PCV2與PPV共感染對豬外周血單個核細胞細胞因子轉(zhuǎn)錄時相影響研究.pdf

1、豬細小病毒(Porcineparvovirus，PPV)和豬圓環(huán)病毒2型(Porcinecircovirustype2，PCV2)引起初產(chǎn)母豬產(chǎn)出死胎、畸形胎、木乃伊胎以及母豬的繁殖障礙。PCV2還可以引起新生仔豬肺炎、生長遲緩等，也是導致感染豬發(fā)生免疫抑制的主要病原，且這2種病普遍存在于國內(nèi)外的養(yǎng)殖場，嚴重影響和制約著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。本研究通過分析PPV與PCV2共感染豬體外周血單個核細胞中免疫相關(guān)細胞因子mRNA轉(zhuǎn)錄的動態(tài)變化，以揭示

2、PPV與PCV2共感染對豬免疫功能的影響及其致病機理。
　　 1采用Real-timePCR技術(shù)對PPV、PCV2單感染和PPV/PCV2共感染豬PBMCs后1、3、12、24、48和72h中PPV、PCV2的DNA含量進行檢測。結(jié)果顯示：PPV、PCV2在感染后1h能檢測到病毒核酸，且PPV/PCV2共感染組中PCV2含量高于PPV、PCV2單感染組。由此說明：PPV與PCV2共感染對PCV2在PBMCs內(nèi)的增殖具有促進作用。

3、
　　 2采用Real-timePCR技術(shù)對PPV、PCV2單感染與PPV/PCV2共感染豬PBMCs后1、3、12、24、48和72h中PPV、PCV2的DNA含量及白細胞介素細胞因子(IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12p35、IL-12p40、IL-13、IL-17、IL-18)mRNA轉(zhuǎn)錄水平進行檢測。結(jié)果顯示，IL-1β、IL-6、IL-13、IL-8和IL-17細胞因子在病毒感染后其轉(zhuǎn)錄水平均較高，并且共感染比

4、PPV、PCV2單感染組高，而IL12p35、IL-12p40和IL-18細胞因子在病毒感染后其轉(zhuǎn)錄水平均較低或受到抑制。由此表明：PPV/PCV2共感染組比PPV、PCV2單感染組更能刺激炎癥的發(fā)生，同時共感染對細胞的免疫抑制具有加重作用。
　　 3采用Real-timePCR技術(shù)對PPV、PCV2單感染和PPV/PCV2共感染豬PBMCs后1、3、12、24、48和72h干擾素相關(guān)因子(IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1

5、、IFNAR-2、MX1、2’5’OAS、RNaseL、IRF-3)mRNA轉(zhuǎn)錄水平進行檢測。結(jié)果顯示：病毒感染豬PBMCs后IFN-β和IFN-γmRNA轉(zhuǎn)錄水平在多個時間點轉(zhuǎn)錄水平高于單感染，但是IFN-γmRNAPPV/PCV2共感染組低于對照組。病毒組的IFNAR-1mRNA轉(zhuǎn)錄水平均有多個時間點低于對照組；PPV/PCV2共感染組IFNAR-2mRNA感染后期IFNAR-2mRNA轉(zhuǎn)錄水平低于PPV、PCV2單感染組。病毒在感

6、染PBMCs后PPV/PCV2共感染組IRF-3mRNA感染初期高于PPV、PCV2單感染組，感染后期低于PPV、PCV2單感染組，但與對照組變化不顯著。由此表明：干擾素因子的轉(zhuǎn)率水平整體較低，且在初期發(fā)揮作用，而后期處于抑制作用，PPV/PCV2共感染對細胞的免疫抑制具有加重作用。對干擾素的效應分子的分析認為，MX1、2'5’OAS/RNaseL2個效應系統(tǒng)都參與了PPV的抗病毒反應，而PPV/PCV2共感染組和PCV2的抗病毒效應分

7、子主要是MXI蛋白。
　　 4采用Real-timePCR技術(shù)對PPV、PCV2單感染和PPV/PCV2共感染豬PBMCs后1h、3h、12h、24h、48h、72h抗病毒相關(guān)因子(MIP-1α、TGF-β1、NF-κB、MURR1)mRNA轉(zhuǎn)錄水平進行檢測。結(jié)果顯示：病毒感染后期MIP-1α、TGF-β1、NF-κB、MURR1mRNA上調(diào)。且PCV2單感染組高于PPV/PCV2共感染，提示可共感染對機體的免疫抑制具有加重作用