中藥學(xué)畢業(yè)論文(含文獻綜述)復(fù)方黑面神軟膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文</b></p><p><b>　　（20 屆）</b></p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級 中藥學(xué)(中藥分析與鑒定方向)

2、 </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號 </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p><b>　　誠 信 聲 明</b></p&g

3、t;<p>　　我聲明，所呈交的畢業(yè)論文是本人在老師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我查證，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。我承諾，論文中的所有內(nèi)容均真實、可信。</p><p>　　畢業(yè)論文作者（簽名）： </p><p>　　年

4、 月 日</p><p><b>　　目 錄</b></p><p><b>　　摘要Ⅰ-Ⅱ</b></p><p><b>　　1 前言1</b></p><p>　　2 材料與儀器2</p><p><b>　　

5、2.1 儀器2</b></p><p><b>　　2.2 試藥2</b></p><p><b>　　3 方法3</b></p><p><b>　　3.1定性鑒別3</b></p><p><b>　　3.2含量測定9</b>&l

6、t;/p><p><b>　　4 討論17</b></p><p>　　4.1 定性鑒別結(jié)果17</p><p>　　4.2 定量鑒別結(jié)果17</p><p><b>　　5 結(jié)論18</b></p><p><b>　　參考文獻19</b><

7、;/p><p><b>　　綜 述21</b></p><p><b>　　致 謝29</b></p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究</p><p>　　摘要：目的 提高復(fù)方黑面神軟膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 采用薄層色譜鑒別法對成分中的當(dāng)黑面神、苦參、蛇床子、白鮮皮、地膚子進行定性鑒別，用高

8、效液相色譜法測定黑面神中表兒茶素和苦參中苦參堿的含量。結(jié)果 在選定的薄層色譜條件下,色譜斑點清楚,分離效果好,無干擾；表兒茶素含量在0.0084～0.0336g·l-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=1.000,測定的平均回收率為97.7%，RSD1.4%（n=6）；苦參堿含量在0.0147～0.0588g·l-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=0.999,測定的平均回收率為97.6%，RSD1.5%（n=6）。結(jié)論 建立的

9、定性、定量方法較簡便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好。</p><p>　　關(guān)鍵詞：復(fù)方黑面神軟膏；薄層鑒別；高效液相色譜法</p><p>　　Study on the quality standards of compound Breynia fruticosa ointment</p><p>　　Abstract: Objective: To improve the

10、quality standards of compound Breynia fruticosa ointment. Methods: The Breynia fruticosa, Sophora flavescens,Fructus Cnidii, CORTEX DICTAMNI and Fructus Kochiae Scopariae radix were qualitatively identified by TLC. The c

11、ontent of L-Epicatechin in Breynia fruticosa and the content of matrine in Sophora flaves cens were determined byusing HPLC. Results: The spots on TLC plates were clear without interference in the blank reference.t The

12、linearity range of Epica</p><p>　　Keywords：Compound Breynia fruticosa Ointment，TLC，HPLC</p><p><b>　　1 前言</b></p><p>　　隨著社會的發(fā)展進步，大氣環(huán)境、工業(yè)污染等多種因素的影響，導(dǎo)致人類皮膚病的患病率逐漸升高，所以關(guān)于其用藥

13、情況也在逐漸受到人們的關(guān)注。我們國家中醫(yī)藥里對皮膚病有著很多豐富的治療經(jīng)驗和文字記載?！陡＝ㄋ幬镏尽吩唬骸昂诿嫔袢~，百部各60g。水煎沖明礬適量，洗患處治漆過敏，濕疹；黑面神鮮葉適量，搗爛絞汁，調(diào)雄黃末涂患處治帶狀皰疹?！薄度珖胁菟巺R編》曰：“黑面葉適量，煮水坐盆或陰道沖洗，每日1次，治陰道炎、外陰瘙癢?！?lt;/p><p>　　在現(xiàn)代臨床應(yīng)用中，神礬散（黑面神100g、白礬30g）祛風(fēng)清熱、消腫解毒、燥濕止癢，

14、用于治療接觸性皮炎、皮膚瘙癢、濕疹等皮膚病[1]。劉仲霞等[2]運用懸液定量殺菌試驗方法對四種抗菌洗液殺菌效果進行隨機抽樣檢測，結(jié)果顯示，純中草藥制劑舒斂爽抗菌洗液（由黑面神、百部、荊芥、苦參、蛇床子、防風(fēng)、地膚子和梔子組成）作用于金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和淋病球菌5min，殺菌率可達100%。林挺等人[3]對醋酸去炎松霜與中藥三七洗劑（黑面神、苦參、七大姑、蛇床子、野菊花、三亞苦、荊芥各30g，白鮮皮20g，布渣葉6g）治療嬰兒急性濕

15、疹的療效進行了對比研究，證實中藥三七洗劑治療嬰兒急性濕疹效果顯著。李東海等人[4]運用復(fù)方二藤洗劑（由黑面神、虎杖、三亞苦、大飛楊、忍冬藤、南蛇藤等組成）外洗治療掌跖膿皰病38例。</p><p>　　廣東省由于所處的地理位置和氣候適合各類病菌的生存和繁衍，因此會成為多類皮膚病高發(fā)區(qū)。作為皮膚病高發(fā)的地域，在長期和皮膚病斗爭的過程中，廣東民間傳統(tǒng)中醫(yī)積累了大量寶貴經(jīng)驗。很多中藥處方在防治皮膚病的過程中發(fā)揮了重要作

16、用。如90年代運用自擬處方（黑面神、蛇床子、三亞苦、苦參、七大姑、荊芥、野菊花等各30g，白蘚皮20g，布渣葉6g）醫(yī)治面部激素依賴性皮炎，每次水煎煮后外洗，每日3~4次。結(jié)果顯示，與對照組相比較療效明顯增強。</p><p>　　近幾年來廣東地區(qū)皮膚病患者的人數(shù)在逐年增多，皮膚病的主要用藥如抗病毒藥、抗真菌藥、抗變態(tài)反應(yīng)藥等具有較顯著的副作用。中藥在變應(yīng)性接觸性皮炎的治療中顯示出一定優(yōu)勢。但價格低廉、含中藥有效

17、成分的皮膚外用藥種類卻很少。因此開發(fā)出使用方便、安全有效且價格便宜的中藥制劑有著迫切的市場需求。</p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏由黑面神、苦參、蛇床子、白鮮皮和五味子五味中藥組成，具有消炎和止癢的功效，對各類皮膚病有較好的治療作用。本課題的前期藥理實驗已證實[5]，君藥黑面神全株水提液具有顯著的抗炎止癢作用、免疫抑制作用、抗皮膚Ⅰ型超敏反應(yīng)作用。</p><p>　　為了較好地控制復(fù)方

