中草藥穿龍薯蕷的組織培養(yǎng)研究.pdf

1、本研究以野生穿龍薯蕷為試材，采用其幼年型和成年型枝條的帶芽莖段以及當(dāng)年生的幼根為外植體，建立再生體系，以多元設(shè)計進(jìn)行試驗，獲得如下結(jié)果： 1愈傷組織誘導(dǎo)：4℃處理外植體能提高愈傷組織誘導(dǎo)頻率，可比對照提高9％-13％；低溫存放時間超過6天會對組織產(chǎn)生損傷作用，影響外植體誘導(dǎo)愈傷組織的能力。不同的外植體愈傷組織的誘導(dǎo)率和生長差異很大。莖尖的誘導(dǎo)率最高，在6-BA1.0mg/L+2，4-D4.0mg/L誘導(dǎo)培養(yǎng)基上可達(dá)75％；幼根的

2、誘導(dǎo)率次之，最高達(dá)72.5％。莖尖和幼根誘導(dǎo)的愈傷組織進(jìn)-步增殖繼代過程中，幼根誘導(dǎo)的愈傷組織長勢比莖尖愈傷組織好，增殖速度也快。 2不定芽的誘導(dǎo)與增殖：將生長快的愈傷組織轉(zhuǎn)接到MS+6-BA2.0mg/L+NAA2.0mg/L多芽體誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，淡黃綠色的愈傷組織逐漸變綠，并形成很多突起，進(jìn)而形成多芽體。最大誘導(dǎo)率可達(dá)75.5％。6-BA濃度在1.5-2.5mg/L的范圍內(nèi)既可以保持較高的多芽體芽數(shù)，又使芽健壯。MS+6-BA

3、2.0mg/L+NAA2.0mg/L+AC0.5g/L培養(yǎng)基可以有效的誘導(dǎo)穿龍薯蕷腋芽產(chǎn)生不定芽，最高誘導(dǎo)率可達(dá)85.7％。穿龍薯蕷不定芽增殖培養(yǎng)最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L，增殖系數(shù)達(dá)到3.22。 3毛狀根的誘導(dǎo)與培養(yǎng)：幼根接種在誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基上，部分外植體可誘導(dǎo)出毛狀根，在不定芽的增殖培養(yǎng)過程中，不定芽的基部也有毛狀根的產(chǎn)生。影響毛狀根增殖最大的因素為生長素IBA，其次為6-BA，然后

4、是培養(yǎng)基，而AC影響效果不明顯。1/2MS+6-BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L+AC0.5g/L培養(yǎng)基可以有效的使毛狀根增殖，最高增殖倍數(shù)可達(dá)7.89。 4壯苗與生根培養(yǎng)：較高細(xì)胞分裂素濃度對芽的生長產(chǎn)生抑制作用，采用含低水平細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基有助于恢復(fù)芽的生長，健壯的芽有利于生根培養(yǎng)，在培養(yǎng)基1/2MS+6-BA1.0mg/L+KT1.0mg/L上培養(yǎng)，嫩梢葉色深綠，葉大而寬展，莖較粗。生根培養(yǎng)以1/2MS+6-BA