輸血科常見問題

1、輸血科（血庫）實(shí)驗(yàn)室及輸血中常見問題,孫利,基礎(chǔ)概念,抗原－是能與特異性抗體或免疫細(xì)胞在體內(nèi)、外發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)，并常?？梢鹛禺愋悦庖邞?yīng)答?？贵w－是指體內(nèi)免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，為對(duì)某種抗原引起反應(yīng)所形成，且能與該抗原或相近的抗原發(fā)生特異性反應(yīng)。不完全抗體－在生理鹽水中與相應(yīng)的紅細(xì)胞不產(chǎn)生可見反應(yīng)(不凝集),需通過其它介質(zhì)(膠體、酶、抗人球蛋白血清等）才能出現(xiàn)可見的抗體。不規(guī)則抗體 是指抗A和抗B以外的血型抗體,基礎(chǔ)概念,血型－早

2、期 僅指存在于紅細(xì)胞上表面抗原的差異，現(xiàn)在　包刮白細(xì)胞、血小板表面抗原的差異。血型－可分ABO、RH、MNSs等血型系統(tǒng)，共有29系統(tǒng)．共有400多種抗原。ＡＢＯ亞型：指雖然屬同一血型抗原，但結(jié)構(gòu)和性能上有一定差異．ＡＢＯ血型抗體：IgG IgM IgA IgD IgE 天然IgM 免疫 IgG　前兩者最多見。,基礎(chǔ)概念,ABO血型系統(tǒng)：1900年卡爾蘭德斯坦那發(fā)現(xiàn) 根據(jù)紅細(xì)胞上是否有A和B抗原將人類分四種血型。 A型：

3、紅細(xì)胞含有A抗原，血清（漿）中有B抗體。B型：紅細(xì)胞含有B抗原 ，血清（漿）中有A抗體。AB型：紅細(xì)胞含有A、B抗原，血清（漿）中無AB抗體。O 型：紅細(xì)胞上無A、B抗原，血清（漿）中有A、B抗體。,基礎(chǔ)概念,血型物質(zhì)：每個(gè)人專有的血型抗原物質(zhì)。主要存在于紅細(xì)胞，廣泛存在于其他組織和體液中。兩種形式　 醇溶性　水溶性意義　　鑒定血型　　鑒定抗體性質(zhì)　可測(cè)臟器和組織血型,ＡＢＯ血型鑒定,卡式微量凝膠法　(具體操作見操作規(guī)程)

4、操作要點(diǎn)：被檢者1%紅細(xì)胞懸液，前四孔加50微升，后兩孔加血漿50微升，(前2孔是正定型，第3孔是D，第4孔是對(duì)照，第5、6是反定型）放專用的離心機(jī)離心5分鐘，沉底部的是陰性，在上層或中層算陽性。注意觀察：1、正反結(jié)果是否一致，2、D孔紅細(xì)胞是否沉降，在上層或中層結(jié)果是陽性,紅細(xì)胞沉底部陰性者（需進(jìn)一步用手工法，單克隆抗D試劑確定，操作方法：2-3%紅細(xì)胞懸液+2滴單克隆抗D試劑，放置37℃水域15分鐘，用1500轉(zhuǎn)/分，離心3分

5、鐘，在顯微鏡下看結(jié)果，凝集為陽性，無凝集為陰性。）,ＡＢＯ血型鑒定及影響因素,凝膠微柱法　專用儀器試劑　標(biāo)準(zhǔn)化　微機(jī)化質(zhì)量控制　正反定型結(jié)果不一致　　　技術(shù)失誤　　假陰性　　假陽性血清問題被檢者紅細(xì)胞問題 免球致敏 遺傳或獲得性表面異常多凝集,,血型鑒定影響因素,異?；?亞型中弱抗原近期輸血 呈混合外觀凝集嵌和體血型疾病因素導(dǎo)致抗原減弱

