茶籽油的鑒別與定量測定

1、<p>　　茶籽油的鑒別與定量測定</p><p>　　摘要：本研究在茶籽油與醋酸酐―濃硫酸的顯色反應(yīng)基礎(chǔ)上，對影響茶籽油定量分析的有關(guān)條件進(jìn)行研究，結(jié)果表明：當(dāng)醋酸酐用量為 1.0 mL，二氯甲烷 1.50 mL，濃硫酸 0.20 mL，冰水浴放置時(shí)間為5 min，無水乙醚溫度在10℃左右時(shí)，茶籽油與醋酸酐一濃硫酸形成的有色絡(luò)合物的最大吸收波長為 530 nm，純茶籽油含量在 0～ 0.50 g/mL

2、范圍內(nèi)符合朗伯――比耳定律。 </p><p>　　關(guān)鍵詞：茶籽油 鑒別 醋酸酐 定量測定 </p><p><b>　　1、前言 </b></p><p>　　茶籽油是一種營養(yǎng)價(jià)值高、具有一定的保健功能的木本植物食用油。它的物理、化學(xué)特性與橄欖油相似，茶籽油中富含油酸，易于人體消化吸收，茶籽油可潤腸清胃、殺菌解毒、是一種理想食用營養(yǎng)油脂，并受

3、到大多數(shù)人的喜愛。 </p><p>　　由于茶籽油價(jià)格高，一些廠家和經(jīng)銷商在茶籽油中摻入其他植物油，冒充純茶籽油出售牟取暴利。但目前還沒有一種準(zhǔn)確測定茶籽油含量的方法。因此有必要研究一種測定茶籽油實(shí)際含量的有效方法。鑒于此，筆者查閱了有關(guān)資料：得知用茶籽油與醋酸酐-濃硫酸的顯色反應(yīng)對茶籽油進(jìn)行定量測定是一種較好的方法，此方法先通過單因素試驗(yàn)確定茶籽油定量測定的條件試驗(yàn)，再通過摻雜試驗(yàn)和樣品中添加純茶籽油的回收試

4、驗(yàn)進(jìn)行分析驗(yàn)證，從而得出茶籽油的定量測定的最佳試驗(yàn)條件。該試驗(yàn)方法能夠簡便、快捷的測定出茶籽油的實(shí)際含量?？梢苑乐挂恍┎环◤S商為了謀取利益在茶籽油中添加其他植物油，從而維護(hù)消費(fèi)者權(quán)益，所以此項(xiàng)研究意義非常重大。 </p><p><b>　　2、材料與方法 </b></p><p>　　2.1 材料、儀器與試劑 </p><p>　　2.1.1

5、 試驗(yàn)材料 </p><p>　　菜籽油，大豆油和芝麻油 </p><p>　　2.1.2 儀器與設(shè)備 </p><p><b>　　2.1.3 試劑 </b></p><p><b>　　2.2 試驗(yàn)方法 </b></p><p>　　2.2.1 預(yù)測定 </p>

6、;<p>　　參照油茶籽油的定性方法（糧油標(biāo)準(zhǔn)匯編中），吸取純茶籽油0.25 mL于10mL刻度試管中，加入0.80 mL醋酸酐，1.50 mL二氯甲烷，搖勻后放置于冰水浴中冷卻，然后滴入0.20 mL濃硫酸，蓋塞后搖勻再放入冰水浴中，5 min后加入無水乙醚至10 mL刻度，搖勻后觀察。 </p><p>　　2.2.2 最大吸收波長的確定 </p><p>　　吸取 0.

7、20 mL純茶籽油，按照預(yù)測定方法搖勻顯色后立即在7230G分光光度計(jì)上測得吸光度值，記錄不同波長的吸光度，繪制茶籽油吸光度―波長曲線。 </p><p>　　2.2.3 醋酸酐用量的確定 </p><p>　　分別吸取 0.20 mL純茶籽油于5支10 mL具塞刻度試管內(nèi)，各加入0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，1.25 mL，1.50 mL，1.75mL醋酸酐，以下操作步