18、黑面神軟膏的質(zhì)量，文中對成品中黑面神等每味藥進</p><p>　　行薄層色譜鑒別，并建立HPLC法測定成品君藥黑面神中表兒茶素和臣藥苦參中</p><p>　　苦參堿的含量,方法簡便，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好。所探索的技術(shù)路線符合現(xiàn)代技術(shù)要求，可為黑面神其他劑型的開發(fā)研究提供借鑒。</p><p><b>　　2 材料與儀器</b></p&

19、gt;<p><b>　　2.1 儀器</b></p><p>　　Agilent 1100 series高效液相色譜儀；BS224S型電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司 d=0.0001g）；jj200型電子天平（常熟市雙杰測試儀廠）；電子JA-1203天平（上海天平儀器廠 d=0.001g）；DK-8D電熱恒溫三孔水槽（上海躍進醫(yī)療械器有限公司）；UV-2550型紫外-

20、可見分光光度儀（日本島津）；KQ3200E醫(yī)用超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；HH-S4數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市醫(yī)療儀器廠）；RE-2000B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水真空泵（鞏義市英峪華中儀器廠）；東方一A型直熱式電熱恒溫干燥箱（廣州東方電熱干燥設(shè)備廠）；Good see-Ⅰ薄層色譜攝影儀（上?？普苌萍加邢薰荆?。</p><p><b>　　2.2 試藥<

21、/b></p><p>　　黑面神枝葉購自廣州至信藥業(yè)有限公司，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)生鑒定教研室黃海波教授鑒定為大戟科黑面神屬植物Breynia fruticosa(L.)Hook.f.的干燥嫩枝葉，表兒茶素對照品（批號：110878-200102),苦參堿對照品（批號：0805-9804），苦參對照藥材（批號：121019-201407），蛇床子對照品（批號：110822-200305），蛇床子對照藥藥材（批

22、號：121030-200405），白鮮皮對照藥材（批號：978-9301）地膚子對照藥材（批號：121148-200803）均為中國藥品生物制品檢定所提供。甲醇，色譜純；水為屈臣氏蒸餾水,磷酸為分析純。</p><p><b>　　3 方法</b></p><p><b>　　3.1定性鑒別</b></p><p>　?。?/p>

23、1）稱取復(fù)方黑面神軟膏5g，再加甲醇20mL,放置1h,濾過,濾液濃縮至5mL,作為黑面神供試品溶液。另外取黑面神對照藥材同法制成對照藥材溶液以及同法制成陰性樣品溶液。再取表兒茶素對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液，最后吸取上述四種溶液各10μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（1:2:0.2:0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以25%磷鉬酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點顯色清晰。供試

24、品溶液在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性樣品無干擾。</p><p>　?。?）稱取復(fù)方黑面神軟膏5g，加濃氨試液0.3mL，加三氯甲烷25mL，加熱回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1mL溶解，作為苦參供試品溶液；另取苦參對照藥材同法制成對照藥材溶液，再取與供試品相應(yīng)量的苦參陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。最后取苦參對照品適量，加乙醇制成0.2mg/mL的溶

25、液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年一部附錄VIB）試驗，吸取上述溶液各4μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-氨水（5.2:0.7:0.6）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良的碘化鉍鉀試液，熱風(fēng)吹干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同的橙色斑點。 </p><p>　?。?）稱取復(fù)方黑面神軟膏3g，加乙醇50mL超聲處理5分鐘，放置，取上清液作為供試品溶液，另取蛇

26、床子對照藥材4g加水100mL煮沸30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇5mL同法制成對照藥材溶液，再取與供試品相應(yīng)量的蛇床子陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液，最后取蛇床子對照品溶液，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB）試驗，吸取上述四種溶液各6uL分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-正己烷(3:3:2)為展開劑，展開，取

27、出，晾干，置紫外燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾。</p><p>　?。?）稱取復(fù)方黑面神軟膏4g，加甲醇30mL超聲處理20min，濾過，濾液加中性氧化鋁（100-200目）1.5g振搖2min濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液，取與供試品相應(yīng)量的白鮮皮陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液，另取

28、白鮮皮對照藥材1g加水40mL煮沸并保持微沸30min脫脂棉濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2mL使溶解作為對照藥材溶液，取上述3種溶液各5μL分別點于同一用0.5%氫氧化鈉溶液制成的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-濃氨水（20:20:1）的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，以10%的硫酸乙醇溶液顯色，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾。</p><p&g

29、t;　　（5）稱取復(fù)方黑面神軟膏5g，加乙醇40mL，鹽酸3mL，加熱回流2h，靜置，傾出上清液，清液濃縮至約5mL，加水20mL，混勻，置分液漏斗中，加石油醚（60-90℃）振搖提取2次，每次約20mL，合并醚液，蒸干，殘渣加乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取地膚子對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液，再取與供試品相應(yīng)量的地膚子陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。照薄層層析法（《中華人民共和國藥典》2010年版1部附錄

30、VI B）試驗，吸取上述3種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿（20:8:5）為展開劑，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。</p><p>　　3.1.1 黑面神的薄層鑒別</p><p>　　參照金芥麥配方顆粒的質(zhì)量[8]進行方法的建立。本次將展開劑定為

31、甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（1:2:0.2:0.1），顯色劑為25%磷鉬酸乙醇溶液并與顯色劑用10%硫酸乙醇作比較。供試品按上述方法處理展開顯色后，薄層色譜中供試品與表兒茶素對照品特征成分斑點對應(yīng)性好，斑點所得Rf值適中，斑點清晰。陰性樣品在薄層色譜中，在與對照藥材和樣品的色譜相應(yīng)的位置上無干擾。</p><p>　　對在不同溫度、濕度和顯色劑條件下展開的層析效果進行比較，結(jié)果表明對薄層色譜效果影響不大。薄層色譜

32、圖見圖1~4。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>　　圖1 黑面神薄層鑒別色譜圖 圖2 黑面神薄層鑒別色譜圖</p><p>　?。?5%磷鉬酸乙醇，T=23℃,RH=56%）

33、 （10%硫酸乙醇，T=23℃,RH=56%）</p><p>　　樣品：1.表兒茶素對照品； 2.黑面神對照藥材； 3-5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺黑面神陰性樣品溶液</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3

