鮑遺傳多樣性與種質(zhì)資源鑒定的研究.pdf

1、利用RAPD技術(shù)對皺紋盤鮑(Haliotis discus hannai Ino)、雜色鮑(Haliotis diversicolar Reeve)及日本黑鮑(Haliotis discus discus hannai Ino)進(jìn)行了遺傳多樣性和遺傳差異分析,并檢測到種群的一些特異性遺傳標(biāo)記.在鮑DNA提取中,嘗試先將材料用75％乙醇固定,然后再提取DNA,對其檢測并應(yīng)用于RAPD分析.結(jié)果表明,用乙醇固定材料提取DNA是一種切實可行的

2、方法.通過對鮑基因組DNA RAPD-PCR反應(yīng)條件的摸索比較,確定了鮑DNA的RAPD-PCR反應(yīng)體系,反應(yīng)總體積為25μl,模板DNA40ng,dNTP各200μmol,primer(隨機(jī)引物)40ng,Taq聚合酶2u,Mg<'2+>2mmol,預(yù)變性94℃5min,共進(jìn)行40個循環(huán),包括變性94℃1min,退火37℃1min,延伸72℃1min,最后再延伸10min.擴(kuò)增產(chǎn)物用EB染色,用1.3％瓊脂糖凝膠電泳分離.對皺紋盤鮑(

3、Haliotis discus hannai Ino)、雜色鮑(Haliotis diversicolar Reeve)和日本黑鮑(Haliotis discus discus hannai Ino)三個種群進(jìn)行了RAPD檢測,共檢測到213個位點,在群體之間和個體之間都存在差異.利用PopGen32軟件計算各群體的多態(tài)性比例、群體遺傳雜和度和群體間的遺傳距離,多態(tài)比例分別為46.35％、49.30％和52.11％,三個群體的平均雜合度

4、為0.1557、0.1683和0.1860.依遺傳距離用UPGMA方法建立了三個群體的系統(tǒng)關(guān)系圖,結(jié)果表明皺紋盤鮑和日本黑鮑有很近的遺傳關(guān)系,二者與雜色鮑都相距較遠(yuǎn).對大連、青島的兩個雜交鮑群體和兩個自然種群進(jìn)行了分析比較,共檢測到173個位點.在自然種群和雜交群體之間及兩個雜交群體之間都存在差異,利用PopGen32軟件計算了各個群體的多態(tài)位點比例、平均遺傳雜合度、Shannon多態(tài)性指數(shù)和群體間的遺傳距離.結(jié)果表明,雜交群體的遺傳多