8、驟同預(yù)測定法。搖勻顯色后，立即在7230G分光光度計(jì)上，用 1 cm比色皿，以劑空白調(diào)零，在530nm處測得吸光度值。繪制醋酸酐用量―吸光度曲線。 </p><p>　　2.2.4 濃硫酸用量的確定 </p><p>　　分別吸取 0.20 mL純茶籽油于5支10mL具塞刻度試管中，各加入 1.0 mL醋酸酐 ，1.50 mL二氯甲烷 ，搖勻后置冰水浴中，再分別加入 0.10 mL，0.1

9、5 mL，0.20 mL，0.25 mL，0.30 mL濃硫酸 ，放置 5 min 后依次取出加無水乙醚至刻度 ，搖勻顯色后立即在 7230G分光光度計(jì)上 ，用 1 cm比色皿 ，以試劑空白調(diào)零 ，于530nm處比色測定吸光度值。繪制濃硫酸用量―吸光度曲線。 </p><p>　　2.2.5 縮合時(shí)間與吸光度的關(guān)系 </p><p>　　各吸取0.20 mL純茶籽油于10 mL刻度試管中，

10、加入 1.0 mL醋酸酐，1.5 mL二氯甲烷和 0.2 mL濃硫酸，置冰水浴中靜置 1 min，2 min，3 min，4min，5 min，6 min，7min后依次取出 ，再加入無水乙醚至10 mL刻度，搖勻顯色后立即在 7230G分光光度計(jì)上 ，用 1 cm比色皿 ，以試劑空白調(diào)零 ，于530nm處比色測定得吸光度值 。繪制縮合時(shí)間―吸光度曲線。 </p><p>　　2.2.6 無水乙醚溫度對顯色穩(wěn)定性

11、的影響 </p><p>　　將無水乙醚盛于密閉容器中，置水浴中冷卻或升溫至一定溫度 。吸取0.20 mL純茶籽油于各刻度試管中，分別加入1.0 mL醋酸酐，1.5 mL二氯甲烷，搖勻后置冰水浴中冷卻，滴入 0.20 mL濃硫酸，放置 5 min 后，再分別用5℃、10℃、20℃、30℃無水乙醚定容至刻度，分別搖勻后在7230G分光光度計(jì)上，用 1 cm比色皿，以試劑空白調(diào)零，于530nm比色測定吸光度值。繪制無

12、水乙醚溫度對顯色穩(wěn)定性的影響曲線。 </p><p>　　2.2.7 其他植物油的顯色反應(yīng) </p><p>　　參照植物油定性試驗(yàn)，分別吸取各種植物油 0.25 mL于 10 mL刻度試管中，再分別加入1.00 mL醋酸酐，1.50 mL二氯甲烷，搖勻后放置于冰水浴中冷卻，然后滴入0.20 mL濃硫酸，蓋塞后搖勻再放入冰水浴中，5 min后加入無水乙醚至10 mL刻度，搖勻后觀察顯色液的

13、顏色變化。 </p><p>　　2.2.8 茶籽油標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 </p><p>　　綜合條件試驗(yàn)結(jié)果，得出茶籽油標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作步驟：精確吸取純茶籽油0.0 mL，0.05 mL，0.10 mL， 0.20 mL，0.30 mL，0.40 mL，0.50 mL于10 mL具塞刻度試管中，分別加入1.0 mL醋酸酐，1.5 mL二氯甲烷，搖勻后置冰水浴中冷卻，滴加 0.20 mL濃硫酸，

14、搖勻在冰水浴中放置5 min后 ，加入無水乙醚至刻度 ，搖勻，放置1.5-1.8 min，在7230G分光光度計(jì)上 ，波長530nm處 ，用1cm比色皿 ，以試劑空白調(diào)零，迅速讀取吸光度值。記錄繪制茶籽油標(biāo)準(zhǔn)曲線。 </p><p>　　2.2.9 摻雜試驗(yàn) </p><p>　　由于茶籽油產(chǎn)量低、生產(chǎn)規(guī)模小、價(jià)格非常昂貴，因此像菜籽油、大豆油、花生油等這些產(chǎn)量高、價(jià)格又相對便宜的植物油常

15、常被摻入茶籽油中。為此，我們用這三種植物油做摻雜試驗(yàn)。 　　2.2.10 樣品中添加純茶籽油的回收試驗(yàn) </p><p>　　將純茶籽油當(dāng)作標(biāo)準(zhǔn)樣品添加到其他植物油中，按照純茶籽油標(biāo)準(zhǔn)曲線法操作，用7230G可見光光度計(jì)在530nm處測得混合油的吸光度，根據(jù)吸光度計(jì)算出混合油中純茶籽油含量。 </p><p>　　2.2.11 樣品測定 </p><p>　　由于

