一些重要經(jīng)濟畜禽免疫功能基因BAFF的克隆及研究.pdf

1、B淋巴細胞刺激因子(B-cell activating factor belonging to the TNF family，BAFF)，又稱為BLyS、THANK、TALL-1、TNFSF13B，是最新發(fā)現(xiàn)的一個腫瘤壞死因子家族(TNF)的成員，目前的研究結(jié)果充分表明它在人體B淋巴細胞的存活及成熟過程中扮演著關(guān)鍵調(diào)控角色。小鼠在被敲除BAFF基因后，它的次級淋巴器官囊外及過渡區(qū)的B細胞完全缺失，幾乎完全喪失了免疫能力，表明BAFF對維

2、持機體正常免疫功能不可缺少的作用。由于BAFF的特異性B細胞免疫增強活性，2000年11月，美國FDA己正式批準重組人胞外可溶性功能區(qū)BAFF(sBAFF)進入人體Ⅰ期臨床試驗，用于治療普通變異免疫缺乏癥(CVID)和IgA缺陷癥患者。
　　 大量實驗證明，某些重組細胞因子(如IL-2、CD40L)作為免疫佐劑配合疫苗使用可以顯著提高疫苗的免疫效力，同時還可以提高動物對免疫抑制疾病的抵抗能力。細胞因子用于畜禽細菌病毒病的治療還能

3、克服傳統(tǒng)藥物(抗生素及化學藥物)副作用大的缺點。BAFF對激活B細胞的促抗體分泌、促增殖的生物學活性強烈提示：BAFF很可能像己成功應用于經(jīng)濟畜禽疫病防治的細胞因子免疫佐劑IL-2、CD40L一樣，具有分子免疫佐劑樣效應。關(guān)于重要經(jīng)濟畜禽BAFF同源基因的克隆、鑒定及其免疫佐劑效應的理論與應用研究，國際上還未見有報道。
　　 本課題選取了一些重要的與我國人民生產(chǎn)生活密切相關(guān)，具備重要經(jīng)濟價值的畜禽(肉鴨、肉鵝、家豬、奶牛、長毛兔

4、)，利用現(xiàn)代分子生物學、生物化學、細胞生物學等技術(shù)并輔助生物信息學分析手段，對它們的BAFF同源基因進行了克隆、鑒定及生物學活性研究。
　　 我們在國際上：
　　 (1)首先完成了對這些重要經(jīng)濟畜禽BAFF基因的克隆及分子鑒定，所獲得的BAFFcDNA及genomicDNA序列都得到了GenBank數(shù)據(jù)庫的收錄，進一步還對這些BAFF基因展開了多方面未知信息的研究(包括基因組織結(jié)構(gòu)、拷貝數(shù)、mRNA組織表達分布、三級結(jié)構(gòu)

5、預測等分析)。
　　 (2)首先完成了肉鴨和家豬sBAFF蛋白的重組生產(chǎn)和體外活性檢測，并進一步通過體內(nèi)免疫接種實驗證明了鴨sBAFF蛋白具有較強的分子免疫佐劑活性，為最終鴨sBAFF作為免疫佐劑的開發(fā)與應用提供了理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。其作用分子機制的研究本實驗室正在進行之中。
　　 (3)首先通過體外活性實驗證明了鴨與人sBAFF蛋白，及豬與人sBAFF蛋白彼此間具有功能交叉活性(functional cross-rea