鉛鎘聯(lián)合中毒對大鼠肝腎損傷的研究.pdf

1、鉛(lead，Pb)和鎘（lead，Pb）作為廣泛存在于自然界中的慢性蓄積性毒物，對人類和動物健康所造成的威脅主要來源于職業(yè)性接觸與環(huán)境污染。近年來由于工業(yè)的革新和環(huán)保產(chǎn)業(yè)的滯后，使人類生存環(huán)境受到了廣泛的Pb和Cd的聯(lián)合污染。伴生性的鉛鎘主要通過呼吸和消化系統(tǒng)進入機體產(chǎn)生損傷，并呈現(xiàn)出多系統(tǒng)和多器官性。近年來，鉛鎘聯(lián)合污染給公眾健康帶來的極大危害，已引起廣泛性關(guān)注。目前，國內(nèi)外對環(huán)境中污染物效應(yīng)的評價已由大劑量污染物的急性暴露研究發(fā)展

2、到更接近實際環(huán)境的長期暴露和低劑量水平的研究。本研究采用SD大鼠為試驗動物，通過急性試驗和亞慢性試驗相結(jié)合的方法系統(tǒng)地探討鉛鎘聯(lián)合對大鼠的內(nèi)臟靶向器官的毒性損傷作用及可能的毒性機理，旨在為鉛鎘聯(lián)合毒性的研究提供一定的科學(xué)依據(jù)。
　　1、鉛鎘聯(lián)合對大鼠的急性毒性研究:按照等毒性配比法混合硝酸鉛與氯化鎘溶液進行急性毒性試驗，采用Bliss法和Keplinger標(biāo)準(zhǔn)進行毒性評價，并應(yīng)用光鏡和電鏡觀察大鼠染毒后各臟器的顯微與超微結(jié)構(gòu)變化。

3、結(jié)果顯示，鉛鎘聯(lián)合作用下大鼠的絕對致死量(absolute lethal dose，LD100)為5062.00 mg/kg，最大耐受濃度(maximal tolerance dose，MTD)為1436.00 mg/kg，半數(shù)致死量(medianlethal dose，LD50)為2696.54 mg/kg，95％可信區(qū)間是2162.00～3362.89mg/kg。肝臟、腎臟和脾臟是鉛鎘聯(lián)合急性中毒的靶器官。光鏡下，主要表現(xiàn)為靶器官的

4、各級血管發(fā)生不同程度的充血和溶血、靶器官實質(zhì)細(xì)胞發(fā)生不同程度的變性（水泡變性和顆粒變性）和壞死。電鏡下，主要表現(xiàn)為細(xì)胞器結(jié)構(gòu)破壞。結(jié)果表明，硝酸鉛和氯化鎘聯(lián)合急性毒性為相加作用，對大鼠肝臟、腎臟和脾臟均有不同程度的急性毒性損傷。
　　2、鉛鎘聯(lián)合對大鼠的亞慢性毒性研究:80只健康SD大鼠，隨機分成3個試驗組和1個對照組，每日對各試驗組大鼠經(jīng)口給予29.96、89.88和269.65mg·kg-1鉛鎘混合溶液（硝酸鉛與氯化鎘混合溶于

5、水），對照組自由飲水，持續(xù)灌胃90d，進行如下試驗:①每30d采集一次血液，檢測血液生理生化指標(biāo)的變化;②每隔30d，測定血清、肝臟和腎臟中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性、過氧化氫酶(CAT)活性和還原型谷胱甘肽(GSH)活性的變化;③通過光學(xué)和透射電鏡觀察染毒后大鼠肝臟和腎臟的組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)的變化;④大鼠肝臟和腎臟中金屬硫蛋白(MT)的表達(dá)量采用免疫組化和熒光定量PCR

6、檢測。結(jié)果表明:①與對照組相比，各試驗組大鼠血液白細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞總數(shù)和血紅蛋白含量總體呈現(xiàn)先上升后下降的顯著變化（P＜0.05）;谷草轉(zhuǎn)氨酶活性、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性和尿素含量持續(xù)顯著上升(P＜0.05);血糖和總膽固醇含量最高劑量組顯著下降，甘油三脂含量表現(xiàn)為最低劑量組顯著上升(P＜0.05);總蛋白、白蛋白、球蛋白、肌酐含量無顯著變化。②肝臟和腎皮質(zhì)中SOD、GSH-PX、CAT活性和GSH含量顯著下降(P＜0.01)，MDA含量顯著升

7、高(P＜0.01)，呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系;血清中相應(yīng)的酶活性、非酶類抗氧化劑含量以及丙二醛含量變化與肝組織和腎皮質(zhì)中相一致。③光學(xué)顯微鏡下，各劑量組大鼠肝細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的顆粒變性、水泡變性和細(xì)胞壞死。同時，超微結(jié)構(gòu)變化明顯，表現(xiàn)為肝細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞線粒體腫脹、嵴模糊、部分空泡化;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張、斷裂;核染色質(zhì)濃縮邊集，核周間隙增寬。④各劑量組大鼠肝臟和腎皮質(zhì)中的MT-1、MT-2表達(dá)量均顯著高于對照組(P＜0.01

8、)，呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。綜合以上試驗結(jié)果，可以得出以下結(jié)論:①鉛鎘聯(lián)合暴露對大鼠的血液生理生化指標(biāo)有顯著影響，長期低劑量鉛鎘聯(lián)合中毒后可引起動物機體不同程度的肝功能和腎功能損傷;②鉛鎘聯(lián)合暴露明顯抑制SD大鼠肝臟和腎臟組織主要酶類和非酶類抗氧化劑的水平，顯著降低動物機體的抗氧化能力;③鉛鎘聯(lián)合暴露可引起肝臟和腎臟顯著病理學(xué)損傷和多種細(xì)胞器損傷，其中線粒體損傷較顯著;④MT-1、MT-2基因表達(dá)量顯著升高是導(dǎo)致鉛鎘聯(lián)合肝毒性和腎毒性