34、 4 5 6 </p><p>　　圖3 黑面神薄層鑒別色譜圖 圖4 黑面神薄層色譜鑒別圖</p><p>　?。?5%磷鉬酸乙醇，T=23℃，RH=38%） （25%磷鉬酸乙醇，T=16℃，RH=56%)</p><p>　　樣品：1.表兒茶素對照品； 2.黑面神對照藥材； 3-

35、5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺黑面神陰性樣品溶液</p><p>　　圖1,2為不同顯色劑下的黑面神薄層鑒別；圖1,3,4為對樣品進行方法學(xué)考察。由圖1,2對比可得，樣品在10%硫酸乙醇下顯色的斑點相比較而言較不明顯，而在不同溫度和濕度的差別性不大。</p><p>　　3.1.2 苦參的薄層鑒別</p><p>　　在本次薄層

36、色譜中。展開劑定為乙酸乙酯-乙醇-氨水（5.2:0.7:0.6），顯色劑為改良碘化鉍鉀和碘化鉍鉀試液作比較。按正文方法處理后，供試品色譜中，供試品與苦參堿對照品顯相同染色的斑點且對應(yīng)性好，斑點Rf值較好。陰性樣品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上無干擾。薄層色譜圖見圖5~6。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2

37、 3 4 5 6 </p><p>　　圖5苦參薄層鑒別色譜圖 圖6 苦參薄層鑒別色譜圖</p><p>　?。ǜ牧嫉饣G鉀試液，T=18℃,RH=65%） （碘化鉍鉀試液，T=18℃,RH=65%）</p><p>　　樣品：1.苦參堿對照品； 2.苦參對

38、照藥材； 3-5.供試品溶液； </p><p>　　6.缺苦參陰性樣品溶液</p><p>　　圖5,6為苦參在不同顯色劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對照品相應(yīng)位置上的斑點均清晰，差別性不大，對比兩種顯色劑下的結(jié)果，碘化鉍鉀試液顯色的薄層相比于改良碘化鉍鉀試液顯色的薄層中，有一個斑點缺失，可能是由于此斑點顏色過淺，被碘化鉍鉀顏色掩蓋，總體影響不大。</p><

39、p>　　3.1.3 蛇床子的薄層鑒別</p><p>　　參照《中國藥典》2010年版一部[9]進行方法的建立，其中將展開劑訂為甲苯-乙酸乙酯-正己烷(3:3:2)，然后按正文方法對樣品進行處理，展開后，色譜圖中供試品斑點與對照品斑點對應(yīng)清晰，且斑點Rf值較好。而陰性液相色譜中，在與供試品和對照品相應(yīng)的位置上無干擾。</p><p>　　對在不同溫度、濕度和顯色劑條件下展開的層析效果

40、進行比較，結(jié)果表明對薄層色譜效果影響不大。薄層色譜圖見圖7~9。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>　　圖7蛇床子薄層鑒別色譜圖 圖8 蛇床子薄層鑒別色譜圖</p><p>　　（紫

41、外線365nm下，T=22℃,RH=49%） （紫外線365nm下，T=17℃,RH=49%）</p><p>　　樣品：1.蛇床子素對照品； 2.蛇床子對照藥材； 3-5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺蛇床子陰性樣品溶液</p><p>　　1 2 3 4 5 6</p><p&g

42、t;　　圖9蛇床子薄層鑒別色譜圖</p><p>　?。ㄗ贤饩€365nm下，T=22℃,RH=63%）</p><p>　　樣品：1.蛇床子素對照品； 2.蛇床子對照藥材； 3-5.供試品溶液；</p><p>　　6.缺蛇床子陰性樣品溶液</p><p>　　圖7~9為蛇床子樣品在不同顯色劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對照品相應(yīng)位置上

43、的斑點均清晰，差別性不大，對在不同溫度、濕度和顯色劑條件下展開的層析效果進行比較，結(jié)果表明對薄層色譜效果影響不大。</p><p>　　3.1.4 白鮮皮的薄層鑒別</p><p>　　參照白山片的薄層色譜鑒別方法[10]研究進行方法的建立。本次對比展開劑環(huán)己烷-丙酮-濃氨水（20:20:1）的上層液與展開劑石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯（10:1）的展開效果，顯色劑為10%的硫酸乙醇溶

44、液顯色。供試品按上述方法處理展開顯色后，薄層色譜中供試品與對照藥材特征成分斑點對應(yīng)性較好，斑點所得Rf值適中，斑點清晰。陰性樣品在薄層色譜中，在與對照藥材和樣品的色譜相應(yīng)的位置上無干擾。如圖10~11。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p

45、>　　圖10 色譜圖（環(huán)己烷-丙酮-濃氨水） 圖11 色譜圖（石油醚-乙酸乙酯）</p><p>　　（10%硫酸乙醇，T=21℃，RH=57% ） （10%硫酸乙醇，T=21℃，RH=57%）</p><p>　　樣品：1-2.白鮮皮對照藥材； 3-4.供試品溶液； 5-6.缺白鮮皮陰性樣品溶液</p><p>　　圖10~1

46、1為白鮮皮樣品在不同展開劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對照品的斑點均能較好的對應(yīng)上，差別性不大，但在環(huán)己烷-丙酮-濃氨水下展開得到的斑點較為清晰。 </p><p>　　3.1.5 地膚子的薄層鑒別</p><p>　　參照歸芍止癢顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[11]進行方法的建立。本次將展開劑定為環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿（20:8:5），顯色劑為磷鉬酸試液并與顯色劑用10%硫酸乙醇作比較。供試品按

47、上述方法處理展開顯色后，薄層色譜中供試品與表兒茶素對照品特征成分斑點對應(yīng)性好，斑點所得Rf值適中，斑點清晰。陰性樣品在薄層色譜中，在與對照藥材和樣品的色譜相應(yīng)的位置上無干擾。如圖12~15。</p><p>　　1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>

48、　　圖12 地膚子薄層鑒別色譜圖 圖13 地膚子薄層鑒別色譜圖</p><p>　?。足f酸試液，T=20℃，RH=56%) (10%硫酸乙醇，T=20℃，RH=56%）</p><p>　　樣品：1-2.地膚子對照藥材； 3-4.供試品 5-6.缺地膚子陰性樣品溶液</p><p>　　1

49、 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6</p><p>　　圖14 地膚子薄層鑒別色譜圖 圖15 地膚子薄層鑒別色譜圖 </p><p>　?。足f酸試液，T=20℃，RH=37%) （10%硫酸乙醇，T=20℃，RH=37

