懷牛膝幼苗逆境脅迫反應(yīng)及抗逆基因轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、懷牛膝為多年生草本植物，是“四大懷藥之一”。但是病害、干旱、低溫等逆境不利于懷牛膝的生長(zhǎng)發(fā)育，不僅影響了懷牛膝的質(zhì)量，且造成大面積減產(chǎn)。因此，急需研究懷牛膝應(yīng)對(duì)逆境脅迫的調(diào)控機(jī)制，提高抗性。本文以風(fēng)箏棵和核桃紋懷牛膝為材料，研究了NaCl、鏈霉素、低溫、干旱對(duì)懷牛膝幼苗生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)各處理下懷牛膝發(fā)芽率均降低，根的生長(zhǎng)受到不同程度的抑制，其中受NaC1影響最嚴(yán)重，且影響程度隨脅迫程度的加深而增大，但是干旱和低溫脅迫的影響不大，鏈霉素對(duì)

2、種子的萌發(fā)也有一定抑制作用，從種子的發(fā)芽率來(lái)看，風(fēng)箏棵對(duì)逆境脅迫的耐受性比核桃紋強(qiáng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，NaCl、鏈霉素處理的懷牛膝品種的可溶性糖含量均增加，而在NaCl脅迫下懷牛膝的可溶性蛋白含量下降，POD、CAT活性降低，K、Fe、Ca元素的含量也降低。但是，低濃度鏈霉素使兩個(gè)懷牛膝品種的可溶性蛋白、微量元素含量增加，POD和CAT酶活性增強(qiáng)，但在高濃度時(shí)各種指標(biāo)卻降低。
　　 從無(wú)菌苗培養(yǎng)方法、植物激素對(duì)牛膝愈傷組織誘導(dǎo)及分

3、化的影響等方面進(jìn)行研究，優(yōu)化了懷牛膝植株的再生體系：用0.1％升汞滅菌3min，MS固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，種子發(fā)芽率達(dá)100％，誘導(dǎo)莖段愈傷組織的最佳激素組合為0.5mg/L6-BA和1.0mg/L2.4-D，愈傷組織誘導(dǎo)率為100％，誘導(dǎo)懷牛膝莖段分化產(chǎn)生芽的最佳激素組合為1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA，芽再生率達(dá)到85.76％，生根培養(yǎng)基為MS+1mg/LIBA，生根率達(dá)100％。另外，利用根癌農(nóng)桿菌GV3101介導(dǎo)懷牛膝莖