16、各地氣候、水土條件的不一樣，因此茶籽油的成分也會(huì)有所不同，為了能夠提高試驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和準(zhǔn)確性，我們選用了不同產(chǎn)地的純茶籽油進(jìn)行測定。 </p><p>　　精確稱取茶籽油樣品各0.20ml于10mL具塞刻度試管中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線法的操作，搖勻后放置1.5-1.8min，在7230G分光光度計(jì)上，波長530nm處，用1cm比色皿，以試劑空白調(diào)零，迅速讀取吸光度值。 </p><p><

17、b>　　3、結(jié)果與討論 </b></p><p>　　3.1 茶籽油試液色澤的變化規(guī)律 </p><p>　　試液色澤的變化規(guī)律是：褐綠色→棕紅色→玫瑰紅→淺玫瑰紅→淺棕色→淡褐綠色。 </p><p>　　3.2 最大吸收波長的確定 </p><p>　　從圖1可以得出，茶籽油與醋酸酐-濃硫酸形成的有色絡(luò)合物在波長530n

18、m處吸光度值最大。 </p><p>　　3.3 醋酸酐用量的確定 </p><p>　　從圖2中顯示：當(dāng)醋酸酐用量為1.00mL時(shí)茶籽油與醋酸酐-濃硫酸形成的有色絡(luò)合物的吸光度最大。 </p><p>　　3.4 濃硫酸用量的確定 </p><p>　　從圖3顯示可知 ，濃硫酸用量為 0.20 mL時(shí)茶籽油與醋酸酐-濃硫酸形成的有色絡(luò)合物的

19、吸光度值最大且達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。 </p><p>　　3.5 縮合時(shí)間與吸光度的關(guān)系 </p><p>　　圖4中結(jié)果顯示：將試液放置冰水浴中5 min后茶籽油與醋酸酐-濃硫酸形成的有色絡(luò)合物的吸光度達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。 </p><p>　　3.6 無水乙醚溫度對顯色穩(wěn)定性的影響 </p><p>　　圖5中顯示：當(dāng)無水乙醚溫度為5～10℃時(shí)茶籽油

20、與醋酸酐一濃硫酸形成的有色絡(luò)合物的的吸光度變化較緩慢， 20～30℃時(shí)吸光度曲線迅速下降。從而得知，無水乙醚溫度對茶籽油與醋酸酐―濃硫酸形成的絡(luò)合物有一定影響。 </p><p>　　3.7 其他植物油的顯色變化規(guī)律 </p><p>　　參照植物油脂定性試驗(yàn)，其它幾種植物油的顯色情況如下表： </p><p>　　從上面列表中可以看出：不同種植物油通過定性顯色試驗(yàn)

21、，加入無水乙醚后的顏色變化均不相同（茶籽油和油茶籽油除外）。 </p><p>　　3.8 茶籽油標(biāo)準(zhǔn)曲線 </p><p>　　測得的吸光度值為： 0.0，0.364，0.701，1.319，1.824，2.286，2.699。經(jīng)計(jì)算得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y =6.6028x + 0.0411，相關(guān)系數(shù) r = 0.9967，r0.05= 0.754， r > r0.05，證明回歸曲線相

22、關(guān)好。 </p><p><b>　　3.9摻雜試驗(yàn) </b></p><p>　　摻入菜籽油、大豆油、花生油后的吸光度變化情況見圖 7、圖 8、圖 9。 </p><p>　　3.10 樣品中添加純茶籽油的回收試驗(yàn) </p><p>　　將純茶籽油當(dāng)作標(biāo)準(zhǔn)樣品添加到其他植物油中，測得回收率。結(jié)果如下： </p&g

23、t;<p>　　從表2中可以得出，樣品中添加純茶籽油測得的回收率平均值為97.92%，所以用該方法對茶籽油定量測定是一種較好的測量方法。 </p><p>　　3.11 樣品測定結(jié)果 </p><p>　　不同產(chǎn)地的純茶籽油進(jìn)行測定結(jié)果如下： </p><p>　　從表3中可以看出，不同產(chǎn)地的純茶籽油與醋酸酐―濃硫酸形成的有色絡(luò)合物的吸光度值差別并不是