6、 白血病 MDS血型特異物質(zhì)過高 卵巢囊腫　血型物質(zhì)高獲得性B 由革蘭陰性桿菌的作用 紅C有類B多凝集、全凝集　　細(xì)菌感染,血型鑒定影響因素,血漿置換異常血漿蛋白不規(guī)則抗體存在低丙種球蛋白血癥 不凝集 弱凝集藥物等因素 右旋糖酐　激素　青霉素年齡因素,ＡＢＯ血型鑒定,正反定性不一致的解決辦法：重復(fù)試驗(yàn)　洗滌被測(cè)紅細(xì)胞　換試劑或方法測(cè)　用相關(guān)亞型試劑相關(guān)試驗(yàn)加以鑒別

7、 吸收試驗(yàn) 放散試驗(yàn),Ｒh血型鑒定,衛(wèi)生部要求：鑒定ＲhＤ陰陽性試管法 抗Ｄ血清２滴＋被檢2-3％紅細(xì)胞懸液２滴混勻 1500轉(zhuǎn)/分 離心2分鐘 凝集為陽性。陰性：要求37℃水浴15分鐘，離心檢測(cè)。卡式凝膠微柱弱D者：受血者劃定Ｒh陰性，供血者劃定Ｒh陽性。,,,注意,在交叉配血中，如發(fā)現(xiàn)某孔弱凝集（凝膠層中有拖帶），必需復(fù)檢，（包刮：供、受兩者血型鑒定，原方法、凝聚胺交叉配

8、血法、）。確認(rèn)安全，才可發(fā)出。如，在卡式交叉配血中出現(xiàn)，次側(cè)不合，首先復(fù)檢受、供血者的血型，ABO和RHD血型相同，應(yīng)加做抗人球蛋白試驗(yàn)，如患者陽性，與臨床聯(lián)系，說明，患者血球上有不完全抗體，建議臨床改輸洗滌紅細(xì)胞，并馬上向市血站約出洗滌紅細(xì)胞。如出現(xiàn)正反鑒定不一致，必須重新鑒定，并用手工試管法進(jìn)行正反血型鑒定，以試管法為準(zhǔn)，如仍然不一致，馬上反饋給主任處理。,凝聚胺原理,紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷，以避免其產(chǎn)生自發(fā)性聚集，當(dāng)紅

9、細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)時(shí)，陽離子會(huì)被紅細(xì)胞的負(fù)電荷所吸引，此時(shí)紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞，而形成Zeta電位， Zeta電位決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。凝聚胺技術(shù)首先利用底離子溶液（LIM），降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云，以促進(jìn)紅細(xì)胞和血清（血漿）中的抗體結(jié)合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一種高價(jià)陽離子多聚物，肝素中和劑，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞Zeta電位降

10、低，縮短紅細(xì)胞之間的距離，使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝聚。最后，加入懸浮液（Resuspending），Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene）陽離子的作用，使正常的紅細(xì)胞非特異性凝聚散開，試驗(yàn)結(jié)果為陰性，但如果紅細(xì)胞被應(yīng)的抗體致敏，則會(huì)被凝聚胺凝結(jié)，凝集就不會(huì)散開，試驗(yàn)結(jié)果為陽性。,凝聚胺法,1、取3支試管分別標(biāo)記（主、次、混）2、5%紅細(xì)胞制備：取25ul樣本壓積紅細(xì)胞懸浮于500ul生理鹽水中。3、主側(cè)：受血者

11、血漿2滴+5%供血者紅細(xì)胞1滴。4、次側(cè)：供血者血漿2滴+5%受血者紅細(xì)胞1滴。5、將主側(cè)管和次側(cè)管所加的所有成分都加入混合管中。6、主側(cè)管、次側(cè)管、混合管中各加入低離子介質(zhì)溶液600ul,混合均勻，室溫放置1分鐘。7、再分別向3管中加入凝聚胺溶液2滴混合均勻，室溫放置15秒鐘。8、置離心機(jī)內(nèi)3400rpm/15秒，倒去上清液，使管底保留約0.1ml的液體。9、目測(cè)管內(nèi)有無紅細(xì)胞凝集塊，若沒有凝塊，則必須重做。10、向紅細(xì)