50、%）</p><p>　　樣品：1-2.地膚子對照藥材； 3-4.供試品 5-6.缺地膚子陰性樣品溶液</p><p>　　圖11,12為地膚子在不同顯色劑下的膠G板薄層圖，圖中樣品和對照品相應(yīng)位置上的斑點均清晰，差別性不大。而通過12,13和14,15的對比，在濕度較低時，斑點顯色較淺，其它影響不大。</p><p><b>　　3.2 含

51、量測定</b></p><p>　　黑面神為復(fù)方黑面神軟膏中的主藥，具有“清濕熱、化瘀滯”以及抑菌、抗病毒、抗炎等的功效，用于濕疹、蕁麻疹、皮膚瘙癢、過敏性皮炎、漆過敏、陰道炎、外陰瘙癢、帶狀皰疹等多種皮膚病的治療。其中復(fù)方軟膏中的主要化學(xué)成分為表兒茶素和苦參堿。近年來，對苦參堿的含量測定方法的研究很多，如高效液相色譜法（HPLC)，高效毛細管電泳法（HPCE)，薄層掃描法(TLCS),酸堿滴定法等[

52、12]。其中TLCS一般采用硅膠G薄層板、雙波長掃描法，具有取樣量少，操作簡單 分離效果好等優(yōu)點，但測定的靈敏度和準(zhǔn)確度有待提高；HPEC法具有選擇性高，分離效率高，速度快及樣品前處理簡單等優(yōu)點?？鄥A的堿性較強，極性較大，在采用HPCL法分析時，往往因為吸附太強而造成峰形不理想，但分離效果好。相對于苦參堿含量的測定，表兒茶素含量的測定方面的研究較少，一般采用高效液相色譜法（HPLC）和毛細管電泳法[13]進行測定,毛細管電泳技術(shù)是一種

53、近年來發(fā)展很快的分離分析技術(shù)，具有高效、進樣體積小、快速和抗污染能力強的特點，有關(guān)其應(yīng)用已經(jīng)做過多次報道。</p><p>　　現(xiàn)參照王英晶[7]運用HPLC測定黑面神中表兒茶素含量的方法，對研制出的復(fù)方黑面神軟膏進行含量測定，建立方中指標(biāo)成分表兒茶素和苦參堿的含量測定方法，經(jīng)方法學(xué)驗證，此方法可行。</p><p>　　3.2.1 色譜條件 </p><p>　　

54、Boston Green ODS C18色譜柱（4.6mm×250mm,5um）流動相甲醇-0.1%磷酸溶液，梯度洗脫（程序見表1），流速1.0mL·min-1,檢測波長220nm和280nm，柱溫30℃，進樣量20μL。在此條件下供試品溶液中苦參堿和表兒茶素的峰與相鄰峰能達到基線分離，其保留時間為10.026min和48.333min。理論塔板數(shù)按苦參堿峰計算應(yīng)不低于4000，表兒茶素峰應(yīng)不低于3600。</

55、p><p><b>　　表1 梯度洗脫程序</b></p><p>　　圖16 苦參堿對照品液相色譜圖</p><p>　　圖17 苦參堿樣品液相色譜圖</p><p>　　圖18缺苦參堿陰性樣品液相色譜圖</p><p>　　圖19 表兒茶素對照品液相色譜圖</p><p>

56、　　圖20 表兒茶素樣品液相色譜圖</p><p>　　圖21 缺表兒茶素陰性樣品液相色譜圖</p><p>　　3.2.2 溶液的制備</p><p>　　3.2.2.1對照品溶液的制備 </p><p>　　精密稱取表兒茶素對照品8.4mg，加50%甲醇制成每1mL含0.84mg的溶液，搖勻，即得；精密稱取苦參堿對照品14.7mg，加甲

57、醇制成每1mL含1.47mg的溶液，搖勻，即得。</p><p>　　3.2.2.2供試品溶液的制備 </p><p>　　黑面神供試品溶液的制備：取本品約2g，精密稱定，用50%甲醇20mL溶解轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶，超聲20min，50%甲醇定容，搖勻，過0.45µm濾膜，取續(xù)濾液。</p><p>　　苦參供試品溶液的制備: 取本品約2g，精密稱定，置

58、具塞錐形瓶中，加入濃氨試液1mL充分浸潤膏體后，精密加入三氯甲烷20mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率140W，頻率42kHz）30min，放冷，離心，取上清液5mL，減壓回收至干，殘渣用50%甲醇溶解轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，搖勻，即得。</p><p>　　3.2.2.3陰性溶液的制備 </p><p>　　按照處方量制備不含黑面神的陰性樣品和不含苦參的陰性樣品，

59、按照制備供試品的制備方法制備陰性對照溶液，即得。</p><p>　　3.2.2.4HPLC測定 </p><p>　　分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液20uL注入液相色譜儀，測定峰面積，按外標(biāo)法以峰面積計算表兒茶素和苦參堿的含量，陰性樣品溶液在于對照品色譜峰相同保留時間處無色譜峰出現(xiàn)，證明無陰性干擾。色譜圖見圖16~21。 </p><p>　　3.2.3

60、含量測定的方法學(xué)考察</p><p>　　3.2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 </p><p>　　分別精密吸取3.2.2.1中苦參堿和表兒茶素對照品溶液0.1，0.2，0.5，1，2，4mL置5mL量瓶中，苦參堿用甲醇稀釋至刻度，表兒茶素用50%甲醇稀釋至刻度，在3.2.1條件下進樣分析。以進樣濃度（g·L-1）為橫坐標(biāo)（X），以峰面積為縱坐標(biāo)（Y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程分別為苦參

61、堿Y=1714.9X-3.8355（r=0.9999），表兒茶素Y=13346X+11.632（r=1.0000）。標(biāo)準(zhǔn)曲線圖見圖22~23</p><p>　　圖22 表兒茶素對照品標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　圖23 苦參堿對照品標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　3.2.3.2精密度試驗 </p><p>　　精密吸取同一濃度的對照品溶液

62、，在3.2.1條件下進樣6次，測得苦參堿和表兒茶素含量，結(jié)果顯示RSD分別為0.57%和0.46%。表明實驗儀器精密度良好。</p><p>　　3.2.3.3穩(wěn)定性試驗 </p><p>　　取同一份供試品溶液，在室溫下放置0、2、4、8、12、24、48小時后分別進樣，依法測定，結(jié)果見表2和表3，軟膏中表兒茶素的平均含量為1.444，RSD為1.1%（n=7）；軟膏中苦參堿的平均含

