致雞急、慢性腫瘤的禽白血病病毒株對(duì)不同品系雞的致病性研究.pdf

1、禽白血病病毒(AvianLeukosisVirus，ALV)是一群能夠引起雞的可傳播的良性和惡性腫瘤以及引起亞臨床感染并導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降的的反轉(zhuǎn)錄病毒。其中以主要引起髓細(xì)胞樣瘤的J亞型禽白血病病毒(ALV-J)對(duì)雞的傳染性和致病性最強(qiáng)，感染嚴(yán)重的雞群腫瘤死淘率可達(dá)到20％。近幾年，ALV-J不僅在白羽肉雞中流行，而且在我國(guó)各地區(qū)不同品種雞廣泛傳播。但目前不同遺傳背景雞群中ALV-J的感染狀態(tài)不清楚，更缺乏有關(guān)中國(guó)地方品系雞對(duì)ALV-J易

2、感性的比較研究。
　　 本研究對(duì)來(lái)自817肉雜雞肉瘤組織的分離株SD1005進(jìn)行了病原學(xué)分析，并選擇了來(lái)自尼克珊瑚粉蛋用雞與817肉雜雞的2株ALV對(duì)6種不同品系雞分別進(jìn)行了易嗜性比較研究。研究結(jié)果表明，來(lái)自817肉雜雞肉瘤組織的分離株SD1005同時(shí)存在ALV-J、ALV-A的共感染，并具有急性、高致瘤性的特點(diǎn)。本研究還初步證實(shí)，來(lái)自蛋用雞的ALV-J分離株P(guān)Y081023與來(lái)自817肉雜雞的ALV-J、ALV-A混合株SD1

3、005對(duì)不同品系雞的致病性不同。
　　 1、急性致瘤分離株SD1005的致病性研究
　　 1.1、急性致瘤分離株SD1005中不同亞型ALV的分離鑒定
　　 山東某地飼養(yǎng)的36日齡817肉雜雞生長(zhǎng)遲緩并發(fā)生頸部肉瘤，該肉瘤組織無(wú)菌處理后得到急性致瘤株SD1005。人工感染3日齡的817肉雜雞進(jìn)行動(dòng)物回歸試驗(yàn)，結(jié)果復(fù)制出同樣肉瘤。用復(fù)制出的新鮮肉瘤分別制備肉瘤細(xì)胞與肉瘤組織觸片，IFA試驗(yàn)驗(yàn)證出ALV-A與ALV-

4、J均為陽(yáng)性，且發(fā)現(xiàn)ALN-A與ALV-J共感染同一個(gè)組織細(xì)胞。同時(shí)，取腫瘤病雞的新鮮組織器官制備觸片和病理組織切片，分別用免疫組織化學(xué)(IHC)法和IFA法對(duì)觸片和切片進(jìn)行ALV-J檢測(cè)。結(jié)果顯示，兩種用于抗原定位的染色方法的檢測(cè)結(jié)果完全吻合，病雞的腫瘤、法氏囊、骨髓、肝臟、心臟、脾臟等組織中均存在ALV-J。同時(shí)，通過(guò)PCR方法擴(kuò)增并鑒定出急性致瘤株SD1005含有ALV-A、ALV-J。
　　 1.2、急性致瘤分離株SD10

5、05對(duì)不同品系雞的泛嗜性研究
　　 急性致瘤分離株SD1005為ALV-A和ALV-J共感染株，該毒株對(duì)1日齡817肉雜雞進(jìn)行的致瘤性與接種部位的嗜性研究結(jié)果顯示，頸部、胸肌與腹部皮下接種分別在相應(yīng)接種部位復(fù)制出肉瘤，表明肉瘤形成與接種部分密切相關(guān)。對(duì)不同日齡817肉雜雞致瘤性結(jié)果顯示，1、7、14和21日齡人工感染組均發(fā)生肉瘤，肉瘤發(fā)生率分別為100％(20/20)、94％(16/17)、100％(7/7)和37％(7/19)

6、，顯然，肉瘤發(fā)生率對(duì)感染日齡有較強(qiáng)的依賴性。分別人工感染1日齡817肉雜雞、海蘭褐蛋雞與白羽肉雞、自來(lái)航系SPF雞等4個(gè)品系雞，結(jié)果表明，817肉雜雞、海蘭褐蛋雞、白羽肉雞等3個(gè)不同品種雞在人工感染后14d均復(fù)制出肉瘤，人工感染后5w，致瘤率均大于80％；但SPF白來(lái)航雞人工感染后21d的死亡雞，剖檢才發(fā)現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的肉瘤，至36d，肉瘤發(fā)生率僅為24％(11/45)，顯然，肉瘤發(fā)生對(duì)品種的嗜性不同。本研究顯示，來(lái)自817肉雜雞的肉瘤組織

7、上清液接種雞可誘發(fā)急性肉瘤。
　　 2、慢性致瘤分離株P(guān)Y081023對(duì)不同品系雞的致病性研究
　　 選擇來(lái)自尼克雞的ALV-J慢性致瘤分離株P(guān)Y081023(本實(shí)驗(yàn)室分離保存)，分別以2000TCID50/只人工感染1日齡尼克珊瑚粉蛋雞、萊蕪黑雞兩個(gè)不同品系雞各30只，比較其對(duì)不同品種雞的致病性差異。結(jié)果表明，在萊蕪黑雞，ALV-J感染造成生長(zhǎng)遲緩，與對(duì)照組差異顯著(p<0.05)，在體液免疫指標(biāo)上則差異不顯著(p>0

8、.05)；在尼克雞，感染組與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(p>0.05)。同時(shí)對(duì)人工感染后6w、7w的脾臟中CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，尼克雞與萊蕪黑雞的感染組脾臟內(nèi)CD8+T細(xì)胞均低于對(duì)照組(p<0.05)；而尼克雞的7周齡感染雞CD4+T細(xì)胞明顯高于對(duì)照組，萊蕪黑雞6w、7w感染雞脾臟內(nèi)CD4+T細(xì)胞則均低于對(duì)照雞。結(jié)果表明，來(lái)自尼克雞的PY081023分離株對(duì)2個(gè)品種雞的致病性存在差異，相同劑量的ALV-J感染對(duì)萊蕪黑雞的致病