山楂和桃遺傳多樣性的RAPD分析及甜椒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小分子量熱激蛋白基因的克隆與功能分析.pdf

1、本論文內(nèi)容由三部分組成:山楂遺傳多樣性的RAPD分析,桃遺傳多樣性的RAPD分析和甜椒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小分量熱激蛋白基因的克隆與功能分析。
　　第一部分采用RAPD技術(shù),探討了山東境內(nèi)的38個(gè)山楂種質(zhì)的親緣關(guān)系。從120個(gè)引物中篩選出17個(gè)引物對(duì)所選山楂種質(zhì)的DNA樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增,共得到252條譜帶,205條具有多態(tài)性,多態(tài)性比率平均高達(dá)81.3％,其中特異性譜帶37條,充分體現(xiàn)了山楂種質(zhì)豐富的遺傳多樣性。并利用NTSYS軟件和UPGM

2、A法對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行了種質(zhì)間相似系數(shù)的計(jì)算及聚類分析,結(jié)果表明種質(zhì)間相似系數(shù)在0.73~0.91之間,實(shí)生楂與其它山楂種質(zhì)親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。本試驗(yàn)在取材、引物選擇和PCR擴(kuò)增程序上與前人都有所不同。本實(shí)驗(yàn)對(duì)山楂遺傳多樣性的RAPD分析豐富了該組植物系統(tǒng)學(xué)研究?jī)?nèi)容,為我國(guó)山楂種質(zhì)資源的分子生物學(xué)方面的研究提供依據(jù)。
　　第二部分以包括黃桃新品種‘黃金冠’在內(nèi)7個(gè)品種為材料,利用RAPD技術(shù)對(duì)‘黃金冠’的起源進(jìn)行了研究。從80個(gè)隨機(jī)引物中篩

3、選出15個(gè)重復(fù)性好、條帶清晰的多態(tài)性引物對(duì)桃品系進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,共擴(kuò)增出84條譜帶,擴(kuò)增產(chǎn)物譜帶數(shù)從3~10條不等,產(chǎn)物大小從250~3000bp不等,表明以上桃品種具有豐富的遺傳多態(tài)性。利用NTSYS軟件和UPGMA聚類法對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行了品種間相似系數(shù)的計(jì)算及聚類分析。結(jié)果顯示品種間相似系數(shù)在0.78~0.86之間,其中黃桃19和其它桃品系親緣關(guān)系最遠(yuǎn),‘黃金冠’和錦黃2號(hào)的親緣關(guān)系最近。桃遺傳多樣性的RAPD分析為一些特殊種質(zhì)資源

4、的開發(fā)利用及保存提供了理論依據(jù)。
　　第三部分以溫度敏感植物甜椒為試驗(yàn)材料,通過RT-PCR、3′-RACE和5′-RACE的方法成功克隆得到了甜椒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小分子量熱激蛋白基因(ERsHSP),并利用BLAST、DNAMAN等軟件對(duì)該基因與其它物種中的同源基因之間進(jìn)行了核苷酸序列和氨基酸序列的分析,發(fā)現(xiàn)同源性分別高達(dá)74%和76%。并構(gòu)建了表達(dá)載體,將ERsHSP基因轉(zhuǎn)化煙草,結(jié)果表明ERsHSP基因可以提高轉(zhuǎn)基因煙草植株的高溫和低