63、量為2.458，RSD為2.0%（n=7）。結(jié)果表明：供試品溶液在48小時內(nèi)測定結(jié)果基本穩(wěn)定。</p><p>　　表2 復(fù)方黑面神軟膏穩(wěn)定性考察（表兒茶素）</p><p>　　表3 復(fù)方黑面神軟膏穩(wěn)定性考察（苦參堿）</p><p>　　3.2.3.4重復(fù)性試驗 </p><p>　　取同一復(fù)方軟膏中的樣品約5g，精密稱定，各6份，按

64、正文3.2.2.2項下方法制備供試品溶液，依法測定，結(jié)果見表4，5。復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素的平均含量為1.433mg/盒，RSD為2.5%（n=6）；軟膏中苦參堿的平均含量為2.433mg/盒，RSD為1.0%（n=6）。結(jié)果表明該方法有良好的重現(xiàn)性。</p><p>　　表4 復(fù)方黑面神軟膏重復(fù)性試驗結(jié)果（表兒茶素）</p><p>　　表5 復(fù)方黑面神軟膏重復(fù)性試驗結(jié)果（苦參堿）&l

65、t;/p><p>　　3.2.3.5加樣回收率試驗 </p><p>　　取已知含量的同一軟膏中的樣品約5g，精密稱定，各6份，分兩組，分別精密加入表兒茶素對照品溶液0.350mg和苦參堿對照品溶液0.600mg，按正文3.2.2.2項下方法制備供試品溶液，依法測定，計算回收率，結(jié)果見表6，7。復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素平均回收率為97.7%，RSD為1.4%（n=6）；復(fù)方黑面神軟膏中苦參

66、堿平均回收率為97.6%，RSD為1.5%（n=6）。結(jié)果表明表兒茶素和苦參堿的加樣回收試驗良好，符合定量分析要求。</p><p>　　表6 復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素回收率實驗結(jié)果</p><p>　　表7 復(fù)方黑面神軟膏中苦參堿回收率實驗結(jié)果</p><p>　　3.2.3.6樣品含量測定 </p><p>　　取復(fù)方黑面神軟膏的樣品3

67、批，按正文3.2.2.2項下方法制備供試品溶液，依法測定，計算供試品中表兒茶素和苦參堿的含量，結(jié)果見表8，9。</p><p>　　表8 復(fù)方黑面神軟膏中表兒茶素的含量測定結(jié)果</p><p>　　表9 復(fù)方黑面神軟膏中苦參堿的含量測定結(jié)果</p><p><b>　　4 討論</b></p><p>　　4.1 定性鑒

68、別結(jié)果</p><p>　　黑面神中薄層色譜鑒別參考文獻較少,實驗難度較大。根據(jù)于健東[12]等薄層色譜法鑒別兒茶中兒茶素和表兒茶素文獻，用正丁醇-醋酸-水（3:2:1)為展開劑，5%硫酸乙醇溶液為顯色劑105℃加熱顯色時，得到黑面神中表兒茶素的薄層色譜斑點不清晰且拖尾嚴(yán)重。后用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（70:10:20:0.5）為展開劑，10%硫酸乙醇試液為顯色劑時，發(fā)現(xiàn)展開距離太短，斑點模糊。經(jīng)過多次試驗摸

69、索最終確定使用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（70:10:30:0.5）為展開劑，25%磷鉬酸乙醇溶液為顯色劑，在110℃加熱顯色，所得結(jié)果斑點清晰分離度好。</p><p>　　其余4味藥參考文獻較多，在參照相關(guān)文獻并進行預(yù)實驗后鑒別效果理想，苦參、蛇床子、白鮮皮、地膚子均獲得很好的分離效果，薄層斑點清晰，且陰性無干擾。</p><p>　　4.2 定量鑒別結(jié)果</p><

70、;p>　　4.2.1 檢測波長的選擇</p><p>　　經(jīng)查詢2010版《中國藥典》和大量苦參堿含量測定的相關(guān)文獻，HPLC測定苦參堿含量時，所選用的波長為220nm，測定表兒茶素時選用的波長為280nm；王英晶在測量表兒茶素時，曾選用波長230nm，本實驗過程中，對比了230nm和280nm波長下表兒茶素的峰值，在280nm下的效果較少，因此選用280nm作為表兒茶素的檢測波長。</p>

71、<p>　　4.2.2 流動相的選擇</p><p>　　經(jīng)查詢2010版《中國藥典》，苦參堿的測定是用氨基鍵合硅膠為填充劑，流動相為乙腈-無水乙醇-3%磷酸溶液(80:10:10)；但本次使用的色譜柱為C18柱，用藥典的流動相在C18柱子上測定時，出現(xiàn)色譜峰分離度不好，出峰時間早的問題?？紤]到最終要測定復(fù)方軟膏中的兩種成分，所以嘗試摸索出一個流動相能在不同波長下測得兩種成分。經(jīng)摸索，選用王英晶測定表兒

72、茶素含量時的流動相（甲醇-0.1%磷酸溶液）進行梯度洗脫，苦參堿的出峰時間為10.02min左右，峰型較好，且分離度也高。所以最終選用此流動相來測定軟膏中表兒茶素和苦參堿的含量。3.2.3 表兒茶素，苦參堿在同一液相色譜的條件下，經(jīng)考察，在范圍內(nèi)的線性關(guān)系都良好，r都大于0.9998，得到的精密度，重復(fù)性和穩(wěn)定性都很好，平均回收率在90%-110%之間，RSD分別為1.4%，1.5%。由此可得，以表兒茶素和苦參堿為指標(biāo)成分，可以很好的控

73、制本品軟膏質(zhì)量。</p><p><b>　　5 結(jié)論 </b></p><p>　　在本次實驗中，所建立的高效液相色譜法，操作流程比較簡單，測量的結(jié)果比較準(zhǔn)確且靈敏度較高，從而產(chǎn)品的質(zhì)量可以得到穩(wěn)定的控制，也為復(fù)方黑面神軟膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制提供一定的依據(jù)。</p><p><b>　　參考文獻</b></p>

