甜椒小分子量熱激蛋白基因的克隆及其在溫度逆境下的功能分析.pdf

1、 本研究從甜椒葉片中分離到小分子量熱激蛋白基因CaHSP26和CaHSP18。表達(dá)模式和功能分析表明，這兩個(gè)基因的表達(dá)受高溫逆境誘導(dǎo)，在高溫脅迫下對(duì)植物、大腸桿菌的蛋白有保護(hù)作用；低溫條件下過量表達(dá)對(duì)煙草、大腸桿菌均有保護(hù)作用。將甜椒葉綠體sHSP轉(zhuǎn)入煙草，研究了高溫和低溫脅迫條件下葉綠體sHSP對(duì)光系統(tǒng)的保護(hù)作用，研究成果表明：煙草中過量表達(dá)CaHSP26在高溫和低溫條件下對(duì)光系統(tǒng)有保護(hù)作用。 本實(shí)驗(yàn)利用同源序列設(shè)計(jì)兼并

2、引物，通過RT-PCR的方法從甜椒葉片克隆到葉綠體小分子量熱激蛋白基因的中間片段，通過同源序列比較發(fā)現(xiàn)，甜椒葉綠體小分子量熱激蛋白的序列與煙草、番茄、擬南芥的葉綠體小分子量熱激蛋白的序列高度同源。表達(dá)分析表明CaHSP26受高溫脅迫強(qiáng)烈誘導(dǎo)表達(dá)，以葉片中誘導(dǎo)表達(dá)水平最高，其次為果實(shí)、莖，根與花中表達(dá)量最少。構(gòu)建了原核表達(dá)載體，常溫下在大腸桿菌中分別表達(dá)CaHSP26和CaHSP18對(duì)大腸桿菌的生長沒有影響，但是均能提高大腸桿菌在高溫脅迫