12、胞已發(fā)生凝集的試管內(nèi)加入2滴復(fù)懸液，輕輕混勻，顯微鏡下觀察結(jié)果（紅細(xì)胞凝塊散開為陰性反應(yīng)，示血交叉配型相合；若紅細(xì)胞仍凝集成塊為陽性反應(yīng)，示血交叉配型不合。,交叉配血注意點(diǎn),標(biāo)本是關(guān)鍵 核對(duì) 采集 操作 規(guī)范決不放過疑點(diǎn) 弱凝集 溶血現(xiàn)象輸血基本原則：ABO、Rh“Ｄ”血型相同，配血相合可輸 標(biāo)本保存 7天以上,主要起血清學(xué)問題的一些臨床疾病,多發(fā)性骨髓瘤ABO同種抗體缺乏或減弱 低（無）丙

13、種球蛋白血癥免疫性ABO抗體 減低 新生兒、妊辰自身（同種）抗N 血液透析病人 HLA抗體 經(jīng)產(chǎn)婦、移植病人、多次輸血者ABO同種抗體的缺乏或減弱 <3歲新生兒 ﹥70歲老年人,抗人球蛋白試驗(yàn),測(cè)定: 不完全抗體卡式凝膠微柱法又分為間接法

14、 測(cè)患者血清中不完全抗體直接法 測(cè)患者紅細(xì)胞上有無不完全抗體配受檢者1%紅細(xì)胞懸液，取50微升，加入到抗人球打蛋白卡中，放專用離心5分鐘，紅細(xì)胞在上層或中層是陽性。,不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)和性質(zhì)鑒定,200年，衛(wèi)生部《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》第十七條規(guī)定：交叉配血不合時(shí)，對(duì)有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者。不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn) 1 2 3 標(biāo)準(zhǔn)抗原血型抗體性質(zhì)鑒定 標(biāo)準(zhǔn) 紅細(xì)胞譜1-10測(cè)定:是指抗A和

15、抗B以外的血型抗體(完全抗體與不完全抗體),血型不規(guī)則抗體的檢測(cè),卡式微量凝膠法（具體操作規(guī)程見操作卡）操作要點(diǎn)：取被檢者血清（血漿）每孔加50微升（共三孔），+標(biāo)準(zhǔn)不規(guī)則抗體篩查約1%紅細(xì)胞懸液50微升，放置專用37℃箱15分鐘，取出放專用離心機(jī)，離心5分鐘，紅細(xì)胞沉底部為陰性，在上層或中層是陽性。,血型抗體篩查表,,,,,,,,,,,臨床輸血的基本程序,輸血前：符合臨床輸血標(biāo)準(zhǔn)的患者 或可能需要輸血的患者，醫(yī)師必須與患者或家屬談話

16、→征得同意，并簽訂《輸血治療同意書》→填寫《臨床輸血申請(qǐng)單》，檢測(cè)輸血前規(guī)定的檢測(cè)項(xiàng)目。 采血：受血者血標(biāo)本和申請(qǐng)單，于預(yù)定日期前送交輸血科備血（雙方逐項(xiàng)核對(duì)） 輸血科：核對(duì)受血者標(biāo)本與申請(qǐng)單信息，鑒定ABO血型（正、反）并常規(guī)檢查患者RH（D）血型（急診搶救患者緊急輸血時(shí)RH（D）檢查可除外），交叉配血及血樣保存→發(fā)血， 取血：醫(yī)護(hù)人員(或經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)人員取血)與輸血科發(fā)血雙方核對(duì)并簽字. 輸血：護(hù)士輸血前核

17、對(duì)、輸血時(shí)床邊核對(duì)→輸血，先慢后快、速度調(diào)整，記錄，開始時(shí)間、15分鐘情況、結(jié)束時(shí)間。 輸血后：將交叉配血報(bào)告、同意書、記錄單貼在病歷中，填寫輸血反應(yīng)反饋卡→血袋送回輸血科保存（至少保存1天）,輸血知識(shí),輸血前： 必須對(duì)患者進(jìn)行乙肝表面抗原（HbsAg）、丙型肝炎抗體（HCV）、梅毒抗體（RPR）、艾滋病抗體（HIV）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）檢測(cè)，陽性結(jié)果必須記錄并告知患者（家屬）。輸血指針： ⑴