74、<p>　　[1] 姚啟華．神礬散的制備與用法[J]．中國中醫(yī)藥信息雜志,1997,4(6):28．</p><p>　　[2] 劉仲霞,林紅,蘇偉東．四種抗菌洗液殺菌效果的比較[J]．中國消毒學(xué)雜志,</p><p>　　2009,26(2):149-150．</p><p>　　[3] 林挺,徐潔明．中藥洗劑治療嬰兒濕疹的療效觀察[J]．實用醫(yī)學(xué)雜志

75、,2003，</p><p>　　19(8):829．</p><p>　　[4] 李東海,李勇,齊慶,等．復(fù)方二藤洗劑治療掌跖膿皰病療效觀察[J]．陜西</p><p>　　中醫(yī),2010,31(12):1626．</p><p>　　[5] 彭偉文,王英晶．黑面神的藥用歷史及現(xiàn)代研究概況[J]．今日藥學(xué),2014，</p>

76、<p>　　24(07)：618-622．</p><p>　　[6] Martine Morrison, Roel van der Heijden, Peter Heeringa, Eric Kaijzel, Lars</p><p>　　Verschuren, Rune Blomhoff, Teake Kooistra, Robert Kleemann．Epicatechin

77、</p><p>　　attenuates atherosclerosis and exerts anti-inflammatory effects on diet-induced</p><p>　　human-CRP and NFkB in vivo[J]．Atherosclerosis, 2014(233):149-156. </p><p>　　[7] 王

78、英晶,彭偉文,梅全喜．黑面神枝葉中表兒茶素的含量測定及水提工藝優(yōu)</p><p>　　化[J]．中國實驗方劑學(xué)雜志,2014.20(9):93-96.</p><p>　　[8] 袁建平,呂艷,黃興富等．金芥麥配方顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[J]．中國藥師,2012，</p><p>　　15(5):643-644. </p><p>　　[9] 國家藥

79、典委員會．中華人民共和國藥典(一部)[S]．北京：中國醫(yī)藥科技出版</p><p>　　社2010:296.</p><p>　　[10] 王春桃,符洪．白山片的薄層色譜鑒別方法研究[J]．中國熱帶醫(yī)學(xué),2008,8</p><p>　　(6):1036-1037.</p><p>　　[11] 林以慈,何昭斌,孫虹等．歸芍止癢顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研

80、究[J]．中華中醫(yī)藥學(xué)刊,</p><p>　　2014,32(9):2182-2184.</p><p>　　[12] 蔣珍藕．苦參堿的提取工藝及測定方法的研究進展[J]．中醫(yī)藥導(dǎo)報,2005,</p><p>　　11(8):91-94.</p><p>　　[13] 袁倬斌,李向軍．毛細管電泳安培檢測法測定兒茶中的兒茶素,表兒茶素[J]

81、．</p><p>　　分析實驗室,2003,22:109-113.</p><p>　　[14] 毛丹,陳鈳,王柯等．HPLC法測定苦參軟膏中苦參堿、槐定堿[J]．中成藥,</p><p>　　2011,33(9):1531-1534.</p><p>　　[15] 高劍鋒,易以木,邱娟．HPLC法測定復(fù)方兒茶軟膏中兒茶素和表兒茶素含量&l

82、t;/p><p>　　[J]．藥物分析雜志,2007,27(7):1105-1107.</p><p><b>　　綜 述</b></p><p>　　黑面神和苦參的研究進展</p><p>　　復(fù)方黑面神軟膏由君藥黑面神，臣藥苦參和佐藥蛇床子、白鮮皮和五味子五味中藥組成，是具有消炎止癢功效外用制劑，用于多種皮膚病的治療。

83、近年來，對黑面神和苦參的藥理作用和臨床應(yīng)用有較多的報道，為了給復(fù)方黑面神軟膏的進一步開發(fā)利用提供一些科學(xué)依據(jù)和提高臨床用藥的準(zhǔn)確性，本文將對其復(fù)方中的君藥和臣藥的化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用的研究進展做一概述。</p><p><b>　　1 黑面神</b></p><p>　　黑面神為大戟科植物黑面神Breynia fruticosa(L.)Hook.f.的干燥嫩枝

84、葉,又名青凡木，分布于廣東、廣西、海南 、福建、云南、浙江、貴州等地，為廣東常用地產(chǎn)藥材，具有活血解毒、清熱祛濕的功效。 主要用于濕疹，纏腰火丹，腹痛吐瀉，皮炎，漆瘡，產(chǎn)后乳汁不通，風(fēng)濕痹痛，陰癢等癥的治療[1]。</p><p><b>　　1.1 化學(xué)成分</b></p><p>　　相關(guān)文獻表明黑面神的葉子含有鞣質(zhì)、三萜和酚類，種子含有脂肪油。M.Ilyas[2

85、]首次在Breynia rhamnoides中檢測到含有植物甾醇，包括膽甾醇、萊子甾醇和豆甾醇等化合物。</p><p>　　浮光苗[3]對黑面神的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)的研究。通過化學(xué)方法和波譜學(xué)方法(MS、IR、UV等)鑒定了其中的16個化合物，分別是aviculin、木栓醇、無羈萜、5-羥基- 7，8，4-三甲氧基黃酮、表兒茶素等。另外，毛華麗[4]系統(tǒng)地對黑面神干燥地上部分進行了的化學(xué)成分研究，分離鑒定了15

86、個化合物，其中包括熊果酸、咖啡酸、豆甾醇、香草醛、原兒茶醛、異佛爾酮等。</p><p><b>　　1.2 藥理作用</b></p><p>　　1.2.1 抗炎作用</p><p>　　根據(jù)有關(guān)文獻報道，黑面神枝葉的水提物具有一定的抗炎作用。彭偉文等[5]通過二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗及腹腔注射醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性增高實驗，并觀察黑面

87、神枝葉的水提物通過灌胃給藥對炎癥反應(yīng)的影響，結(jié)果數(shù)據(jù)表明黑面神的水提物高、低劑量組對二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹及由醋酸引起的組織毛細血管的通透性均具有極顯著的抑制作用，從而表明了黑面神的水提液具有明顯的抗急性炎癥的作用。另外，將在小鼠右耳正反兩側(cè)涂上黑面神枝葉的水提物，通過二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗，觀察黑面神外用給藥對炎癥反應(yīng)的影響。結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，黑面神高、低劑量組、皮炎平對照組與空白對照組比較，對二甲苯致小鼠耳廓腫脹度在統(tǒng)計學(xué)上均具有顯

