐘測定,給藥后60分鐘測定,痛閾值,操作流程,,,各時

3、間點組間檢驗,生理鹽水組,延胡索組,醋制延胡索組,藥物有無作用,作用有無強弱差異,,觀察指標與統(tǒng)計方法,,給藥后若放入燒杯內(nèi)小鼠60秒仍無反應(yīng)，應(yīng)將小鼠取出，痛閾值以60秒計。 正常小鼠放入熱板后易出現(xiàn)不安、舉前肢、舔前足、踢后肢等現(xiàn)象，這些動作不能作為疼痛指標，只有舔后足才作為疼痛指標。,注意事項,思考題,二、附子炮制前后致小鼠中毒表現(xiàn)的影響,實 驗 原 理 與 目 的,有毒生物堿,,,炮制,,,水煎液(1g原藥材/ml),,水煎

4、液(1g原藥材/ml),生附子,制附子,,,ig,ig,藥品、動物與給藥方法,,,給藥后30分鐘內(nèi),,,一般狀態(tài),活動能力,死亡只數(shù),操作流程,,,,組間檢驗,生附子組,制附子組,毒性表現(xiàn)是什么,毒性大小有無差異,直觀觀察,,,,觀察指標與統(tǒng)計方法,,生附子和制附子水煎液制備時均應(yīng)煎煮4小時以上。,注意事項,思考題,三、天麻對小鼠睡眠的影響,實 驗 原 理 與 目 的,,天麻素,天麻苷元,天麻多糖,天麻水提液,天麻水提醇沉液,,,想睡

5、了?。?戊巴比妥鈉閾下劑量,,ip,ip,,對側(cè)腹腔ip,以翻正反射消失為指標記,,水煎液(1g原藥材/ml),,天麻,生理鹽水,,,ip,ip,藥品、動物與給藥方法,,,給藥后30分鐘ip 4mg/ml戊巴比妥鈉32mg/kg,,,一般狀態(tài),活動能力,入睡只數(shù),Ip0.1ml/10g,操作流程,,,,,組間檢驗,天麻組,生理鹽水組,活動能力有無差異,有無鎮(zhèn)靜作用,直觀觀察,,觀察指標與統(tǒng)計方法,,戊巴比妥鈉溶液新鮮配制；戊巴比妥

6、的閾下劑量每次實驗前需預(yù)試找出；天麻飲片要預(yù)先蒸軟或浸泡使成分煎出完全．,注意事項,思考題,四、天南星抗小鼠驚厥作用,實 驗 原 理 與 目 的,,水煎液(0.5g原藥材/ml),,天南星,生理鹽水,,,ip,ip,藥品、動物與給藥方法,,,給藥后30分鐘sc0.06%硝酸士的寧0.2ml,,,一般狀態(tài),驚厥潛伏期,驚厥只數(shù),Ip0.1ml/10g,操作流程,,,,,,,,,組間檢驗,天南星組,生理鹽水組,潛伏期有無差異,發(fā)生只數(shù)的

7、差異,,,藥物作用？？？,觀察指標與統(tǒng)計方法,,士的寧的的驚厥劑量每次實驗前需預(yù)試找出,注意事項,思考題,五、茵陳蒿湯對家兔的利膽作用,實 驗 原 理 與 目 的,,,水煎醇沉液(２g原藥材/ml),菌陳蒿湯,,十二指腸給藥,藥品、動物與給藥方法,,操作流程,扎線,牽引扎線,導管,膽管十二指腸端,膽汁,,示意圖,,,前后對照,總流量有無差異,,,,,,藥物作用？？？,觀察指標與統(tǒng)計方法,,膽總管引流膽汁的塑料導管可用頭皮針上的半透

8、明塑料管制成。管的尖端剪成斜口，離管口2—3mm處加熱拉成稍細的頸部，以便結(jié)扎膽總管而固定之。開腹手術(shù)中通有出血點，用絲線結(jié)扎止血。膽總管比較細，切勿用力拉牽引線而拉斷，故操作必須細心輕巧。膽總管切口應(yīng)一次成功，正好剪斷膽總管的1/3-1/2。注意一定要剪斷內(nèi)膜，使膽汁引流導管插在內(nèi)膜下，見有膽汁流出便易插入導管。,注意事項,思考題,六、麻黃對正常大鼠足跖部汗液分泌的影響,實 驗 原 理 與 目 的,,發(fā)汗解表,麻黃發(fā)汗以麻黃湯作

9、用最強,,水煎液(１.5g原藥材/ml),,麻黃湯,生理鹽水,,,ig,ig,麻黃湯（去麻黃桂枝組）,,ig,藥品、動物與給藥方法,和田-高垣氏試劑,A液：取碘2g溶于100ml無水乙醇即成；,B液：取可溶性淀粉50g、蓖麻油100ml，兩者均勻混合即成,,試劑,,,給藥后30分鐘，固定，足跖部A液 ＋Ｂ液，１h內(nèi)放大鏡觀察,,,汗液出現(xiàn)時間,汗滴數(shù)量,汗液顏色,ig1ml/100g,25-27ºC,操作流程,,,,,組間檢

10、驗,麻黃湯（去麻黃桂枝組）,生理鹽水組,汗滴數(shù)量的差異,,,,藥物作用？？？,,,,,組間檢驗,生理鹽水組,汗液出現(xiàn)時間有無差異,,,,麻黃湯組,觀察指標與統(tǒng)計方法,,本實驗宜在恒溫、恒濕條件下進行，室溫控制在26+1℃。實驗前最好將大鼠進行固定器訓練，固定大鼠時，操作應(yīng)輕柔，盡量避免掙扎出汗。在一次實驗中，觀察汗點出現(xiàn)時間應(yīng)一致。大鼠足跖部汗腺主要分布在足跖肉墊上，足跖關(guān)節(jié)也有分布，足掌心則無。本實驗也可以用小鼠。,注意事

11、項,思考題,七、人參對小鼠抗疲勞作用的觀察,實 驗 原 理 與 目 的,,水煎液(5g原藥材/ml),,人參,生理鹽水,,,ig,ig,雄性,藥品、動物與給藥方法,,,給藥后45分鐘，5 %體重負荷，置水中,,,活動能力,溺斃時間,Ig0.2ml/10g,20±0.5ºC,20cm,鼻孔浸入水面下15s以上,操作流程I,,,,,組間檢驗,人參組,生理鹽水組,溺斃時間,,,,,,,組間檢驗,生理鹽水組,藥物作用？？

12、？,觀察指標與統(tǒng)計方法I,,要嚴格控制水溫，水溫差異太大會影響實驗結(jié)果。動物單個游泳，集體游泳會影響實驗結(jié)果。,注意事項I,,,給藥后45分鐘，置入含鈉石灰的密閉廣口瓶中,,,死亡時間,Ig0.2ml/10g,操作流程II,,,,,組間檢驗,人參組,生理鹽水組,死亡時間,,,,,,,組間檢驗,生理鹽水組,藥物作用？？？,觀察指標與統(tǒng)計方法II,,玻璃瓶口必須嚴密封閉，玻璃瓶大小應(yīng)先經(jīng)校準，求其一致。鈉石灰應(yīng)新鮮。,注意事項II,思