乙型腦炎病毒對豬外周血淋巴細(xì)胞因子mRNA轉(zhuǎn)錄時相影響的研究.pdf

1、豬乙型腦炎病毒(JapaneseEncephalitisVirus,JEV)是母豬繁殖性能障礙的重要病原體,JEV又經(jīng)常同許多病毒交叉感染對養(yǎng)豬生產(chǎn)帶來好多弊端,所以加強(qiáng)對JEV的研究工作,意義顯得十分重要。
　　 1.我們利用實時定量PCR分別對JEV感染外周血單層淋巴細(xì)胞JEVRNA及Bcl-2、Bcl-xl、FasL、p53和PBR五種凋亡相關(guān)細(xì)胞因子含量進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示:在感染1小時,病毒DNA表達(dá)量開始出現(xiàn),病毒可以

2、測出,在感染后期72小時能達(dá)到最大值,此時DAN的相對表達(dá)量達(dá)到16倍左右:Bcl-2感染1小時后開始增殖,在3小時大量表達(dá),隨后降低。FasL感染72小時后增加到峰值,Bcl-xl感染1小時、12小時、24小時、48小時后表達(dá)量降低,3小時、72小時大量表達(dá)分別為對照組的4.8倍、560倍;P53感染1小時、3小時、12小時、24小時、48小時后表達(dá)量不明顯,72小時后表達(dá)量達(dá)到最大值為對照組15倍;PBR感染1小時、3小時、12小時

3、、72小時后大量表達(dá)分別為對照組的1.5倍、7.7倍、9倍、83倍,24小時和48小時表達(dá)量降低。
　　 2.我們分別對JEV感染淋巴單層細(xì)胞后IL-8、12p40、12P35及IL-17、IL-18相關(guān)細(xì)胞因子水平進(jìn)行實時定量PCR檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)IL-8感染1小時、3小時、24小時、72小時后大量表達(dá),分別是對照組的1.7倍、10倍、3.2倍、2.8倍,12小時、48表小時達(dá)量降低;12p40感染1小時、3小時、12小時、24

4、小時后分別為對照組的1.6倍、5.7倍、5.3倍和1.9倍,接著在48小時表達(dá)量降低,72小時甚至不表達(dá);12p35感染1小時開始表達(dá),3小時表達(dá)降低,12小時、24小時表達(dá)量都增加,48小時表達(dá)量達(dá)到峰值,約73倍左右,72小時表達(dá)量降低;IL-17感染1小時、3小時、12小時后與對照組相比表達(dá)量增加的幅度不明顯,24小時、72小時甚至不表達(dá),48小時表達(dá)量大量增殖;IL-18感染1小時開始表達(dá),3小時大量表達(dá),12小時、24小時、4

5、8表小時達(dá)量增高趨勢,在72小時表達(dá)量達(dá)到峰值,約為7.8倍。
　　 3.我們利用實時定量PCR.分別對JEV感染淋巴單層細(xì)胞后MIP-1α、TGF-β1、PGK1分泌水平進(jìn)行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)MIP-1α感染1小時后開始表達(dá),3小時大量表達(dá),12小時、24小時、48小時都不表達(dá),72小時表達(dá)值達(dá)到峰值;TGF-1β感染1小時、3小時、72小時后與對照組相比表達(dá)量有增殖趨勢,分別為1.1倍、1.09倍、3.6倍,12小時、24小時、