88、著性差異(P﹤0.01) ，表明黑面神的水提物外用給藥時對急性炎性腫脹具有明顯抑制作用，但不顯示劑量依賴性。 </p><p>　　1.2.2 抗病毒作用</p><p>　　孟正木等[6]研究雞血藤、赤芍、芡實、白背葉、何首烏、三加皮、腎蕨和青凡木等8種中草藥提取物對單純皰疹病毒1型、水皰性口炎病毒、流感病毒 A 型、腺病毒3型及艾滋病毒逆轉(zhuǎn)錄酶活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，青凡木( 黑面神) 對腺

89、病毒、水皰性口炎病毒顯示較低的CPIE，表明有強的抗病毒活性，但其細胞毒性大，ST≤1。</p><p>　　1.2.3 抑菌作用</p><p>　　有文獻報道[7]，將6只健康狗分為治療組和對照組，靜脈注入4億綠膿桿菌造成綠膿桿菌敗血癥。治療組每天每公斤體質(zhì)量靜脈注射24毫升5%黑面神注射液,7天為一個療程，對照組不予治療處理。實驗期間每天抽血培養(yǎng)。結(jié)果顯示，治療組用藥后平均5~7天

90、細菌培養(yǎng)轉(zhuǎn)為陰性，對照組10天后抽血培養(yǎng)仍有綠膿桿菌生長，表明黑面神有較好的抑菌作用。另據(jù)報道[8]，1:1200黑面神的流浸膏稀釋液在試管內(nèi)對綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、大腸桿菌和甲型鏈球菌均有很強的抑菌作用，可能與其所含鞣質(zhì)有關(guān)，還有待進一步研究。</p><p>　　1.2.4 抗皮膚I型超敏反應(yīng)作用</p><p>　　彭偉文等[9]給小鼠灌胃黑面神水提物，采用尾靜脈

91、注射低分子右旋糖酐誘發(fā)小鼠陣發(fā)性皮膚瘙癢，記錄小鼠30min內(nèi)的陣發(fā)性皮膚瘙癢發(fā)作次數(shù)及時間，以組胺使小鼠毛細血管通透性增高觀察藥物對通透性的影響，從而探討黑面神水提物抗皮膚I型超敏反應(yīng)作用。結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，黑面神水提物各劑量組均能明顯抑制陣發(fā)性皮膚瘙癢發(fā)作次數(shù)，降低持續(xù)時間，顯著抑制小鼠毛細血管通透性，表明黑面神水提物可通過抑制組胺的釋放發(fā)揮抗皮膚I型超敏反應(yīng)作用。</p><p><b>　　1.3

92、臨床應(yīng)用</b></p><p>　　祖國中醫(yī)藥對黑面神的臨床應(yīng)用有著一定的文字記載，其臨床應(yīng)用主要包括治療各類皮膚病、治療慢性支氣管炎、治療各類咬傷等。</p><p>　　《全國中草藥匯編》記載:“黑面葉( 鮮)30g,東風(fēng)橘、芒果葉各15g，紅糖9g。水煎服，每日1劑治療慢性支氣管炎?！爆F(xiàn)代臨床應(yīng)用中，黑面神合劑新復(fù)方[7]治療慢性氣管炎262例，服藥后在短期內(nèi)臨床癥狀緩

93、解迅速，療效穩(wěn)定，復(fù)發(fā)率低，是治療慢性氣管炎療效較好的方劑且沒有明顯副作用?！陡＝ㄋ幬镏尽酚涊d:“黑面神葉、百部各60g。水煎沖明礬適量，洗患處治漆過敏，濕疹。”相關(guān)文獻報道，神礬散對于接觸性皮炎、皮膚瘙癢證、腳氣病、凍瘡、濕熱隱疹等癥有效，對于接觸漆或紅花油引起的皮膚過敏有特效[10]?！稄V西民間常用中草藥》載曰：“青凡木葉、黃糖各適量，搗爛，敷患處?！薄稁X南草藥志》載曰：“黑面神葉、蛇總管、黑骨走馬，搗爛取汁，再用洗米水將藥煎湯1小

94、碗，加入藥汁和服，藥渣外敷傷口周圍治蛇咬傷?！?lt;/p><p><b>　　2 苦參</b></p><p>　　苦參為豆科植物苦參SophoraflavescensAit.的干燥根。春、秋二季采挖，除去根頭和小支根，洗凈，干燥，或趁鮮切片，干燥。性味歸經(jīng)：苦，寒。歸心、大腸、胃、肝、膀胱經(jīng)。功能主治：清熱燥濕，殺蟲，利尿。用于便血，黃疸尿閉，熱痢，濕疹，濕瘡，皮膚瘙

95、癢，赤白帶下，陰腫陰癢，疥癬麻風(fēng)，外治滴蟲性陰道炎[11]。</p><p>　　2.1化學(xué)成分[12]</p><p>　　目前，研究表明苦參中分離經(jīng)鑒定的化學(xué)成分主要有兩大類：生物堿類,黃酮類化合物。</p><p>　　從苦參根、葉、莖和花中共分離出23種生物堿，大多數(shù)為喹嗪生物堿，主要有苦參堿、槐果堿、氧苦參堿、臭豆堿、槐安堿、槐定堿別苦參堿等。從苦參總黃酮

96、部分分離和鑒定了約60余個黃酮類化合物，其中苦參中的黃酮類化合物大多為二氫黃酮、二氫黃酮醇。顯示活性的主要有苦參酮、苦參醇、槐黃醇、苦參啶、高麗槐素、去甲苦參、苦參啶醇和黃腐酚等。從苦參中還分離出植物血凝素、揮發(fā)油、脂肪酸、大豆甾醇B、大黃酚、胞嘧啶、sophoradione等化學(xué)成分。</p><p><b>　　2.2藥理作用</b></p><p><b&

97、gt;　　2.2.1抗炎作用</b></p><p>　　譚元生等[13]研究發(fā)現(xiàn)復(fù)方苦參洗液對二甲苯和角叉菜膠所致的炎性腫脹具明顯抑制作用,并具有較好增強細胞免疫功能和止癢作用。另外，劉瑋等[14]以實驗動物建立模型 ,觀察以中藥苦參醇提液研制的女性護理液的抗炎、止癢作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)以苦參醇提液和三氯羥基二苯醚復(fù)配，其抗炎和止癢作用均接近地塞米松磷酸鈉注射液，間接表明苦參具有抗炎作用。焦霞等[15]建