18、 Hb:<100g/L, ⑵HCT:<30, ⑶PT或APTT檢測(cè)結(jié)果各專科有各自的輸血指南：如血液病、白血病 老人 等,輸血知識(shí),輸血基本原則 患者缺什么 輸什么提倡成份輸血 全血 不全充分認(rèn)清輸血風(fēng)險(xiǎn)，輸血可能會(huì)出現(xiàn)輸血相關(guān)病毒感染風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)病毒種類的局限性新病毒不斷被發(fā)現(xiàn)檢測(cè)技術(shù)的局限性輸血相關(guān)肺損傷輸血相關(guān)性移植物抗宿主病TA-GVHD,

19、新生兒溶血病輸血選擇,新生兒溶血?。阂话阒改笅胙筒缓隙鹛夯蛐律鷥旱拿庖咝匀苎?，簡(jiǎn)稱HDN，原稱胎兒有核紅細(xì)胞增多癥。ABO新生兒溶血病換血，選擇“O”型紅細(xì)胞、AB型血漿混合血輸注。RhD新生兒溶血病換血，選擇ABO與嬰兒同型的Rh陰性血輸注RhD伴有ABO新生兒溶血病換血，選擇“O”型Rh陰性紅細(xì)胞加AB型血漿混合血輸注。ABO和RhD以外的其它抗體原因的換血，必須選擇不含有特異性抗體的相應(yīng)抗原ABO同型的血輸注。

20、其它任何新生兒黃疸病患兒換血，不選擇ABO、Rh與嬰兒同型輸注。,嘉 興 市 第 一 醫(yī) 院 （嘉興醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院） 臨 床 輸 血 申 請(qǐng) 單 No：000000預(yù)定輸血日期： 年 月 日 時(shí) ?肯定輸血?手術(shù)備用?酌情

21、備用受血者姓名： 性別：（男/女） 年齡： 病案號(hào)： 科別： 病區(qū)： 床號(hào)： 臨床診斷： 輸血目的： 繼往輸血史（有/無） 孕 產(chǎn) 受血者屬地：

22、（本市/外埠 ） 預(yù)定輸血成分（類型）： 預(yù)定輸血量： 受血者：ABO血型： Rh(D)血型： 血紅蛋白： ， HCT： ，血小板： ALT： U/L，HBsAg：

23、 ， Anti-HCV： Anti-HIV1/2： ，梅毒： 申請(qǐng)醫(yī)師簽名： 主治醫(yī)師審核簽名：

24、 申請(qǐng)日期： 上/下午 時(shí)采血者簽名： 收樣本者（血庫）簽名： 注：請(qǐng)醫(yī)師逐項(xiàng)認(rèn)真準(zhǔn)確填寫，請(qǐng)于輸血日前送輸血科/血庫。

25、 受血者姓名： 受血者姓名： No：000000病案號(hào) ： 病區(qū)： 床號(hào) 病案號(hào)： 病區(qū)： 床號(hào)： 血型： No：000000 血液類型： 申請(qǐng)量：,用 血 及 互 助 金 審 核 單姓名 性別

26、 年齡 血型（ABO＆Rh） 科別 床號(hào) 住院號(hào) 診斷 申請(qǐng)用血種類 用血量 醫(yī)師簽名

27、 （此欄由醫(yī)師填寫） 何地病人 市區(qū) 外省市 病人身份證：

28、 無償獻(xiàn)血證號(hào)碼： 獻(xiàn)血日期： 年 月 日，獻(xiàn)血地點(diǎn)： 獻(xiàn)血量： ml應(yīng)交血費(fèi) 元（大寫），預(yù)交用血互助金 元（大寫）

29、 （此欄由醫(yī)院輸血科填寫） 已交用血費(fèi)

