第二十五章支原體屬和脲原體屬

1、支原體屬和脲原體屬,基 礎(chǔ) 醫(yī) 學(xué) 院病原生物學(xué)教研室,支原體（Mycoplasma）,1.能在人工培養(yǎng)基中生長 2.能獨(dú)立生活 3.最小原核細(xì)胞型微生物 4.無細(xì)胞壁 5.二分裂繁殖 6.多形態(tài)性,“油煎蛋樣”菌落,分 類,柔膜體綱(Mollicutes) 支原體目(MycoPlasmatales) 下分3個(gè)科： ① 支原體科（MycoPlasmatac

2、eae）； 2個(gè)屬: 支原體（Mycoplasma） 脲原體（Ureaplasma） ② 無膽甾原體科（Acholeplasma-taceae）， 生長時(shí)不需要外源性膽固醇； ③ 螺原體科（Spiroplasmataceae）， 生長至一定階段呈螺形。,人體分離: 20種， 其中8種是致病或條件致病菌: 肺炎支原體(M.

3、pneumoniae,Mpn) 生殖支原體(M.geuitalium,Mg) 人型支原體(M.hominis,Mh) 發(fā)酵支原體(M.fermentants,Mf) 穿透支原體(M.penetrans,Mpe) 梨支原體(M.pirum,Mpi) 關(guān)節(jié)炎支原體(M.arthritidis,Mart) 解脲脲原體(U.urealy

4、ticum,Uu),,支原體與細(xì)菌L型比較,肺炎支原體,形態(tài)與結(jié)構(gòu) 大 小:可通過濾器,光鏡下可觀察細(xì)胞壁:無形 態(tài):球形、球桿形、分枝絲狀或念珠狀等細(xì)胞膜: 三層:1.蛋白質(zhì) 2.脂質(zhì)(膽固醇較多) 3.蛋白質(zhì)染 色:姬姆薩染色法:淡紫色或藍(lán)色核 酸:二種(DNA和 RNA),生長繁殖,繁殖方式: 二分裂方式 球體延伸、分節(jié)斷裂、出芽、分枝繁殖周期:3小時(shí)營養(yǎng)要求:較高,

5、含動(dòng)物血清、酵母浸液酸 堿 度:pH7.8～8．0氣體環(huán)境:5％CO2或5％CO2與95％N2溫度與時(shí)間:37℃,3d～10d菌落特征: “油煎蛋”狀菌落,表25—2支原體與脲原體的某些生物學(xué)特性,抗原構(gòu)造,主要抗原成分: 1.蛋白質(zhì) P1蛋白抗原:表面抗原 致病:粘附 2.脂質(zhì)中的糖脂 抗體:產(chǎn)生補(bǔ)體結(jié)合抗體 生長抑制抗體

6、 代謝抑制抗體,抵抗力,理化因素:比細(xì)菌敏感(因無細(xì)胞壁)熱:弱, 50℃經(jīng)30min死亡 －20℃可長期保存耐堿酸和有機(jī)溶劑:較敏感(消毒劑、清潔劑)四環(huán)素族、紅霉素、卡那霉素、氯霉素: 敏感 青霉素:不敏感,致病性,外源性感染上呼吸道感染:感冒、咽炎、氣管炎支原體性肺炎 （Mycoplasmal pneumonia）(原發(fā)性非典型肺炎)（primary atypical pneumonia）

7、 臨床表現(xiàn)和胸部X線: 肺炎鏈球菌引起的典型肺炎不同 類似病毒性肺炎,世界各地,密集人群,兒童及青少年多見秋冬季發(fā)病率高,每隔3～5年出現(xiàn)一次流行飛沫傳播潛伏期2W～3W,感染起病緩慢臨床主要癥狀:發(fā)熱（約39℃）、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。病人帶菌、排菌狀態(tài)可持續(xù)6W～8W肺外合并癥（神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及心臟等）發(fā)病率高，嚴(yán)重者可致死致病性:粘附是先決條件 也和超敏反應(yīng)有關(guān)(共

8、同抗原),免疫性,抗體：多種(CF抗體、生長抑制抗體、 殺支原體抗體等) 呼吸道sIgA:有一定作用非特異冷凝集素: 1.和自身免疫有關(guān) 2.患者陽性率為50％， 常用于輔助診斷。,微生物學(xué)檢查法,病原分離特異核酸的檢測(cè)血清學(xué)診斷抗原檢測(cè)冷凝集試驗(yàn),病原分離,標(biāo) 本：咽拭子或痰液培養(yǎng)基：雙相培養(yǎng)基（含馬血清、酵母浸液） SP-4培養(yǎng)基（提高分離

