辣椒恢復(fù)基因分子標(biāo)記的篩選及在染色體上的定位.pdf

1、目前辣(甜)椒利用不育系,恢復(fù)系,保持系三系配套方法生產(chǎn)一代雜種,因其純度高,生產(chǎn)成本低,已成為辣(甜)椒雜種優(yōu)勢(shì)利用的重要途徑.在利用CMS生產(chǎn)雜交種中,新的方法——分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)顯示出巨大的潛力.該研究針對(duì)制鐘過(guò)程中,恢復(fù)系選育周期長(zhǎng),選育效率低及恢復(fù)源少的現(xiàn)狀,以不育系與恢復(fù)系為材料,應(yīng)用BSA法,尋找恢復(fù)基因的標(biāo)記位點(diǎn).為縮短恢復(fù)系選育周期,分離克隆恢復(fù)基因,并為將辣椒恢復(fù)基因轉(zhuǎn)入甜椒,人工創(chuàng)造甜椒相應(yīng)的恢復(fù)系奠定基礎(chǔ).通

2、過(guò)上述方法得到如下結(jié)果:1、該研究采用336個(gè)10bp隨機(jī)引物分析了辣椒不育系與恢復(fù)系基因組DNA池間的多態(tài)性,有37個(gè)引物的擴(kuò)增產(chǎn)物在不育系和恢復(fù)系材料間呈多態(tài)性,經(jīng)進(jìn)一步的重復(fù)實(shí)驗(yàn)證明,只有引物S418能夠產(chǎn)生穩(wěn)定的多態(tài)性.其大小為1500bp左右.以S418為引物,對(duì)不育系和恢復(fù)系進(jìn)行單株檢測(cè).在恢復(fù)系基因組DNA中均得到一條1500bp左右的特有標(biāo)記,并能穩(wěn)定出現(xiàn).將此特異片段回收,制備探針.進(jìn)一步的熒光原位雜交分析顯示:S41