不同黑木相思優(yōu)良無性系的組織培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)優(yōu)化.pdf

1、黑木相思(Acacia melanoxylon)原產(chǎn)于澳大利亞,引入我國時(shí)間較晚,它具有較高的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)、社會(huì)效益。本試驗(yàn)以黑木相思5個(gè)優(yōu)良無性系組培苗為試驗(yàn)材料,從植物生長調(diào)節(jié)劑的種類及、濃度和對(duì)外界環(huán)境條件的調(diào)節(jié)控制以及采用新型LED光源進(jìn)行研究,進(jìn)一步探索影響黒木相思組培苗增殖的因素;研究了不同的生長素種類及濃度對(duì)黒木相思組培苗瓶內(nèi)生根的影響,并且為尋求更加有利的黒木相思組培苗生根技術(shù),研究了黑木相思組培苗的瓶外生根技術(shù),優(yōu)化了黑

2、木相思的組織培養(yǎng)技術(shù),為商業(yè)化節(jié)約成本育苗提供了依據(jù)和技術(shù)支撐。本試驗(yàn)的主要研究結(jié)果如下:
　　1、不同激素不同濃度配比對(duì)黑木相思優(yōu)良無性系組培苗叢生芽增殖的影響。在本試驗(yàn)中,采用正交設(shè)計(jì),考慮細(xì)胞分裂素6-BA、生長素NAA、生長素IBA、赤霉素GA3的不同濃度配比下對(duì)黒木相思5個(gè)優(yōu)良無性系叢生芽增殖的影響。5個(gè)優(yōu)良無性系的平均增殖系數(shù)大小依次為:FM2(7.148)>FM4(7.088)>FM1(6.637)>FM10(6.4

3、40)>FM5(6.337)。不同基因型之間的增殖能力有所差異,并且對(duì)同一激素濃度大小的需求也有所不同,6-BA對(duì)5個(gè)黒木相思優(yōu)良無性系叢生芽增殖影響最大。綜合各因子的影響大小,最終得到5個(gè)黒木相思優(yōu)良無性系增殖培養(yǎng)的最佳激素配方如下:
　　FM1為MS+6-BA0.3mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+GA30.1mg·L-1;
　　FM2為MS+6-BA0.1mg·L-1+IBA0.2mg

4、·L-1+NAA0.05mg·L-1+GA30.1mg·L-1;
　　FM4為MS+6-BA0.1mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+GA30.2mg·L-1;
　　FM5為MS+6-BA0.3mg·L-1+GA30.2mg·L-1+IBA0.3 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1;
　　FM10為MS+6-BA0.1 mg·L-1+GA30.1 mg·L-1+NAA0.1 mg·

5、L-1+IBA0.3 mg·L-1。
　　2、不同封口材料對(duì)黑木相思優(yōu)良無性系組培苗叢生芽增殖的影響。試驗(yàn)中研究了不同的封口材料對(duì)黑木相思不同優(yōu)良無性系叢生芽增殖的影響,5個(gè)優(yōu)良無性系表現(xiàn)出一致的結(jié)果,即使用透氣紙作為封口材料下的叢生芽增殖系數(shù)會(huì)略高于使用塑料蓋作為封口材料。
　　3、不同光環(huán)境對(duì)黑木相思優(yōu)良無性系組培苗叢生芽增殖的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,光照強(qiáng)度對(duì)無性系FM2、FM4、 FM5叢生芽的增殖均達(dá)到了極顯著的影響,

6、對(duì)FM1的影響顯著,對(duì)FM10影響不顯著。5個(gè)優(yōu)良無性系均在45μmol·m-2·s-1光照強(qiáng)度下出現(xiàn)最大的平均增殖系數(shù),在研究中發(fā)現(xiàn),隨著光照強(qiáng)度的增加,組培苗長勢均很好,莖葉較為粗壯,但不利于叢生芽的增殖分化。在研究不同光質(zhì)對(duì)黒木相思不同優(yōu)良無性系叢生芽增殖的影響方面,試驗(yàn)設(shè)計(jì)三種紅藍(lán)LED燈組合,分別為20％紅光LED+80%藍(lán)光LED組合、80%紅光LED+20%藍(lán)光LED組合、50%紅光LED+50%藍(lán)光LED組合。試驗(yàn)研究發(fā)

