錦鯉皰疹病毒兩個類蛋白激酶蛋白的研究.pdf

1、錦鯉皰疹病毒首次暴發(fā)于以色列Magan Michael地區(qū)，由于其在2001年4月在以色列再次暴發(fā)而被以色列列入水生動物疾病名錄。錦鯉皰疹病毒(Koi carpherpesvirus，KHV)具有極高的傳染性，以及高致死率，對水產(chǎn)養(yǎng)殖造成了巨大的經(jīng)濟損失，因此如何有效的檢測和預防KHV成為當前水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)面臨的嚴峻問題。
　　近年來多個實驗室相繼報道了一些有效的診斷方法，主要通過細胞培養(yǎng)分離技術(shù)、電鏡技術(shù)、聚合酶鏈式反應、酶聯(lián)免疫吸

2、附測定、原位雜交技術(shù)以及恒溫核酸擴增方法(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)等，其中PCR和細胞培養(yǎng)技術(shù)是世界動物衛(wèi)生組織(World Organisation for Animal Health，OIE)推薦的最為有效的診斷方法。
　　由于依靠傳統(tǒng)的方法難以獲得有效的針對KHV的疫苗，基于已知ORF基因序列，基因工程疫苗的研究因其可靠穩(wěn)定的優(yōu)點而引起重視。但目前對于該病毒其他

3、ORF的研究還未有進一步的報道，尤其是存在于皰疹病毒中的蛋白激酶在KHV中還未有報道。
　　通過熒光定量PCR檢測了KHV在病毒感染宿主細胞0-96小時內(nèi)11個基因的表達情況。通過結(jié)果發(fā)現(xiàn)，KHV的兩個激酶類似物基因表達含量相對較低，其是否具有類似于哺乳類皰疹病毒蛋白激酶的功能，通過體外過表達的方法在HEK293T中過表達這兩個激酶探討其功能以及通過建立針對于這兩個基因的核糖核酸干擾穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系，探討在病毒感染宿主細胞后，這兩個