生物安全知識(shí)

1、生物安全,一、概念 防范、處理病原微生物及其毒素對(duì)人體危害的綜合性措施。二、核心 防感染、防擴(kuò)散。三、目標(biāo) 保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社會(huì)公眾和環(huán)境。,四、綜合性措施1. 微生物危害評(píng)估2. 安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝置3. 實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和建設(shè)要求4. 嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作規(guī)程,生物安全,微生物,微生物是存在于自然界的一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不見，必須藉助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)

2、千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。,微生物的分布,微生物在自然界的分布極為廣泛，其中以土壤中最多。在人類和動(dòng)、植物的體表，以及與外界相通的腔道中，亦有大量的微生物存在。,微生物與人類的關(guān)系,絕大多數(shù)微生物對(duì)人類和動(dòng)、植物是有益的,而且有些是必需的，如：固氮菌；釀酒、制醋；抗生素、人體的正常菌群。 有少數(shù)微生物能引起人類和動(dòng)、植物的病害，這些具有致病性的微生物稱為致病微生物或病原微生物。,病原微生物侵入機(jī)體后，生長、繁殖、

3、釋放毒性物質(zhì)等，引起機(jī)體不同程度的病理改變的過程，稱為感染或傳染。 細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體能否引起感染取決于兩方面的因素，一是機(jī)體的的免疫力，二是細(xì)菌的致病力，其結(jié)局根據(jù)病原菌和宿主兩方面力量強(qiáng)弱而定。,感染,一、根據(jù)感染的來源分類1. 外源性感染來自宿主體外的病原菌所引起的感染 傳染源：病人及帶菌者（為主） 患病及帶菌動(dòng)物 2. 內(nèi)源性感染 條件致病菌,感染的類型,二、

4、根據(jù)感染發(fā)生的地點(diǎn)分類1. 醫(yī)院內(nèi)感染2. 社會(huì)感染3. 實(shí)驗(yàn)室感染,感染的類型,感染的類型,三、根據(jù)感染的結(jié)果分類1. 隱性感染 當(dāng)宿主的抗感染免疫力較強(qiáng)，或入侵的病菌數(shù)量不多、毒力較弱，感染后對(duì)機(jī)體損害較輕，不出現(xiàn)或出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀。又稱亞臨床感染。,感染的類型,三、根據(jù)感染的結(jié)果分類2. 顯性感染 當(dāng)宿主體抗感染的免疫力較弱，或侵入的致病菌數(shù)量較多、毒力較強(qiáng)，

5、以致機(jī)體的組織細(xì)胞受到不同程度的損害，生理功能也發(fā)生改變，出現(xiàn)一系列的臨床癥狀和體征。又稱臨床感染。,感染的類型,三、根據(jù)感染的結(jié)果分類3. 帶菌狀態(tài) 有時(shí)致病菌在顯性或隱性感染后并未立即消失，在體內(nèi)繼續(xù)留存一定時(shí)間，與機(jī)體免疫力處于相對(duì)平衡狀態(tài)。 帶菌者—重要的傳染源。,感染途徑,1．呼吸道,如肺結(jié)核、百日咳,2．消化道,如傷寒、霍亂、食物中毒,3．皮膚粘膜,4. 血液；5. 經(jīng)節(jié)肢動(dòng)物媒

6、介；6. 性傳播,人，如破傷風(fēng)桿菌,傷口,，即糞—口途徑,實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染,感染來源培養(yǎng)物和儲(chǔ)存物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)本被上述內(nèi)容污染的物品,實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染,感染途徑 氣溶膠吸入感染皮膚、粘膜接觸感染 食入感染,實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染,導(dǎo)致感染最多的4種實(shí)驗(yàn)室事故溢出和潑灑針頭和注射器銳器、碎玻璃動(dòng)物的咬傷或抓傷,實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染,敏感宿主免疫系統(tǒng)疫苗接種狀況年齡 必須有錄用前或上崗前的體檢。記錄個(gè)人病

