斑馬魚體內(nèi)抗氧化酶活性對(duì)水體重金屬與有機(jī)污染的響應(yīng)研究.pdf

1、水體在人類生活中起著重要的作用，但水體也是多種污染的集中受體，它的安全，直接威脅著人類正常的生存。為了有效地利用生物標(biāo)記物作為污染物暴露和毒性效應(yīng)的早期預(yù)警指標(biāo)，建立一種簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的水體污染監(jiān)測(cè)預(yù)警體系，本論文以水生生物斑馬魚為研究對(duì)象，進(jìn)行了污染物對(duì)抗氧化酶的劑量效應(yīng)關(guān)系和相關(guān)酶類標(biāo)志物的分離純化研究。
　　首先,用1/20、1/10、1/5半致死濃度的重金屬（Cu、Cd、Zn、Pb）和有機(jī)溶劑（苯酚、雙酚A）對(duì)斑馬魚進(jìn)行

2、暴露實(shí)驗(yàn)，以抗氧化酶：超氧化物歧化酶（SOD）和過(guò)氧化氫酶（CAT）作為生物標(biāo)志物，研究了其活性與暴露濃度、時(shí)間的變化情況。其次，通過(guò)硫酸銨沉淀、DEAE-Sephacel離子層析、羥基磷灰石層析、Phenarose Sepharose6-Fast Flow疏水層析等步驟，對(duì)斑馬魚體內(nèi)的氨肽酶進(jìn)行分離純化。
　　研究結(jié)果表明：生活于含低濃度Cu2+水體中的斑馬魚，SOD和CAT活性都隨暴率時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)，但隨著濃度的增大，酶活性

3、增強(qiáng)趨勢(shì)減弱。并且當(dāng)?shù)竭_(dá)一定閾值時(shí)，酶活性將下降。在含Cd2+的水體中，SOD活性隨時(shí)間的增長(zhǎng)而減弱；而CAT活性在低濃度時(shí)增大，但當(dāng)濃度增大時(shí)，其活性便呈現(xiàn)先減小再增大的趨勢(shì)。在含Zn2+的水體中，SOD活性隨時(shí)間的增長(zhǎng)呈現(xiàn)先減小再增大的變化趨勢(shì)，并且隨著濃度的增大，上升趨勢(shì)減弱；而CAT活性隨時(shí)間的增長(zhǎng)而呈現(xiàn)出先增大再減小的變化趨勢(shì)。在含有Pb2+的水體中，SOD活性隨時(shí)間的增長(zhǎng)而增強(qiáng)，但隨著濃度的增大，酶活性的增強(qiáng)趨勢(shì)減弱。而CA

4、T活性隨時(shí)間的增長(zhǎng)而呈現(xiàn)出先增大再減小的變化趨勢(shì)，而且減小的趨勢(shì)越來(lái)越明顯。在含有苯酚的水體中，低濃度下，SOD和CAT的活性都隨時(shí)間的增長(zhǎng)而增強(qiáng)，并且隨著濃度的增大，變化趨勢(shì)也會(huì)變大。在含有雙酚A的水體中，SOD的活性隨著濃度的增大，時(shí)間的增長(zhǎng)，先下降再上升。而CAT的活性，隨時(shí)間的增長(zhǎng)而增強(qiáng)，并且隨著濃度的增大，變化趨勢(shì)也會(huì)變小。
　　分離純化斑馬魚體內(nèi)的蛋白質(zhì)，可獲得一種對(duì)抗生素敏感的氨肽酶。其純化倍數(shù)為1247，回收率為3