幾種鰻鱺苗種的種質(zhì)鑒定及其遺傳多樣性研究.pdf

1、鰻鱺具有很高的營養(yǎng)價值和藥用價值，為上等的食用魚，民間作為滋補(bǔ)食品。我國是世界上最大的鰻鱺生產(chǎn)國，鰻鱺產(chǎn)品出口額在單項(xiàng)農(nóng)產(chǎn)品出口額中占據(jù)首位。由于人們對我國沿海日本鰻鱺苗種資源的過度捕撈，導(dǎo)致日本鰻鱺苗種種質(zhì)資源極度匱乏且供給不穩(wěn)定，因此最近幾年我國引進(jìn)了新的鰻鱺品種進(jìn)行養(yǎng)殖。鰻鱺形態(tài)十分相似，因此在新品種引進(jìn)后容易造成種質(zhì)資源混亂。本研究利用AFLP技術(shù)及線粒體DNACOⅠ和COⅡ分子標(biāo)記技術(shù)對幾種鰻鱺的苗種進(jìn)行種質(zhì)鑒定，并研究幾種鰻

2、鱺苗種對高低溫的耐受性，以期為鰻鱺新品種的推廣養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)資料。
　　1．以日本鰻鱺（Anguilla japonica）、歐洲鰻鱺（A.anguilla）、美洲鰻鱺（A.rostrata）、印尼鰻鱺（A.bicolor Pacifica）、菲律賓鰻鱺（A.mormorata）五種鰻鱺的幼鰻為實(shí)驗(yàn)對象，討論其對極限高、低溫的耐受性及種間差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：不同種的鰻鱺幼鰻對環(huán)境溫度的耐受范圍具有種間差異。日本鰻鱺、美洲鰻鱺、歐洲鰻

3、鱺、印尼鰻鱺、菲律賓鰻鱺高溫“死亡高峰溫度”分別為39℃、38℃、37.5℃、39℃、38℃，日本鰻鱺對高溫的耐受性最好，歐洲鰻鱺耐受性最差，但種間差異不顯著；日本鰻鱺、美洲鰻鱺對低溫的耐受性最好，能在冰水混合物中生存，歐洲鰻鱺、菲律賓鰻鱺、印尼鰻鱺對低溫耐受性依次減弱，低溫“死亡高峰溫度”分別為2℃、5℃、10℃。
　　2．利用擴(kuò)增片段長度多態(tài)性（Amplified fragment length polymorphism，AF

4、LP）標(biāo)記技術(shù)研究日本鰻鱺、歐洲鰻鱺、美洲鰻鱺、非洲鰻鱺、印尼鰻鱺、菲律賓鰻鱺6種鰻鱺群體的遺傳多樣性和群體間遺傳分化。8對引物在180個個體中共擴(kuò)增出519個位點(diǎn)，遺傳多樣性結(jié)果顯示，6種鰻鱺的多態(tài)位點(diǎn)比例（P）介于54.62％-63.85%之間，其中印尼鰻多態(tài)位點(diǎn)比例最低為54.62%，歐洲鰻多態(tài)位點(diǎn)比例最高為63.85%；平均每位點(diǎn)等位基因數(shù)（A）介于1.5462-1.6385之間，平均為1.5918；平均每位點(diǎn)有效等位基因數(shù)（A

5、e）介于1.2657-1.3289之間，平均為1.3040；Shannon氏指數(shù)（I）介于0.2520-0.3066之間，平均為0.2810；Nei’s基因多樣性指數(shù)（H）為0.1632-0.2002，平均為0.1837，說明6種鰻鱺都具有較高的遺傳多樣性。群體間遺傳分化結(jié)果顯示歐洲鰻與美洲鰻遺傳距離（D）最小為0.0543，其次是菲律賓鰻和印尼鰻，遺傳距離為0.1253，其余鰻之間的遺傳距離介于0.2377-0.3030之間。通過聚類

6、分析結(jié)果顯示，6種鰻鱺聚為2大類，美洲鰻、歐洲鰻聚為一支然后和非洲鰻再聚為一支，印尼鰻、菲律賓鰻聚為一支然后和日本鰻再聚為另一支。同時利用AFLP技術(shù)對6種鰻鱺進(jìn)行種質(zhì)鑒定，通過E-AAG/M-CGT和E-AAG/M-CTT兩對引物中的5個特異性位點(diǎn)能夠?qū)?種鰻鱺進(jìn)行有效的鑒別。
　　3．對日本鰻鱺、歐洲鰻鱺、美洲鰻鱺、非洲鰻鱺、印尼鰻鱺、菲律賓鰻鱺6種鰻鱺線粒體DNA細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ（COⅠ）和細(xì)胞色C素氧化酶亞基Ⅱ（CO