7、史，并進(jìn)行一次有目的的職業(yè)健康評(píng)估。根據(jù)需要提供主動(dòng)或被動(dòng)免疫。,實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染（事例）,1993年國內(nèi)某醫(yī)院報(bào)告225名醫(yī)院工作人員HBV檢測(cè)結(jié)果，醫(yī)生護(hù)士、檢驗(yàn)人員，其中檢驗(yàn)人員感染率最高，陽性率為81.2%。多為主觀估計(jì)錯(cuò)誤及操作失誤引發(fā)。2003年 新加坡、臺(tái)灣SARS實(shí)驗(yàn)室感染事件2004年 北京SARS實(shí)驗(yàn)室感染事件,通過微生物危害評(píng)估確定對(duì)象微生物應(yīng)在哪一級(jí)的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行操作；制定相應(yīng)的操作規(guī)程、實(shí)驗(yàn)室管理

8、制度和緊急事故處理辦法，必須形成書面文件并嚴(yán)格遵守執(zhí)行。,微生物危害評(píng)估,微生物的危害等級(jí),危害等級(jí)分類的依據(jù)病原微生物的毒力傳播方式和宿主范圍具有的有效預(yù)防措施具有的有效治療措施,微生物的危害等級(jí),微生物的危害等級(jí)（分為四個(gè)等級(jí)）,I級(jí)：個(gè)體和群體低危險(xiǎn) 是指在通常情況下不會(huì)引起人或者動(dòng)物疾病的微生物。如大腸桿菌、肺炎球菌等。,微生物的危害等級(jí),II級(jí)：中等個(gè)體危險(xiǎn)，有限群體危險(xiǎn) 能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但

9、一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。如沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、霍亂弧菌、乙型肝炎病毒、流感病毒、麻疹病毒等。,III級(jí)：高個(gè)體危險(xiǎn)，低群體危險(xiǎn) 能引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體。如炭疽桿菌、結(jié)核分枝桿菌、鼠疫桿菌、 HIV 、狂犬病病毒等。,

10、微生物的危害等級(jí),IV級(jí)：高度的個(gè)體和群體危險(xiǎn) 能引起人類或動(dòng)物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，或動(dòng)物與人，或人與動(dòng)物，或動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的病原體。如埃博拉病毒、拉薩病毒等。,微生物的危害等級(jí),實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分級(jí),一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL1或P1二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL2或P2三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL3或P3四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡稱BSL4或P4

11、 一級(jí)最低，四級(jí)最高。,實(shí)驗(yàn)室的分級(jí),1. 一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室適用于對(duì)健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。不需要生物安全柜開放實(shí)驗(yàn)臺(tái),2. 二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室適用于對(duì)人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物Ⅰ級(jí)生物安全柜、防護(hù)服、生物危害標(biāo)志開放實(shí)驗(yàn)臺(tái),實(shí)驗(yàn)室的分級(jí),3. 三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的

12、致病微生物及其毒素，通常已有預(yù)防傳染的疫苗。 HIV 的研究（血清學(xué)實(shí)驗(yàn)除外）應(yīng)在三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行Ⅱ級(jí)生物安全柜、特殊防護(hù)服、定向氣流（外界－HEPA－清潔區(qū)－半污染區(qū)－污染區(qū)－ HEPA－外界）、生物危害標(biāo)志,實(shí)驗(yàn)室的分級(jí),4. 四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 適用于對(duì)人體具有高度的危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。III級(jí)生物安全柜、正壓服、定向氣流（外界－HE

