龍牙百合組織培養(yǎng)的優(yōu)化研究.pdf

1、通過采用回歸的最優(yōu)設(shè)計進行試驗處理方案設(shè)計，對龍牙百合組織培養(yǎng)體系進行優(yōu)化，并分析影響龍牙百合組織培養(yǎng)各環(huán)節(jié)因素，從而得到最佳培養(yǎng)條件。用頂芽、幼葉、莖段和鱗片為外植體，進行小鱗莖和芽的誘導、繼代增殖、生根結(jié)鱗莖誘導以及組培苗假植移栽等方面試驗，試驗結(jié)果如下： 1、初代誘導培養(yǎng)采用飽和D-最優(yōu)設(shè)計研究6-BA和NAA濃度配比對鱗片、莖段和葉片誘導的影響，應(yīng)用SAS 8.2統(tǒng)計分析軟件依據(jù)試驗結(jié)果建立多項式回歸方程，并對6-BA和

2、NAA進行單效應(yīng)分析和互作相應(yīng)分析，再應(yīng)用Qbasic尋優(yōu)軟件進行尋優(yōu)，得到各外植體誘導的最佳培養(yǎng)基。誘導鱗片產(chǎn)生小鱗莖的最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA1.5 mg/L，+NAA0.5 mg/L，誘導小鱗莖鱗片產(chǎn)生叢生芽的最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.25mg/L，誘導莖段產(chǎn)生叢生芽的最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA2.40mg/L+NAA0.25 mg/L，誘導葉片產(chǎn)生叢生芽的最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA2.50

3、mg/L+NAA0.25 mg/L。 用附加不同濃度的6-BA和NAA的MS為培養(yǎng)基對頂芽進行誘導，結(jié)果表明，較適宜的培養(yǎng)基為：MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L。 2、芽的繼代增殖培養(yǎng)以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的6-BA和KT單因素以及6-BA和NAA配合使用對龍牙百合叢生芽進行繼代增殖培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)6-BA單獨使用效果最好，應(yīng)用Qbasic對其結(jié)果進行運算建立回歸方程，并尋優(yōu)得6-BA最佳濃度為

4、1.0 mg/L，增殖系數(shù)為5.02/30 d。 3\生根結(jié)鱗莖的誘導培養(yǎng)以1/2 MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度白糖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，白糖的濃度與結(jié)鱗莖呈正相關(guān)，糖濃度為6％時，結(jié)鱗莖數(shù)最多；與生根呈負相關(guān)，糖濃度太高，苗的移栽成活率低。 當糖濃度為6％時，改變1/2 MS培養(yǎng)基中KH2PO4含量，發(fā)現(xiàn)在KH2PO4用量為5.1g/L時，對試管苗生根結(jié)鱗莖有促進作用，結(jié)鱗莖的時間縮短，鱗莖直徑比較大。 以改良1/2M