水稻內(nèi)生真菌與其化感作用相關(guān)性的研究.pdf

1、本研究以強化感水稻PI312777和弱化感水稻Lemont為材料，田間種植并進行干旱脅迫處理，同時以濕地種植的材料為對照。對其內(nèi)生真菌進行平板分離培養(yǎng)、菌種鑒定、發(fā)酵培養(yǎng)，并對其發(fā)酵液進行化感效應(yīng)分析；結(jié)合T-RFLP技術(shù)對水稻內(nèi)生真菌的群落多樣性進行研究。具體結(jié)果如下： 1、以平板培養(yǎng)法從供試樣品中共分離出103株內(nèi)生真菌，經(jīng)鑒定主要為子囊菌亞門和半知菌亞門真菌。從四種供試樣品中分離所得內(nèi)生真菌數(shù)量呈規(guī)律性變化：干旱脅迫PI3

2、12777得到38株，濕地PI312777得到26株，干旱脅迫Lemont得到22株，濕地Lemont得到17株。在此兩種處理條件下，強、弱化感水稻的內(nèi)生真菌均以鐮刀菌屬為優(yōu)勢菌群；強化感水稻PI312777中黃孢原毛平革菌(具有降解酚酸類物質(zhì)的功能)和麥角菌(具有產(chǎn)生生物堿物質(zhì)的功能)的分離頻率高于弱化感水稻Lemont，且在干旱脅迫下，上述兩類真菌的分離頻率均顯著高于濕地種植的同種水稻。此外，強化感水稻PI312777中還分離到特有

3、真菌毛殼霉(具有產(chǎn)生生物堿物質(zhì)的功能)。 2、內(nèi)生真菌發(fā)酵液的生物測試結(jié)果顯示：85％以上內(nèi)生真菌的發(fā)酵液對稗草生長表現(xiàn)為不同程度的化感抑制，而并不影響其宿主水稻的生長；對稗草抑制率在50％以上的內(nèi)生真菌分別來自于鐮刀菌屬、木霉屬、彎胞霉屬、麥角屬和毛殼霉屬；彎胞霉屬、毛殼霉屬真菌為強化感水稻PI312777所特有；麥角屬真菌的化感抑草效率最高，對稗草根、莖的抑制率分別為92.36％和75.38％；麥角屬真菌在強化感水稻中的分離

4、頻率高于弱化感水稻，且此真菌在干旱脅迫處理下的分離頻率高于對照。 3、利用限制性內(nèi)切酶HaeⅢ和HinfⅠ，分別對擴增所得內(nèi)生真菌ITS區(qū)間酶切，經(jīng)毛細管電泳分析結(jié)果表明：四種供試樣品內(nèi)生真菌群落結(jié)構(gòu)之間均存在顯著差異。HaeⅢ酶切得到T-RFs分別是：干旱脅迫PI312777為28個， Lemont為17個，其對照株分別為19和16個；HinfⅠ酶切得到T-RFs分別是：干旱脅迫PI312777為29個，Lemont為26個，

5、其對照株分別為24和13個；經(jīng)Dickie真菌數(shù)據(jù)庫序列長度比對，22種內(nèi)生真菌主要屬于擔(dān)子菌亞門。T-RFs的生物信息學(xué)分析結(jié)果表明，強化感水稻PI312777中可降解酚酸類物質(zhì)的腐生真菌數(shù)量高于弱化感水稻Lemont，同時干旱脅迫處理也會誘導(dǎo)該類內(nèi)生真菌數(shù)量的增多；光硬皮馬勃(含麥角甾醇)、絲膜菌屬(可產(chǎn)生奧萊毒素)、鵝膏菌(可產(chǎn)生鵝膏菌毒素)均為強化感水稻PI312777所特有。 綜上所述，內(nèi)生真菌與其宿主是一個相互影響、