30、 元（大寫），收據(jù)號(hào)碼 已預(yù)交用血互助金 元（大寫），收據(jù)號(hào)碼： 醫(yī)院財(cái)務(wù)科收費(fèi)處蓋章： 收費(fèi)員： 年 月 日 （此欄由收費(fèi)處填寫）

31、 經(jīng)審核按嘉政發(fā)〔1999〕82號(hào)辦法第十五條第十六條免交互助金、免交用血費(fèi)經(jīng)審核按嘉政發(fā)〔1999〕82號(hào)辦法第十七條第二十條應(yīng)交互助金、應(yīng)交用血費(fèi)同意用血，種類： 少漿血、血漿、血小板、全血 或 數(shù)量：

32、 醫(yī)院輸血科（蓋章） 審核人簽名： 年 月 日 （此欄由醫(yī)院輸血科填寫）

33、 注：凡18-55周歲本人及直系親屬未參加獻(xiàn)血，需交納互助金。,輸血知識(shí),1 全血 一般200-400 毫升 2 紅細(xì)胞懸液（少漿血）1-2單位 3 照射紅細(xì)胞（少漿血）1-2單位如：伽瑪線照射 4 洗滌紅細(xì)胞 洗滌后（只有24小時(shí)有效期） 5

34、冰凍保存紅細(xì)胞 （溶解洗滌后只有24小時(shí)有效期） 6除白細(xì)胞紅細(xì)胞 1-2單位,血庫人員接到輸血標(biāo)本和輸血單注意,核對(duì)輸血單子與患者標(biāo)本姓名病區(qū)床號(hào)要一致 有輸血標(biāo)本，要有護(hù)士簽名注意 要血時(shí)間 種類 時(shí)間無血型的 正反鑒定血型 RH(D) 不規(guī)則抗體檢測(cè) 交叉配血 同型相合，發(fā)血。手術(shù)備用、酌情備用輸血單子，血型必須及時(shí)鑒定。,血漿,發(fā)血漿注意1、無血型的，必須進(jìn)行正反血型鑒定并且需復(fù)檢血

35、型確認(rèn)。同型發(fā)血漿。2、患者紅細(xì)胞上有不完全抗體存在，一般情況下，不發(fā)血漿。如患者確實(shí)需要血漿，需用凝聚胺交叉配血后，相合、相容可發(fā)。3、因市血站給我院是少漿血和血漿是1：1供給，故血漿緊缺，一般情況下，單要血漿，我們只能供給1-2包，除臨床說明患者病情危急，我們盡量滿足臨床。,血小板,馬上向是血站要或預(yù)約好，并且在單子上注明，已約、幾月幾日。發(fā)機(jī)采血小板與血漿一樣，只要同型輸注。如手工血小板必須進(jìn)行交叉配血，相合、相容才可

36、發(fā)血小板。,輸血知識(shí),血小板輸血機(jī)采血小板 一般10個(gè)單位一袋， 純輸注效果好， 同型輸注手工血小板 一般1-2個(gè)單位一袋，必須交叉配血，相合可輸,輸血知識(shí),冷沉淀 同血型輸注 （同血漿） 冷沉淀輸注的適應(yīng)證先天性凝血因子缺乏 甲 血友病 血管性血友病(VWD) Fg 缺陷, FXIII缺陷獲得性凝血因子缺乏 DIC 嚴(yán)重肝病 尿毒癥纖維結(jié)合蛋白水平降低惡性腫瘤 重癥感染D

37、IC 嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷 大手術(shù),“兩利相存取其重，兩害相存取其輕”？,Rh(D)陰性患者輸Rh(D)陽性血→兩難選擇：不輸血：生命危險(xiǎn)，“行政不作為”輸　血：中央臺(tái)醫(yī)療糾紛官司報(bào)道：1、幾年前天津某醫(yī)院年輕女性RH（D）陰性，因車禍，急診輸RH(D)陽性血，（2002年）現(xiàn)在，告，法院判：醫(yī)院輸,負(fù)擔(dān)60%------。2、2008年齊魯醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，一位年輕女子 Rh(D)陰性患者等了6小時(shí)，Rh(D)陰性血還是