13、PA－清潔區(qū)－半污染區(qū)－污染區(qū)－ HEPA－外界）、 生物危害標(biāo)志外出淋浴、污染物特殊處理,實(shí)驗(yàn)室的分級(jí),安全設(shè)備,生物安全柜是最重要的安全設(shè)備，形成最主要的防護(hù)屏障。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按要求分別配備Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)生物安全柜，防護(hù)能力逐級(jí)提高。不得用超凈工作臺(tái)代替生物安全柜。,,超凈臺(tái),氣流從頂部或底部經(jīng)過過濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺(tái)面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒有循環(huán)氣流。超凈臺(tái)保護(hù)樣品不受污染，適用于普通實(shí)驗(yàn)室或1級(jí)生物安全水平中對(duì)人員

14、和環(huán)境無保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)。,Ⅰ級(jí)生物安全柜,只提供對(duì)操作者的保護(hù)，不對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行保護(hù)。氣流從操作員處流入柜體高效空氣過濾器（High efficiency particulate air Filter，HEPA）過濾的氣體排放到環(huán)境中。,對(duì)操作員和產(chǎn)品進(jìn)行保護(hù)氣流從操作人員處流入安全柜中HEPA過濾后的氣體排放到環(huán)境中,Ⅱ級(jí)生物安全柜,A 用于連接等臂長手套的艙孔B 窗口C 兩個(gè)排風(fēng)HEPA 過濾器D 送風(fēng)HEPA 過

15、濾器E 雙開門高壓滅菌器或傳遞箱F 化學(xué)浸泡槽,Ⅲ級(jí)生物安全柜（手套箱）,實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服面部防護(hù)手套呼吸防護(hù),個(gè)人生物安全防護(hù)裝備,個(gè)人生物安全防護(hù)1. 在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，任何時(shí)候都必須穿著工作服、隔離服、連體衣或正壓服。,2. 在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。3. 在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)

16、先消毒再摘除，隨后必須洗手。,個(gè)人生物安全防護(hù),4. 為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。5. 嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開實(shí)驗(yàn)室（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間）6. 不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋子,個(gè)人生物安全防護(hù),廢棄物處置 1. 所有棄置的實(shí)驗(yàn)室生物樣本、培養(yǎng)物和被污染的廢棄物在從實(shí)驗(yàn)室中取走之前，應(yīng)使其達(dá)到生物學(xué)安全。

17、2. 生物學(xué)安全可通過高壓蒸汽滅菌或其他被承認(rèn)的技術(shù)達(dá)到。,廢棄物處置 3. 可重復(fù)使用的物品和污染的器具應(yīng)置于裝有次氯酸鈉1:10稀釋液或其他合適的消毒劑的不銹鋼容器內(nèi)，然后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌、清洗和再次滅菌。4. 實(shí)驗(yàn)室廢棄物應(yīng)置于適當(dāng)?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。運(yùn)輸感染性物質(zhì)時(shí)，應(yīng)使用金屬的或塑料材質(zhì)的二層容器。,消毒 利用理化因素殺死物體或環(huán)境中病原微生物的措施。并不一定能殺死

18、含芽胞的細(xì)菌或非病原微生物。滅菌 利用理化因素殺死物體上所有微生物的過程，包括芽胞。,消毒與滅菌,防腐 防止或抑制細(xì)菌生長繁殖的方法清潔 通過除去塵埃和污穢減少微生物數(shù)量無菌 不存在任何活菌，是滅菌的結(jié)果。無菌操作 防止細(xì)菌進(jìn)入人體或物品的操作技術(shù),消毒與滅菌,1. 高壓蒸氣滅菌法 高壓蒸氣滅菌器是一個(gè)密閉、耐高壓蒸鍋。

19、103.4kPa（1.05kg/cm2）溫度可達(dá)121.3ºC，15~20min，可殺滅包括細(xì)菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。,一、濕熱滅菌法,2. 煮沸法 100ºC，5min 殺死細(xì)菌繁殖體100ºC，1~2h 殺滅細(xì)菌芽胞加入2%碳酸鈉 沸點(diǎn)為105℃，防金屬物品生銹。,3. 間歇蒸氣滅菌法 利用反復(fù)多次的流動(dòng)熱蒸氣間歇加熱以達(dá)到滅菌的目的。100ºC，15~30min，37

