C-末端驅(qū)動(dòng)蛋白KIFC1在中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)精子頂體形成過程中作用的分子機(jī)制.pdf

1、本文采用本文采用免疫熒光、免疫電鏡和western blot的方法，對(duì)驅(qū)動(dòng)蛋白KIFC1在中華絨螯蟹精子發(fā)生過程中的空間分布與表達(dá)進(jìn)行研究。精子發(fā)生是在生精小管內(nèi)發(fā)生的一個(gè)復(fù)雜過程，精原細(xì)胞經(jīng)過一系列有絲分裂和減數(shù)分裂，產(chǎn)生圓形精細(xì)胞；精細(xì)胞又經(jīng)歷了劇烈的形態(tài)重組，最終形成一個(gè)具有受精能力的成熟精子。微管與細(xì)胞內(nèi)的各種生命活動(dòng)都是密切相關(guān)的，如維持細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞器的定位、細(xì)胞產(chǎn)物的分泌、細(xì)胞分裂時(shí)的染色體運(yùn)動(dòng)等，還可能與

2、胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞膜成分的運(yùn)動(dòng)有關(guān)。而驅(qū)動(dòng)蛋白超家族是沿微管運(yùn)輸各種細(xì)胞必需的細(xì)胞器和生物大分子的一類馬達(dá)蛋可能在細(xì)胞器的轉(zhuǎn)運(yùn)過程中起著重要的作用。驅(qū)動(dòng)蛋白系統(tǒng)的分為3個(gè)家族：N-末端、C-末端和M-末端。常規(guī)的驅(qū)動(dòng)蛋白(N-末端驅(qū)動(dòng)蛋白)是向著微管的加端移動(dòng)，而C-末端驅(qū)動(dòng)蛋白則是向著微管的減端運(yùn)動(dòng)。C-末端驅(qū)動(dòng)蛋白KIFC1在精子頂體的形成和細(xì)胞核的形變過程中起著重要的作用。本研究首次確定KIFC1在中華絨螯蟹精巢中表達(dá)，并首次觀察

3、到該物種的精子形成過程及驅(qū)動(dòng)蛋白KIFC1在精子發(fā)生過程中的空間分布。將對(duì)其進(jìn)一步研究提供有價(jià)值參考，并對(duì)未來進(jìn)一步研究KIFC1在其它較低等動(dòng)物的精子發(fā)生中的機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
　　 我們探索了在中華絨螯蟹(Erioeheir sinensis)精子發(fā)生過程中KIFC1的表達(dá)和定位，KIFC1在精原細(xì)胞和精母細(xì)胞時(shí)期在細(xì)胞核周圍大量聚集，少量的信號(hào)也在細(xì)胞核中表達(dá)，在精細(xì)胞發(fā)育早期，KIFC1逐步運(yùn)動(dòng)到細(xì)胞核的一端，分布在原頂體

4、顆粒集中的細(xì)胞核膜處，運(yùn)輸高爾基體或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡到頂體發(fā)生部位。精細(xì)胞中期原頂體顆粒形成原頂體囊，KIFC1運(yùn)輸大量原頂體顆粒至原頂體囊處。精細(xì)胞后期，細(xì)胞核凹陷程度加深逐漸形成杯狀細(xì)胞核，包裹住頂體，KIFC1主要在精子頂體處表達(dá)，可能起到穩(wěn)定頂體結(jié)構(gòu)的作用。免疫熒光和免疫電鏡的結(jié)果顯示在成熟的中華絨螫蟹精子中，KIFC1主要集中在由頭帽和頂體管組成的穿孔器處，少量在細(xì)胞核中也有表達(dá)。我們證實(shí)了在中華絨螯蟹精子發(fā)育過程中，KIFC1可能