miR--517c通過(guò)KPNA2干擾p53核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)抑制GBM自噬及EMT樣表型的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級(jí)博士學(xué)位論文miR517c通過(guò)KPNA2干擾p53核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)：H：Pfl；0GBM自噬及EMT樣表型的研究MicroRNA一517cinhibitsautophagyandepithelialtomesenchymal(like)transitionphenotypeinhumanglioblastomaviadisturbingp53nucleartranslocationconductedbyKPNA2課題來(lái)源：

2、國(guó)家自然科學(xué)基金(81372692)國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金(81101921)吳階平醫(yī)學(xué)基金會(huì)臨床科研專(zhuān)項(xiàng)支助基金(32067501214)學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)培養(yǎng)類(lèi)型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員肖利民漆松濤教授外科學(xué)(神經(jīng)外科)全日制學(xué)術(shù)型博士研究生第一臨床學(xué)院陳忠平教授詹升全教授陸永建教授陳善成教授彭玉平教授潘軍教授2014年5月16日廣州摘要域新的熱點(diǎn)，并被寄希望于成為腫瘤治療的重要分子靶點(diǎn)。本課題組在之前的研究

3、中對(duì)45例幕上原始神經(jīng)外胚層腫瘤(sPNET)的基因組進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)“例標(biāo)本在19q1341位點(diǎn)存在DNA高拷貝，并在DNA高拷貝區(qū)域中發(fā)現(xiàn)了編碼49個(gè)miRNA的miRNA簇一C19MC(thechrl9q1341microRNAcluster)。隨后的基因表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn)在伴有C19MC高拷貝的標(biāo)本中，細(xì)胞自我更新及細(xì)胞存活相關(guān)基因的高表達(dá)。在這些miRNA中，miR5123p，517a，517c，519a及5209在具有C19MC高

4、拷貝的sPNET標(biāo)本中的表達(dá)量明顯增高。隨后在兩種神經(jīng)干細(xì)胞、部位不同的胎腦及成人腦組織中檢測(cè)了這些miRNAs的表達(dá)情況，結(jié)果提示miR517c及miR～519a在腦組織的胚胎發(fā)育過(guò)程中可能發(fā)揮重要作用。通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR(RTPCR)技術(shù)對(duì)6個(gè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明miR一517c及miR一519a在GBM細(xì)胞中的表達(dá)量要高于胎腦，提示我們miR一517c及miR519a在GBM細(xì)胞中可能存在一定的生物學(xué)作用。以上的這些研究

5、結(jié)果為本研究提供了重要線索。本實(shí)驗(yàn)擬進(jìn)一步探討自噬對(duì)p53表型不同的U87及U251細(xì)胞遷移能力的影響；miR517c在膠質(zhì)瘤中發(fā)揮的生物學(xué)作用以及發(fā)揮作用的具體分子機(jī)制；miR517c的生物學(xué)作用與自噬及EMT的關(guān)系；這種關(guān)系是否與p53表型不同有關(guān)；旨在尋求膠質(zhì)瘤治療的新策略。第一章自噬對(duì)pS3表型不同的U87及U251細(xì)胞遷移的影響目的：探討自噬與膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移的作用以及這種作用是否與細(xì)胞的p53表型有關(guān)。方法：替莫唑胺(TMZ)