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文檔簡介
1、本研究選用了皮埃蒙特牛、南陽牛、皮埃蒙特和南陽牛雜種(皮南牛)和荷斯坦牛作為實驗動物。摸索了毛囊基因組DNA提取方法、篩選了MSTN基因的SNP并應用選擇性PCR擴增方法檢測分析了1008頭皮南牛群體中MSTN基因的分子遺傳多態(tài)性及其與體重(初生重、6月齡重、12月齡重、18月齡重、24月齡重、36月齡重),12月齡體尺(體高、體斜長、坐骨寬、胸圍、管圍)性狀之間的相關性,旨在探索將該基因作為遺傳標記應用于肉牛育種的可行性并為遺傳標記輔
2、助選擇提供理論依據(jù)。取得的結果如下:
1.確立了Proteinase-K裂解法是一種提取毛囊基因組DNA的最佳方法,它具有高效、普遍、省時、安全等優(yōu)點。
2.建立了快速、準確和有效的分析牛MSTN基因多態(tài)性的選擇性PCR方法。
3.皮埃蒙特牛、皮南牛、南陽牛、荷斯坦牛MSTN基因的三個外顯子上SNP的存在情況不一致,其中,南陽牛在第一外顯子的295位上存在A→G的突變、南陽牛和荷斯坦牛第二外顯子
3、的414位上存在C→T的突變、皮埃蒙特牛和皮南牛第三外顯子的938位上存在G→A突變,該突變是錯義突變,其導致第三外顯子上313位氨基酸殘基由半胱氨酸(Cys)→酪氨酸(Tyr)。
4.在皮埃蒙特牛MSTN基因第三外顯子上發(fā)現(xiàn)了AA、AB和BB三種基因型,其基因型頻率分別為0.3、0.6和0.1,等位基因A和B的頻率為0.6和0.4??ǚ綑z驗結果表明這個位點處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。
4、 5.在皮南牛MSTN基因第三外顯子上也發(fā)現(xiàn)了AA、AB和BB三種基因型,其基因型頻率為0.069、0.726和0.205,等位基因A和B的頻率為0.432和0.568??ǚ綑z驗結果表明這個位點處于Hardy-Weinberg不平衡狀態(tài)(P<0.01)。
6.皮南牛MSTN基因第三外顯子多態(tài)性與體尺性狀關聯(lián)分析結果表明:除管圍外,該基因與體尺性狀關聯(lián)達到了極顯著水平(P<0.01),AA基因型個體的體高、體斜長、胸圍
5、、坐骨寬顯著高于AB和BB基因型個體(P<0.05),而AB和BB基因型個體在這四個體尺性狀上則未達到顯著水平(P>0.05),三個基因型在管圍性狀上差異不顯著。公母牛體尺性狀分別分析發(fā)現(xiàn),不論公牛還是母牛分析結果與未分之前一致,AB和BB基因型在體尺性狀上差異不顯著(P>0.05)。
7.皮南牛MSTN基因第三外顯子多態(tài)性與各月齡體重關聯(lián)分析結果表明:該基因與體重性狀關聯(lián)達到了極顯著水平(P<0.01),AA基因型個體體
6、重顯著高于AB和BB基因型個體(P<0.05),AB基因型個體在6、12、18、24和36月齡重性狀上顯著高于BB基因型個體(P<0.05),在初生重上未達到顯著水平(P=0.6815)。將公母牛體重性狀分別分析發(fā)現(xiàn),該基因與體重性狀關聯(lián)除公牛初生重為顯著外,其余達到了極顯著水平(P<0.01),AA基因型個體在體重性狀上顯著高于AB和BB基因型個體(P<0.05),并且公牛的體重高于母牛。母牛AB和BB基因型個體在6、12、18、24
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