7、現(xiàn),不同光質(zhì)組合LED燈對(duì)5個(gè)無性系叢生芽增殖影響的差異都不顯著,并且在增殖分化上較日光燈處理下的要差。在光照周期方面,試驗(yàn)設(shè)計(jì)兩種光周期對(duì)比分析:16 h光期和8 h暗期、12 h光期和12 h暗期。試驗(yàn)結(jié)果表明,光周期的改變對(duì)5個(gè)無性系叢生芽增殖的影響表現(xiàn)不一致,但從平均增殖系數(shù)來看,光照時(shí)間增加到16h后,5個(gè)無性系的平均增殖系數(shù)都存在不同程度的降低,并且兩種光照周期對(duì)FM2和FM4叢生芽增殖的影響差異達(dá)到了極顯著水平,對(duì)FM5達(dá)

8、到顯著水平,以上說明延長光照時(shí)間不利于黒木相思組培苗的增殖。
　　4、不同激素不同濃度配比對(duì)黒木相思優(yōu)良無性系組培苗瓶內(nèi)生根的影響。試驗(yàn)采用正交設(shè)計(jì),考慮NAA、IBA、2,4-D三種生長素的不同濃度配比對(duì)5個(gè)黑木相思優(yōu)良無性系組培苗生根的影響。試驗(yàn)分析結(jié)果可知,這3種生長素中,NAA與2,4-D對(duì)黒木相思優(yōu)良無性系組培苗生根影響較大。通過對(duì)生根率進(jìn)行極差分析,得到5個(gè)黒木相思優(yōu)良無性系生根培養(yǎng)的最佳激素配方如下:
　　FM

9、1為1/2MS+NAA0.2mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1+IBA0.5mg·L-1;
　　FM2為1/2MS+NAA0.3mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1+IBA1.5mg·L-1;
　　FM4為1/2MS+2,4-D0.5 mg·L-1+IBA1.5 mg·L-1+NAA0.3 mg·L-1;
　　FM5為1/2MS+2,4-D0.5 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+IBA1.5 m

10、g·L-1;
　　FM10為1/2MS+2,4-D0.5 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+IBA1.5 mg·L-1。
　　5、生根促進(jìn)劑的種類、濃度和處理時(shí)間對(duì)黒木相思優(yōu)良無性系組培苗瓶外生根的影響。試驗(yàn)中考慮NAA、IBA、ABT的濃度和處理時(shí)間對(duì)黒木相思不同優(yōu)良無性系組培苗瓶外生根的影響,研究發(fā)現(xiàn)生長素的種類、濃度以及處理時(shí)間對(duì)黒木相思組培苗試管外生根影響差異是顯著的。適合5個(gè)無性系組培苗瓶外生根的最佳生長素

11、種類、濃度以及處理時(shí)間如下:FM1在100mg·L-1的ABT中處理5min,生根率達(dá)100%,平均根數(shù)為8.83根/株,平均根長為1.42cm;FM2在50mg·L-1的ABT中處理5min,生根率達(dá)100%,平均根數(shù)為10.66根/株,平均根長為1.33cm;FM4在100mg·L-1的ABT中處理5min,生根率達(dá)100%,平均根數(shù)為13.66根/株,平均根長為1.77cm;FM5在50mg·L-1的ABT中處理15min,生根率

12、達(dá)100%,平均根數(shù)為9.50根/株,平均根長為1.89cm;FM10在100mg·L-1的ABT中處理25min,生根率達(dá)100%,平均根數(shù)為18.86根/株,平均根長為1.79cm。
　　6、不同移栽基質(zhì)對(duì)黒木相思優(yōu)良無性系組培苗瓶外生根的影響。試驗(yàn)考慮3種基質(zhì):①泥炭土;②泥炭土+蛭石(1:1);③泥炭土+蛭石+珍珠巖(5:4:1)。試驗(yàn)結(jié)果表明,不同移栽基質(zhì)對(duì)不同無性系組培苗瓶外生根影響差異顯著,綜合5個(gè)無性系的生根情況考

13、慮,適合黒木相思組培苗瓶外生根的基質(zhì)是泥炭土+蛭石+珍珠巖(5:4:1)。
　　7、移栽基質(zhì)的不同含水率對(duì)黒木相思優(yōu)良無性系組培苗瓶外生根的影響。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)最佳基質(zhì)含水率為40%。
　　8、不同光照強(qiáng)度對(duì)黒木相思優(yōu)良無性系組培苗瓶外生根的影響。在光照強(qiáng)度方面,試驗(yàn)考慮45μmol·m-2·s-1、90μmol·m-2·s-1、135μmol·m-2·s-1這3種光照強(qiáng)度對(duì)黑木相思5個(gè)優(yōu)良無性系組培苗瓶外生根的影響。經(jīng)過多重比較