主要梨品種細(xì)胞質(zhì)遺傳多態(tài)性分析.pdf

1、梨屬于薔薇科的梨亞科，品種很多，長期以來在分類上存在很多的問題。本論文的目的是研究主要梨品種細(xì)胞質(zhì)遺傳多態(tài)性。采用PCR-RFLP方法，對提取出的總DNA用10對葉綠體通用引物進(jìn)行擴(kuò)增，對PCR產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶AluI，HaeIII，HinfI，Hin6I，RsaI，MvaI和TaqI進(jìn)行酶切，對19種梨（包括新疆梨系統(tǒng)、白梨系統(tǒng)、西洋梨系統(tǒng)、秋子梨系統(tǒng)、杜梨、沙梨系統(tǒng)）的葉綠體基因組trnS-trnfM非編碼區(qū)進(jìn)行克隆、測序。應(yīng)用D

2、PS v7.05和DNAMAN、DNAStar、ClustalX-1.83、PHYLIP-3.68軟件進(jìn)行分析。通過序列比對，再進(jìn)行聚類分析，最后依據(jù)所得結(jié)果確定所測分子序列的親緣關(guān)系，構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。
　　 結(jié)果顯示：10對引物中只有7對（cp01，cp 02，cp 03，cp 04，cp 06，cp 09，cp 10）能在梨屬植物上擴(kuò)增出一條特異性譜帶，這說明梨屬植物葉綠體基因組序列十分保守，3個引物對（cp05，cp07，

3、cp08）不能在梨屬植物上擴(kuò)增出譜帶。931份引物對/酶切組合中，cp09/MvaI，cp03/Hin6I的酶切位點有顯著差異。
　　 對梨屬植物的cpDNA trnS-trnfM區(qū)域進(jìn)行克隆、測序，所得的序列長度為: 庫爾勒香梨和鴨梨的序列最長（1642bp），蘋果梨、早酥梨、慈梨、象牙、翠伏的序列最短（1272bp）。
　　 用DNAMAN軟件對序列進(jìn)行比對分析：庫爾勒香梨與白梨系統(tǒng)的同源性為：85.01％，與新疆梨

4、系統(tǒng)的同源性為：78.60％，與西洋梨系統(tǒng)的同源性為：78.28％，與沙梨系統(tǒng)的同源性為：77.47％，與秋子梨系統(tǒng)的同源性為：77.91％。
　　 根據(jù)ClustalX軟件完全比對的結(jié)果，用PHYLIP-3.68軟件的鄰接法對cpDNA trnS-trnfM區(qū)域序列變異位點構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。黑酸梨和京白聚為一類，伏茄和身不知聚為一類，冬巴和新世紀(jì)聚為一類。庫爾勒香梨和新疆句句梨、金川雪梨、京白、黑酸梨聚為一類。
　　 本

5、實驗的主要結(jié)論：庫爾勒香梨與蘋果梨，鴨梨，早酥，慈梨，碭山梨，金川雪梨，新疆句句梨，錦豐的平均距離系數(shù)較小，與其他梨的平均距離系數(shù)較大。
　　 早酥是蘋果梨和身不知雜交出來的品種。早酥與蘋果梨的同源性為：99.45％，與身不知的同源性為：97.76％。錦豐是蘋果梨和慈梨雜交出來的品種。錦豐與蘋果梨的同源性為：78.76％，錦豐與慈梨的同源性為：78.71％。和父本相比，后代和母本的同源性較高。庫爾勒香梨在與18種梨的序列比對中，