綠僵菌在土壤中宿存時空動態(tài)研究.pdf

1、金龜子綠僵菌(Metarhizium anisopliae)是一種重要的昆蟲病原真菌,對多種農(nóng)林害蟲有明顯的防治效果,其施用后在田間存活狀態(tài)及生態(tài)效應需要進一步研究。本論文通過在河北滄州進行花生池栽試驗,探究了花生生長期間綠僵菌在土壤中宿存量的時空動態(tài)變化,研究結果如下:
　　 首先,篩選確定了優(yōu)良的選擇性培養(yǎng)基,其組分為每1000mL含蔗糖20g,酵母提取物10g,瓊脂粉20g,多果定50mg,氯霉素200mg。該培養(yǎng)基對土壤

2、中細菌和非目標真菌的抑制率能夠達到99.9％,對綠僵菌分離效率達到72.4％。
　　 通過均勻施菌處理研究了相對于植株不同距離、不同深度土壤中綠僵菌的存活數(shù)量隨時間的變化。結果表明,總體上綠僵菌在施入土壤后60d內(nèi)存活數(shù)量迅速下降,之后下降速度放緩或在一定范圍波動。在3cm深度的距植株12.5cm、25cm和37.5cm三個距離的土層,30 d時綠僵菌菌落形成單位數(shù)(Colony forming units,CFU)分別下降至施

3、菌時的73.6％、70.7％和52.4％,在60d時這三個在位置上的CFU下降至28.4％、24.7％、26.1％,在90d時CFU下降至20％左右,之后緩慢回升,150d時回升至58.4％、34.4％、33.2％；在15cm深度的距植株12.5cm、25cm和37.5cm三個距離的土層,綠僵菌宿存量在60d內(nèi)均迅速下降至最初施菌時的50％以下,之后一段時期CFU維持相對穩(wěn)定,在120～150d即鄰近花生收獲期出現(xiàn)小幅度的下降,最終降低

4、至接近于施菌前的數(shù)值；在30cm深度,為未施菌土層,在距植株12.5cm、25cm和37.5cm三個距離上,檢測到的CFU始終很低,與對照無顯著差異。在植株根部正下方30cm深度,土樣的CFU始終很低,與初始值無顯著差異。根周圍土樣在第90d時降至最低,為對照的23.6％,在150d時恢復至48.3％。根際土樣CFU在30d時下降至最初施菌時的19.3％,之后經(jīng)過波動并逐漸上升,在120d時回升到76.0％。從空間分析發(fā)現(xiàn),綠僵菌施用到

5、土壤后的60d內(nèi),在距植株12.5cm、25cm和37.5cm的水平在位點上,遠處CFU比近處的下降較快,差異顯著；這三個水平位點的3cm和15cm深度土層中,CFU在前90d的下降趨勢相近,均降低至約20％,但隨后前者CFU出現(xiàn)回升,且離植株較近的12.5cm處的回升速度較快,而15cm處得CFU持續(xù)穩(wěn)定或緩慢下降；根周圍和根際CFU也在90d后明顯回升,且根際的回升更快,差異顯著。
　　 通過不均勻施菌處理,即在網(wǎng)筐內(nèi)或外施

6、菌,研究了綠僵菌在土壤中的生長趨向性。網(wǎng)筐外施菌處理結果表明,隨著時間推移和花生植株的生長,筐壁內(nèi)側的上層、中層和下層的土樣中綠僵菌的CFU值,表現(xiàn)為先有一定上升、然后小幅度波動；在第30d時,上層升幅最高,達到空白對照的7.4倍,在60d～150d的各次取樣無顯著變化,相互間無顯著差異,根際CFU無明顯變化,而在第60d時,綠僵菌CFU上升到600,在90d～120d上升較快,1.50d時CFU增加至2820,達到空白對照的10.8倍

7、。網(wǎng)筐內(nèi)施菌處理的結果表明,筐壁外側的上層、中層和下層的土壤在各時間取樣之間變化差異不顯著,僅在第60d時綠僵菌CFU略有上升,每克土樣CFU數(shù)值范圍為110～450,但隨后的各次取樣分別小幅上升或下降,在第150d時,上層土樣中綠僵菌CFU值最高,為750；筐壁內(nèi)側上、中、下層土壤的綠僵菌CFU總體為隨時間波動下降,在第150d時,各層的CFU值趨于相同。因此,在設定的距離植株12cm左右的邊界處,不論邊界內(nèi)側或外側施菌,綠僵菌都有由