天葵提取物對TMV生物活性的研究.pdf

1、植物病毒病是危害農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要病害之一。病毒的絕對寄生性給抗病毒劑的研制帶來困難，至今國內(nèi)外缺少有效的抗病毒藥劑。本文通過活性跟蹤法從中草藥植物天葵(Semiaquilegiaadoxoides)塊根中提取分離對煙草花葉病毒(TMV)具有生物活性的化學(xué)成分，主要結(jié)果如下：　　1.本研究明確了對天葵化學(xué)成分初分離的方法，采用系統(tǒng)溶劑提取法提取天葵中的活性成分，得到天葵石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇和水提取物，并計算了天葵初提物

2、的總提取率為38.76％?！　?.用煙葉半葉枯斑法進(jìn)行抗TMV活性測定，首次發(fā)現(xiàn)天葵塊根七種不同溶劑的提取物都具有一定的作用效果。體外鈍化試驗得出如下結(jié)果：天葵提取物對TMV的鈍化作用范圍為34.12％-68.09％，其中天葵石油醚、丙酮和乙醇提取物的效果最好，鈍化效果分別為68.09％，63.28％和60.59％；在離體保護(hù)和治療作用試驗中，石油醚提取物保護(hù)作用最好，抑制率達(dá)65.26％，丙酮提取物治療抑制率達(dá)34.24％，均顯著高

3、于對照藥劑病毒A?！　?.經(jīng)活性追蹤發(fā)現(xiàn)了天葵石油醚提取物中的三種化合物β-谷甾醇、油酸和硬脂酸對TMV的作用效果，研究結(jié)果表明β-谷甾醇、油酸和硬脂酸都具有一定的抗TMV活性。在濃度10mg/mL時，離體試驗結(jié)果表明硬脂酸對TMV的鈍化效果達(dá)56.86％，β-谷甾醇為50.73％，硬脂酸的保護(hù)作用達(dá)57.48％，而油酸的治療效果為37.41％，均顯著好于對照藥劑病毒A。在活體試驗中，硬脂酸和β-谷甾醇的鈍化效果較好，抑制率分別為60

4、.50％和57.14％，硬脂酸的活體保護(hù)作用最好，抑制率達(dá)48.82％，油酸的抑制率為38.30％，而且對接種病毒后的治療作用也較好，2h、24h、48h后的抑制率分別為58.33％、46.15％、42.27％，試驗中還發(fā)現(xiàn)用離體接種和活體接種方法，對生測結(jié)果有一定的影響，但其趨勢是一致的?！　?.進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，硬脂酸等化合物對TMV侵染的抑制率隨著濃度的增加而升高。硬脂酸對TMV的保護(hù)作用結(jié)果表明在較低的濃度范圍內(nèi)(1.25-5m

5、g/mL)，隨著濃度的升高其抑制作用明顯增強(qiáng)，但在10-20mg/mL濃度范圍內(nèi)，其抑制效果上升緩慢。在1.25mg/mL濃度時，硬脂酸對TMV的保護(hù)效果較弱，抑制率為15.68％，但隨著濃度的上升，其抑制率明顯增強(qiáng)，在2.5mg/mL濃度時，抑制率為30.47％，5mg/mL濃度時，抑制率為57.48％，5mg/mL濃度后，抑制作用相對緩慢上升。而硬脂酸對TMV的治療作用隨濃度增加也呈增長趨勢，在1.25mg/mL濃度時，抑制率為12

6、.81％，當(dāng)濃度為20mg/mL時，抑制率達(dá)37.96％;油酸對TMV的治療效果較好，在1.25mg/mL濃度時，抑制率為21.63％，在20mg/mL時，抑制率為38.71％，β-谷甾醇對TMV治療抑制率在濃度為1.25mg/mL時為18.75％，在20mg/mL濃度時為27.08％，抑制率變化不大?！　?.體外鈍化時間對抑制作用存在一定的影響。β-谷甾醇與TMV等量混合不同時間后接種試驗表明，混合5min后接種，抑制率較低，只有1