溫州蜜柑與有籽甜橙原生質(zhì)體融合創(chuàng)造無(wú)核新種質(zhì).pdf

1、我國(guó)作為柑橘起源地，地方良種很多，但栽培品種柚、椪柑及普通甜橙多是有核甚至多核的，因而影響了其商品價(jià)值和國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力。有目的地實(shí)現(xiàn)我國(guó)地方特色品種無(wú)核化一直是我國(guó)廣大柑橘育種工作者的目標(biāo)。原生質(zhì)體對(duì)稱融合不僅能獲得體細(xì)胞雜種而且還能獲得只轉(zhuǎn)移胞質(zhì)基因組的胞質(zhì)雜種。溫州蜜柑（Citrus unshiu Marc．）為細(xì)胞質(zhì)雄性不育（CMS）柑橘類型，本研究旨在針對(duì)性地開(kāi)展溫州蜜柑與其它多籽柑橘類型間的對(duì)稱融合研究，若能獲得二倍體葉肉親本型胞

2、質(zhì)雜種，則可能實(shí)現(xiàn)溫州蜜柑胞質(zhì)雄性不育性狀的有效轉(zhuǎn)移，可一步獲得二倍體無(wú)核果實(shí)；若獲得體細(xì)胞雜種，則可用于三倍體無(wú)核育種。主要研究結(jié)果如下：
　　 1．以國(guó)慶1號(hào)溫州蜜柑愈傷組織為懸浮系親本，分別與桃葉橙（C．sinensis（L．）Osbeek）、新會(huì)橙（C．sinensis（L．）Osbeck）、早金甜橙（C．sinensis（L．）Osbeck）椏柑（C．reticulata）等中國(guó)地方特色柑橘良種的葉肉親本對(duì)稱融合，獲得

3、國(guó)慶1號(hào)+桃葉橙再生植株20棵。再生的植株均為四倍體體細(xì)胞雜種；SSR分析表明其核基因組來(lái)自雙親之和，TAA15位點(diǎn)上檢測(cè)到其核基因組發(fā)生重組。線粒體DNA（mtDNA）的CAPS分析表明再生植株的mtDNA均來(lái)自愈傷組織親本，即國(guó)慶1號(hào)。cpSSR分析表明再生植株的葉綠體DNA（cpDNA）也來(lái)自愈傷組織親本。其它幾個(gè)組合僅再生了愈傷組織。
　　 2．將本實(shí)驗(yàn)室前期融合得到的崇義野橘+枳橙，崇義野橘+早花檸檬體細(xì)胞雜種胚狀體誘

4、導(dǎo)生芽、生根。其中獲得崇義野橘+早花檸檬再生植株9棵，倍性分析表明再生植株中二倍體4株、四倍體2株、六倍體3株；崇義野橘+枳橙獲得再生植株53棵，倍性分析表明再生植株均為二倍體，根據(jù)成熟葉片的形態(tài)可分為柳葉型（7棵）和崇義野橘再生型（46棵）兩類。
　　 本研究利用原生質(zhì)體融合技術(shù)，最終獲得了一批體細(xì)胞雜種。獲得的可能具有雙親優(yōu)良性狀的體細(xì)胞雜種將來(lái)可能直接用做接穗，或用于三倍體無(wú)核育種；獲得的可能帶有野生橘有益性狀的體細(xì)胞雜種