9、率30％～40％）氣體環(huán)境：5％～10％CO2溫度與時(shí)間：37℃，l～2W可疑菌落： 1.糖發(fā)酵 2.溶血性 3.血細(xì)胞吸附 4.特異抗血清生長抑制試驗(yàn)等,特異核酸的檢測(cè),（1）聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)： 優(yōu)點(diǎn)：特異性好 敏感性高 快速、簡便 靶基因：16S RNA基因 P1蛋白基因 方法：套式PCR(

10、nPCR) 復(fù)合PCR 限制性片段長度多態(tài)性分析(RFLP) 隨機(jī)引物PCR(RAPD) （2）基因探針 根據(jù)堿基嚴(yán)格互補(bǔ)配對(duì)的特性 特異性強(qiáng)，敏感性不如PCR技術(shù),血清學(xué)診斷,（1）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）： 雙份抗體效價(jià)升高4倍以上?診斷（2）間接血凝試驗(yàn)（IHA）： 測(cè)抗體, 2—3周高峰（3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(EL

11、ISA)： 測(cè)IgM、IgG和IgA 敏感性高（4）間接免疫熒光試驗(yàn)： 檢測(cè)IgM、IgG 特異性較強(qiáng),抗原檢測(cè),方法1:間接法或直接法 抗體:熒光標(biāo)記多克隆抗體或單克隆抗體 檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原 86%可陽性 方法2:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原 可檢

12、出105 CFU /ml 方法3:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)捕獲法 抗體:抗P1單克隆抗體 檢測(cè)標(biāo)本:P1蛋白 可檢出104CFU/ml 特異性強(qiáng),3小時(shí)即可,冷凝集試驗(yàn),輔助診斷非典型肺炎針對(duì)紅細(xì)胞膜Ⅰ抗原冷凝集素屬IgM 5d～10d出現(xiàn)，2W～3W高峰輔助診斷效價(jià): 64～128倍以上 雙份效價(jià)升高4倍以上特異性

13、和敏感性較低,防 冶,藥物:四環(huán)素類(近年來耐藥性增加) 大環(huán)內(nèi)酯類:首選 (紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素) 喹諾酮類疫苗:減毒活疫苗 基因工程疫苗,其它支原體,寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜屬于正常菌群,引起條件性感染口腔支原體:慢性呼吸道感染唾液支原體:齒槽溢膿生殖支原體:生殖道、呼吸道和關(guān)節(jié)腔的炎癥, 流產(chǎn)、早產(chǎn)和新生兒肺炎發(fā)酵支原體:類風(fēng)濕

14、性關(guān)節(jié)炎 AIDS相關(guān)(分離率明顯升高)人型支原體:滲出性咽炎、非淋菌性尿道炎 (nongonococcal urithritis,NGU), 卵巢膿腫、 產(chǎn)褥敗血癥,脲原體屬 (Ureaplasma),從支原體分出的獨(dú)立的新屬 正常菌群:絕大多數(shù) 有致病性:解脲脲原體 （U.urealyticum,Uu) 1954年從NGU患者的病灶處分離

15、 類似肺炎支原體 能水解尿素,生物學(xué)性狀,形態(tài):圓形或球桿狀染色:革蘭染色陰性溫度和酸堿度: 37℃, pH 6.0菌落:很小(15μm～60μm,放大200倍), 稱T株（Tiny colony strain）敏感性: 敏感: 四環(huán)素、氯霉素、慶大霉素、 卡那霉素、0.05% 醋酸鉈、 125μg/ml 5-碘-2’脫氧尿苷 不敏感:

16、青霉素生化特性:水解尿素產(chǎn)氨,致病性,存 在: 人和動(dòng)物的口腔、呼吸道、 泌尿生殖道血清型: 解脲脲原體(Uu)有14個(gè)血清型傳播途徑: 性接觸傳播、母嬰傳播所致疾病 (STD) 泌尿生殖道感染: NGU 、盆腔感染、宮頸 炎、陰道炎、輸卵管炎、慢性前列腺 炎、附睪炎、男女不孕癥、反復(fù)流產(chǎn)、 早產(chǎn)、死胎 新生兒疾病:呼吸道病變、肺炎、腦膜炎,引起男性不孕的原因