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1、水稻品種8077S的苯達(dá)松敏感致死性是由單基因(bel)控制的,由于8077S在兩系雜交稻制種中的應(yīng)用前景使該基因的研究得到深入。本研究利用突變位點分析和生物信息學(xué)的方法證實bel基因即SNP51所在的基因,進(jìn)一步克隆了Bel基因,利用半定量RT-PCR的方法研究了其表達(dá)特性;并將Bel構(gòu)建入植物表達(dá)載體進(jìn)行轉(zhuǎn)基因煙草的分析,其主要結(jié)果如下: 1) 在前期研究對bel基因SSR和SNP精細(xì)定位的基礎(chǔ)上,本研究對定位區(qū)段進(jìn)行了候選
2、基因的預(yù)測及其生物信息學(xué)分析,認(rèn)為SNPl51所在基因即bel基因,它是由Bel基因單堿基確實突變造成的。 2) 對Bel基因的編碼區(qū)cDNA進(jìn)行了克隆,并將其構(gòu)建到pMD18-T載體上進(jìn)行了測序,NCBI Blast發(fā)現(xiàn)它是細(xì)胞色素P450基因家族CYP81A6基因,由兩個外顯子構(gòu)成,編碼了含513個氨基酸的膜結(jié)合蛋白質(zhì)。 3) 以β-actin為內(nèi)參,利用半定量RT-PCR技術(shù)對其表達(dá)特性進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)Bel基因的
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