98、立小鼠哮喘模型 ,觀察氧化苦參堿對哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中炎性細胞、肺組織病理的改變，檢測肺組織IL -4mRNA表達的變化，從而探討氧化苦參堿治療哮喘的抗炎作用機制及其對白細胞介素 -4 (IL -4mRNA )表達的影響。結(jié)果顯示氧化苦參堿可顯著減輕哮喘小鼠氣道及肺組織中嗜酸性細胞的浸潤 ,抑制哮喘小鼠肺組織中IL -4mRNA的表達水平。表明氧化苦參堿對哮喘小鼠有明顯的抗氣道變應(yīng)性炎癥及抑制IL -4mRNA表達的作用。

99、0;</p><p><b>　　2.2.2抗菌作用</b></p><p>　　根據(jù)國內(nèi)學(xué)者所做的的體外實驗證實，苦參對多種病原體有抗菌抑菌作用。如今已知苦參堿、氧化苦參堿、三葉豆檀甙、槐定堿、高麗槐素是抗菌的活性成分?？鄥α〖矖U菌、變形桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和乙型鏈球菌有明顯抑制作用。楊潔等[16]用中藥抑菌方法,對苦參提取物進行208株表皮葡萄菌的最低

100、抑菌濃度(MIC)測定。結(jié)果顯示,苦參提取物對208株表皮葡萄球菌中的110株耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)和98株甲氧西林敏感表皮葡萄球(MSSE)的MIC90分別為1185μg/mL和286μg/mL,表明苦參提取物對208株表皮葡萄球菌具有較強的抑菌作用。陳亞軍[17]用其治療慢性乙肝患者40例并與對照組40例療效進行比較,結(jié)果HBeAg轉(zhuǎn)陰率為35%,HBV_DNA轉(zhuǎn)陰率為38%,明顯優(yōu)于對照組(P<0.05),表明苦

101、參素具有良好的抗病毒作用。</p><p>　　2.2.3抗過敏作用</p><p>　　金四立等[18]采用被動皮膚過敏試驗檢測血清IgE水平;間接空斑形成細胞法檢測抗體形成細胞;間接免疫熒光法檢測淋巴結(jié)TH/Ts比值。結(jié)果顯示苦參對小鼠血清IgE、抗體形成細胞及TH/Ts比值均無明顯影響。結(jié)果表明苦參具有抗過敏作用。</p><p><b>　　2.3

102、臨床應(yīng)用</b></p><p><b>　　2.3.1治療濕疹</b></p><p>　　目前國內(nèi)有學(xué)者對各型濕疹患者進行了研究。徐國紅[19]分別給治療組和對照組注射主要含氧化苦參堿的苦參素注射液和葡萄糖酸鈣，結(jié)果表明苦參素注射液對各型濕疹均有明顯療效，對急性、亞急性患者尤為顯著，并且與對照組有顯著性差異。</p><p>

103、　　2.3.2治療肺結(jié)核</p><p>　　李云華等[20]對82例HBVM陽性肺結(jié)核患者分成治療組42例,在常規(guī)抗癆治療的同時,給予苦參素膠囊200 mg,每日三次口服。對照組40例,只給予常規(guī)抗癆治療。結(jié)果發(fā)現(xiàn)對照組肺結(jié)核患者在治療2、4個月時肝功能異常率和治療組相比有顯著性差異。結(jié)果表明苦參素對HBVM陽性肺結(jié)核患者的肝功能有明顯的保護作用。 </p><p>　　2.3

104、.3治療銀屑病</p><p>　　苦參堿有抗炎和調(diào)節(jié)免疫的作用，并且可以抑制角朊細胞的增殖，皮膚角朊細胞異常增殖和分化是銀屑病的主要病理特征。景衛(wèi)霞等[21]將138例尋常型銀屑病患者隨機分為阿維A組和聯(lián)合組。阿維A組60例,給予口服阿維A膠囊，聯(lián)合組78例,在阿維A組治療基礎(chǔ)上聯(lián)用苦參堿葡萄糖注射液，兩組療程均為8周。結(jié)果聯(lián)合組療效明顯優(yōu)于阿維A組(P<0.05),不良反應(yīng)率也明顯低于阿維A組(P<

105、;0.05),且不良反應(yīng)程度也較阿維A組輕。表明苦參堿葡萄糖注射液聯(lián)合阿維A膠囊治療尋常型銀屑病療效確切,較單用阿維A膠囊組可明顯提高療效,且降低不良反應(yīng)發(fā)生率和減輕不良反應(yīng)程度。 </p><p><b>　　3結(jié)語</b></p><p>　　近幾年，國內(nèi)外對苦參的研究開發(fā)十分活躍，雖然對黑面神藥理作用及臨床應(yīng)用的研究報道也日益增多但相比其他中藥還算很少

106、。黑面神為廣東地產(chǎn)藥材，資源豐富、應(yīng)用廣泛。在民間和臨床上廣泛運用黑面神治療皮炎、濕疹等各類皮膚病，療效較好，具有較大的藥用研究價值。通過對黑面神和臣苦參的化學(xué)成分、藥理作用和臨床應(yīng)用等幾方面研究的概述，為初步研制出的治療皮膚病的外用新藥復(fù)方黑面神軟膏在臨床應(yīng)用上提供一些科學(xué)依據(jù)。今后可在目前研究的基礎(chǔ)上，不斷吸收現(xiàn)代科技成果和中醫(yī)藥理論的成果，利用黑面神研發(fā)更有效的劑型，使其更好服務(wù)于人。</p><p>&l

107、t;b>　　參考文獻</b></p><p>　　[1] 《廣東中藥志》編輯委員會,廣東中藥志(第一卷)[M]．廣州：廣東科技出版</p><p>　　社,1990:362.</p><p>　　[2] M.Ilyas, Ranijana Verma, Parveen Jarnal．Chemical investigation of the lea

108、ves of</p><p>　　Breynias rhamnoids[J]．Indian Chem, Soc.1978,LV.964.</p><p>　　[3] 浮光苗．狼毒類活性成分研究和黑面神資源化學(xué)研究[D]．南京：中國藥科大</p><p><b>　　學(xué)，2003.</b></p><p>　　[4] 毛華

109、麗．黑面神化學(xué)成分的分離及結(jié)構(gòu)鑒定[D]．浙江：浙江工業(yè)大學(xué)，2009.</p><p>　　[5] 彭偉文,譚泳怡,梅全喜,等．黑面神水提物抗炎作用實驗研究[J]．今日藥學(xué),</p><p>　　2012,22(3):145-147.</p><p>　　[6] 孟正木．八種中草藥的抗病毒活性研究［J］．中國藥科大學(xué)學(xué)報，1995,26(1):</p>