舞毒蛾性信息素結(jié)合蛋白和嗅覺受體OrCo的功能研究.pdf

1、舞毒蛾Lymantria dispar(Linnaeus)是全球森林生態(tài)系統(tǒng)最具危害性的森林害蟲類群之一，具有十分突出的檢疫重要性。該害蟲大量爆發(fā)時(shí)，植物葉片常被食光，嚴(yán)重影響林木生長，甚至導(dǎo)致樹木死亡。舞毒蛾在尋找寄主、配偶以及取食等過程中，嗅覺和味覺在蟲體同外界化學(xué)信息交流過程中起著重要的作用。因此，對其成蟲嗅覺系統(tǒng)的深入研究就是控制其為害的一個(gè)突破點(diǎn)。研究氣味受體的特性、變異及專一性對于闡明嗅覺識(shí)別的分子機(jī)理是非常重要的。

2、　　本研究首先利用RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction)和RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技術(shù)獲得了舞毒蛾非典型受體蛋白OrCo(coreceptor)基因，并對其進(jìn)行序列分析，驗(yàn)證正確性之后采用RNAi技術(shù)成功沉默了舞毒蛾嗅覺受體基因orco和目前已知的性信息素結(jié)合蛋白（Pheromone binding protein

3、，PBP）基因pbp1、pbp2?，F(xiàn)將主要研究結(jié)果總結(jié)如下:
　　(1)成功克隆舞毒蛾Lymantria dispar（Linnaeus）的OrCo氣味受體基因，并分析了其序列特征，驗(yàn)證了基因序列的正確性，為進(jìn)一步研究舞毒蛾氣味受體的功能，OrCo基因的進(jìn)化以及揭秘嗅覺機(jī)制奠定基礎(chǔ)，同時(shí)也可以為害蟲生物防治提供新的途徑和方法。
　　(2)利用RNAi技術(shù)沉默了舞毒蛾嗅覺受體基因orco以及性信息素結(jié)合蛋白基因pbp1和pbp

4、2，然后采用電生理實(shí)驗(yàn)和Real-time PCR實(shí)驗(yàn)檢測并驗(yàn)證基因沉默效果。結(jié)果顯示這三個(gè)基因表達(dá)的缺失嚴(yán)重影響了舞毒蛾對性信息素的識(shí)別，初步驗(yàn)證了舞毒蛾orco基因所行使的功能與前人研究的其它昆蟲的同類基因非常相似，并且發(fā)現(xiàn)這三個(gè)基因在功能上體現(xiàn)出相互促進(jìn)的效果，說明氣味分子進(jìn)入舞毒蛾嗅覺感器進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)的過程與前人研究的其它昆蟲的傳導(dǎo)過程相似，但就其具體的傳導(dǎo)機(jī)制仍需做進(jìn)一步的研究。這為利用RNAi技術(shù)防控舞毒蛾提供了重要依據(jù)，也