草魚“肝膽綜合癥”病理變化及菜籽粕對(duì)其肝臟毒性的研究.pdf

1、本文采用組織學(xué)和生物化學(xué)的方法，對(duì)肝臟病變草魚的血液生化指標(biāo)和肝臟組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，探討草魚肝膽綜合癥的病理變化；同時(shí)從營養(yǎng)毒理學(xué)的角度研究了飼料中不同比例菜籽粕（0、16％、32％、48％和64％）對(duì)草魚幼魚生長、生化特性、魚體組成、肝臟糖原和脂肪含量以及肝臟組織結(jié)構(gòu)變化等方面的影響，為養(yǎng)殖草魚過程中肝膽綜合癥的成因做理論基礎(chǔ)；并從細(xì)胞水平研究了異硫氰酸丙烯酯對(duì)原代培養(yǎng)肝細(xì)胞的毒性以探索菜粕對(duì)草魚毒性的機(jī)制。結(jié)果如下：
　　

2、1．與肝臟正常草魚相比，肝臟病變組草魚肝臟顏色變淡、甚至變綠；肝細(xì)胞發(fā)生一定程度的脂肪變性，甚至脹亡壞死；AST、ALT、DB、TB、TG、CRE均顯著升高，BUN和CHO含量有增加趨勢但差異不顯著，UGLU含量和ALP活性無顯著性差異；SOD顯著性降低，補(bǔ)體C3、 C4含量有所降低但差異不顯著；肝糖原顯著性降低，肝中脂肪含量有所增加但差異不顯著。
　　 2．不同菜籽粕替代水平實(shí)驗(yàn)結(jié)果為：對(duì)照組增重率最高，菜籽粕含量達(dá)32％以上

3、時(shí)與對(duì)照組相比顯著降低；菜籽粕含量在0～48％各組，日攝食率無顯著差異，64％組與其它各組相比顯著降低；飼料轉(zhuǎn)化率以16％組最高，32％組最低，但各組間均無顯著差異；特定生長率隨著飼料中菜籽粕比例的增加而下降，其中以對(duì)照組最高，32％組與對(duì)照組相比顯著性降低；蛋白質(zhì)效率以16％組最高，48％和64％組與其它各組相比顯著降低；粗蛋白質(zhì)、粗灰分和水分含量均無顯著差異；32％組粗脂肪含量最高，16％組其次，48％組和64％組與對(duì)照組相比無顯著

4、差異，顯著低于16％和32％組。
　　 隨著菜籽粕水平的增加，草魚血清中膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）的含量逐漸升高但無顯著差異，當(dāng)菜籽粕含量在32％以上時(shí)血清尿素氮（BUN）顯著升高，各組葡萄糖（GLU）、總蛋白（TP）、總膽紅素（TB）無顯著性差異，天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）呈明顯上升趨勢，但無顯著性差異；草魚肝臟的糖原和脂肪沉積量有顯著變化，糖原含量以32％組含量最低，第48％組含量最高，16％

5、組、48％和對(duì)照組組間無顯著性差異，32％組和64％組間無顯著性差異，但與對(duì)照組、16％組和48％組相比顯著性降低；添加菜籽粕組脂肪含量與對(duì)照組相比顯著升高，其中以64％組含量最高，32％組其次，64％組和32％組間無顯著性差異，而16％組和48％組顯著性低于第32％組和64％組；組織切片觀察到，在添加菜籽粕16％組發(fā)現(xiàn)有出現(xiàn)脂肪變性的細(xì)胞，添加菜籽粕32％組，同樣存在脂肪變性，同時(shí)可見部分細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞核發(fā)生偏移的現(xiàn)象，隨著菜籽粕水平的

6、增加，脂肪變性加劇，脂肪沉積程度更甚，對(duì)肝臟的損傷更嚴(yán)重。
　　 3．異硫氰酸丙烯酯（AITC）對(duì)培養(yǎng)的草魚肝細(xì)胞有影響。未加藥物對(duì)照組以成活細(xì)胞為主，出現(xiàn)部分死亡細(xì)胞；10-5mol/L和10-6 mol/L AITC濃度組細(xì)胞生長情況良好與對(duì)照組無區(qū)別；10-3mol/L AITC和10-4 mol/L AITC藥物組可見一些貼壁細(xì)胞成活細(xì)胞，部分細(xì)胞開始脫壁，逐漸變圓，且發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核偏移現(xiàn)象；10-2mol/L AITC高濃

7、度組幾乎全部細(xì)胞死亡后懸浮于培養(yǎng)基中；AST、ALT活性以10-2組最低，顯著低于對(duì)照組；其它各組與對(duì)照組相比AST活性升高，但無顯著差異；10-3mol/L，和10-4 mol/L AITC濃度組ALT顯著高于對(duì)照組和10-2組，10-5 mol/L、10-6 mol/L組與空白對(duì)照組相比較無顯著差異；LDH測定值以10-2 mol/L組最高，10-3mol/L組次之，顯著高于對(duì)照組，10-4 mol/L、10-5mol/L和10-6