酥瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性分析.pdf

1、酥瓜(Cucumis melo var.conomon Group)是葫蘆科甜瓜屬甜瓜種薄皮甜瓜的一個變種，品種豐富、性狀差異大，具有獨特“酥脆”風(fēng)味。酥瓜種植主要集中在江淮平原，少量分布于其他地區(qū)。為了明確酥瓜品種之間的親緣關(guān)系，選育優(yōu)良品種，有必要對酥瓜種質(zhì)資源進(jìn)行分類定位、系統(tǒng)分析。本研究從我國江淮流域收集到104份酥瓜種質(zhì)，通過運用RAPD、ISSR和SSR三種分子標(biāo)記方法對其進(jìn)行聚類分析，以明確種質(zhì)間的親緣關(guān)系。主要研究結(jié)果如

2、下：
　　(1)以改良的CTAB法提取酥瓜基因組DNA，建立了適合酥瓜RAPD-PCR反應(yīng)體系:在25μL反應(yīng)體系中，含有引物0.8μmol/L、dNTPs0.3μmol/L、Taq DNA聚合酶1U、Mg2+0.5mmol/L、DNA模板30ng。酥瓜ISSR-PCR反應(yīng)體系:在20μL反應(yīng)體系中，含有引物0.2μmol/L、dNTPs0.3mmol/L、TaqDNA聚合酶1.2U、Mg2+1.0mmol/L、DNA模板70ng

3、、10×Buffer2.0μL。酥瓜SSR-PCR反應(yīng)體系:在20μL反應(yīng)體系中，含有引物0.4μmol/L、dNTPs0.2mmol/L、Taq DNA聚合酶0.5U、Mg2+1.0mmol/L、DNA模板30ng、10×Buffer2.0μL。此三種優(yōu)化好的體系是分析評價酥瓜種質(zhì)資源的遺傳多樣性的基礎(chǔ)。
　　(2)從98條引物中，根據(jù)其多態(tài)性比例篩選出33條具有較高多態(tài)性的引物，17條RAPD引物檢測到85個多態(tài)性位點，10條

4、ISSR引物檢測到50個多態(tài)性位點，6條SSR引物檢測到60個多態(tài)性位點，共計195個多態(tài)性位點進(jìn)行遺傳學(xué)評估。其中SSR08引物的GD最高(0.9826)，ISSR823最低(0.2933)，平均值為0.6583。33條引物的PIC值范圍為28.67％(RAPD18)至98.23％(SSR08)，平均為63.12％。33個標(biāo)記中有15個具有高效性(PIC＞0.7)。
　　(3)收集到104份酥瓜種質(zhì)，并通過聚類分析分為五個主要類

5、群。其中第Ⅰ類群和第Ⅱ類群僅包含一份品種，分別為H14和H29;第Ⅲ類群由五份品種(H11，H13，S8，S13，S39)組成;第Ⅴ類群包含F(xiàn)1-7和F2013，GF，H39和S48共11份品種;剩下的86份組成了第Ⅳ類群，代表了來自江淮地區(qū)廣泛類群。S26和S27之間的最小遺傳距離值為0.2121，表明它們是最相似的種質(zhì)，其次是F1和F2之間的0.2424，而H14和H7，H38，S29，S30，S46在遺傳上最不相似，遺傳距離為0.