黃瓜CsMAPK基因的植物病毒載體構(gòu)建及長(zhǎng)春花種質(zhì)資源多樣性分析.pdf

1、本文利用簡(jiǎn)并引物PCR和RACE 技術(shù)，從黃瓜中克隆到CsMAPKcDNA的保守序列，運(yùn)用NCBI 中Blastx 進(jìn)行氨基酸同源比對(duì)結(jié)果表明，克隆的這個(gè)保守區(qū)序列與其他植物的MAPK基因有很高的同源性（>80％），其中與擬南芥ATMPK20基因同源性最高（90％）。同源性比對(duì)結(jié)果表明已成功克隆到了黃瓜CsMAPK 保守序列。另外，利用軟件做出的一個(gè)保守區(qū)同源進(jìn)化樹(shù)，同樣說(shuō)明克隆到了黃瓜CsMAPK 保守序列。 為進(jìn)一步驗(yàn)證該序列

2、的功能，基于病毒誘導(dǎo)基因沉默的原理，將構(gòu)建煙草花葉病毒載體，建立黃瓜RNA 干擾體系，對(duì)該基因進(jìn)行功能驗(yàn)證。 由于長(zhǎng)春花具有很強(qiáng)的觀賞價(jià)值，開(kāi)花時(shí)期長(zhǎng)，品種多樣，花色鮮艷，將廣泛應(yīng)用于2010年上海市世博會(huì)。本文利用分子標(biāo)記分析了長(zhǎng)春花種質(zhì)資源遺傳多樣性，為長(zhǎng)春花的遺傳育種研究提供一定參考。 本論文優(yōu)化了長(zhǎng)春花ISSR-PCR 體系，并利用ISSR 分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)40個(gè)長(zhǎng)春花種質(zhì)資源進(jìn)行了遺傳關(guān)系分析，多態(tài)性PCR 擴(kuò)增

3、結(jié)果表明：在115個(gè)位點(diǎn)，其中多態(tài)位點(diǎn)78個(gè)，多態(tài)位點(diǎn)百分率為67.8％，多態(tài)性較高；POPGENE32軟件計(jì)算結(jié)果表明，40個(gè)長(zhǎng)春花品種平均有效等位基因數(shù)為1.6384，Nei 遺傳多樣性指數(shù)平均為0.3735，平均Shannon 信息指數(shù)為0.5546；應(yīng)用NCSYS軟件計(jì)算得到品種間的遺傳相似系數(shù)介于0.150～0.900，平均為0.584。通過(guò)聚類(lèi)分析將這40個(gè)長(zhǎng)春花種質(zhì)分成7組，該聚類(lèi)結(jié)果與以前根據(jù)形態(tài)進(jìn)行的分類(lèi)結(jié)果有極大的相