綿羊毛性狀相關(guān)基因的鑒定及初步研究.pdf

1、中國美利奴羊無論在產(chǎn)毛量或羊毛品質(zhì)上都是我國優(yōu)秀的遺傳資源，但它與澳洲美利奴羊等世界著名綿羊品種之間還存在著一定差距，如何縮小這種差距甚至超越它們成為我國綿羊遺傳育種工作者的一項重要任務(wù)，而目前常規(guī)的育種方法已不能取得明顯的改良效果，越來越多的育種工作者們試圖通過尋找與綿羊毛性狀相關(guān)的基因并運用分子水平的操作提高羊毛的產(chǎn)量和改善羊毛的品質(zhì)。 本研究首先以中國美利奴羊成年母羊為研究對象，利用mRNA差異顯示技術(shù)對羊毛性狀存在顯著差

2、異的綿羊不同部位(肩、腹、腿)皮膚中總RNA進行分析，尋找皮膚中差異表達的基因，經(jīng)過篩選，本研究共獲得差異表達的基因片段4個，其中，差異表達基因SeqⅠ，seqⅡ，seqⅢ為綿羊肩、腹部特異表達的基因，3個基因片段的大小分別為190bp，222bp，175bp，差異表達基因Ⅳ為腿部特異表達的基因，片段大小為255bp。對4個特異基因片段進行克隆、測序，并進行初步的生物信息學(xué)分析，在NCBI數(shù)據(jù)庫中利用blastn進行檢索，未發(fā)現(xiàn)與4個基

3、因片段高度同源的序列。通過NorthernBlot鑒定后，利用組織原位雜交技術(shù)對4個片段在綿羊毛囊的表達情況進行了檢測.檢測結(jié)果顯示在綿羊毛囊中存在4個基因的mRNA，表明4個DNA在綿羊毛囊中轉(zhuǎn)錄形成相應(yīng)的mRNA，4個基因的全序列和具體功能還需進行深入研究。 同時，本研究還利用組織原位雜交技術(shù)對生長激素受體(GHR)基因在綿羊毛囊的表達進行了檢測，GHR為生長激素(GH)的受體，GH作用有兩種方式：一是先作用于肝臟等器官的G

4、HR，產(chǎn)生胰島素樣生長因子(Insulin-likegrowthfactors，IGFs)，IGFs以內(nèi)分泌方式進入血液，與結(jié)合蛋白(IGFBPs)結(jié)合后到達細胞，作用于細胞膜表面的IGF受體(IGFR)，調(diào)節(jié)動物生長發(fā)育；二是GH直接作用于靶器官的GHR，通過旁分泌或自分泌IGFs直接影響細胞的代謝而調(diào)節(jié)器官的生長發(fā)育。本研究的檢測結(jié)果表明在綿羊毛囊存在GHR基因的表達，因此GH對羊毛生長的影響是通過與綿羊毛囊中細胞表面的GHR結(jié)合，