20、ºC孵箱過夜×3次適用于一些不耐熱的含糖、牛奶等培養(yǎng)基。,二、干熱滅菌法 1. 焚燒 用于廢棄物品或動(dòng)物尸體等2. 燒灼 用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的接種環(huán)、 試管口等的滅菌。,3. 干烤 利用干烤箱滅菌（160~170ºC，2h） 適用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品。,三、紫外線 波長240~3

21、00nm的紫外線具有殺菌作用，其中以260~266nm最強(qiáng)。特點(diǎn)： 紫外線穿透力較弱；對(duì)人體皮膚、眼睛有損傷作用。用途： 一般只用于手術(shù)室等的空氣消毒，或用于不耐熱物品的表面消毒。,四、化學(xué)消毒滅菌法,（一）高效消毒劑 1.含氯消毒劑；2.過氧化物消毒劑； 3.醛類消毒劑；4.環(huán)氧乙烷（二）中效消毒劑 1.含碘消毒劑；2.醇類消毒劑（三）

22、低效消毒劑 1.季銨鹽類；2.氯已定；3.高錳酸鉀,五、室內(nèi)空氣的消毒1. 自然通風(fēng)2. 紫外線燈照射3. 化學(xué)消毒法 （1） 15％過氧乙酸加熱熏蒸或0.5%過氧 乙酸噴霧（2） 3%過氧化氫噴霧4. 濾過除菌,六、手和皮膚的消毒 一般應(yīng)用肥皂刷洗，流水沖凈，可消除手上絕大部分甚至全部細(xì)菌。當(dāng)被病原微生物污染時(shí)，一般常用的消毒劑包括75%乙醇擦手或用0.2～0.5‰洗

23、必泰 、0.1%新潔爾滅、0.5～1‰過氧乙酸 、3～5%來蘇浸泡 5～10分鐘 。,實(shí)驗(yàn)室基本管理,1. 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的準(zhǔn)入 （1）非實(shí)驗(yàn)有關(guān)人員和物品不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室； （2）在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得進(jìn)食和飲水，或者進(jìn)行其他與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動(dòng)； （3）實(shí)驗(yàn)室工作人員、外來合作者、進(jìn)修和學(xué)習(xí)人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室及其崗位之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室主任的批準(zhǔn)。,在二級(jí)以上的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的入口明顯位置處必須貼生物危害警告標(biāo)志，并標(biāo)明級(jí)別。,實(shí)驗(yàn)室基本管理,

24、2. 實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格和培訓(xùn) （1）實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須是受過專業(yè)教育的技術(shù)人員。在獨(dú)立進(jìn)行工作前還需在中高級(jí)實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行上崗培訓(xùn)，達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)，方可開始工作。 （2）實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須被告知實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)并接受實(shí)驗(yàn)室安全教育，自愿從事實(shí)驗(yàn)室工作。,實(shí)驗(yàn)室基本管理,2. 實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格和培訓(xùn) （3）實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程。 （4）三級(jí)和四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的工作

25、人員在開始工作前必須留本底血清進(jìn)行有關(guān)檢測(cè)，以后定期復(fù)檢。如有疫苗必須進(jìn)行免疫注射。,感染性材料灑溢處理的一般原則1. 戴手套和防護(hù)服2. 用布覆蓋3. 倒消毒劑處理半小時(shí)以上 4. 再次消毒、洗凈或擦凈。5. 污染材料放置在廢棄物處理容器中，并通知有關(guān)部門。,應(yīng)急預(yù)案 實(shí)驗(yàn)室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時(shí)，預(yù)防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實(shí)驗(yàn)室或可能造成病原微生物擴(kuò)散的場(chǎng)所；②開展流行病學(xué)調(diào)查