幾丁質合成影響蝗綠僵菌毒力的機制.pdf

1、幾丁質合成影響蝗綠僵菌毒力的機制重慶大學碩士學位論文(學術學位)學生姓名：張俊杰指導教師：金凱教授專業(yè)：生物學學科門類：理學重慶大學生命科學學院二O一七年四月國家自然科學基金面上項目：幾丁質合成對綠僵菌侵染致病的作用機制(項目編號：31471820，2015.12018.12)。重慶大學碩士學位論文中文摘要I摘要蝗綠僵菌是研究比較廣泛的昆蟲病原真菌，闡明其侵染致病的分子機制十分必要。幾丁質是細胞壁的重要成分，影響真菌的生長與毒力。合成幾

2、丁質的關鍵酶是幾丁質合成酶。目前，對于幾丁質合成影響毒力的機制在昆蟲病原真菌并沒有報道。本文以昆蟲病原真菌的模式生物蝗綠僵菌為研究對象，闡明幾丁質合成影響蝗綠僵菌毒力的機制。本文的研究結果如下：1.MaChsIII、MaChsV、MaChsVII影響蝗綠僵菌毒力。MaChsI、MaChsII、MaChsIV、MaChsVI并不影響綠僵菌的毒力。ΔMaChsIII、ΔMaChsV點滴毒力降低。有意思的是，ΔMaChsV注射毒力增強。與其它

3、敲除菌株不一樣的是，ΔMaChsVII點滴毒力基本喪失，注射毒力極大的降低。2.ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII在東亞飛蝗體表附著階段有缺陷。ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII疏水性降低，三個敲除菌株的疏水性只有野生型的25%左右。3.ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII在體壁穿透階段有缺陷。ΔMaChsIII與ΔMaChsVII在東亞飛蝗后翅上的萌發(fā)減慢，ΔMaChsV在東亞

4、飛蝗后翅上的萌發(fā)加快。ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII在附著胞形成階段有缺陷，并且ΔMaChsV、ΔMaChsVII敲除菌株形成的附著胞在形態(tài)上與WT有很大的差異。4.MaChsIII、MaChsV、MaChsVII敲除以后，蝗綠僵菌更加容易被東亞飛蝗識別。5.MaChsIII、MaChsV、MaChsVII三個基因對于蝗綠僵菌細胞壁的完整性是必須的，敲除這三個基因以后，蝗綠僵菌細胞壁變得很脆弱。6.幾丁質合成酶家

5、族成員影響蝗綠僵菌細胞壁的成分。MaChsI、MaChsII、MaChsIV不影響蝗綠僵菌細胞壁的成分。與WT相比，ΔMaChsVI細胞壁中幾丁質成分降低了37%，ΔMaChsV和ΔMaChsVII細胞壁中的幾丁質與β13葡聚糖含量顯著增高。ΔMaChsV細胞壁中的甘露糖蛋白含量降低了10%，而在ΔMaChsIII中，甘露糖蛋白的含量增加了20%。幾丁質合成影響蝗綠僵菌的毒力，MaChsIII、MaChsV、MaChsVII三個基因敲除