茶樹(shù)扦插生根過(guò)程中主要生化物質(zhì)變化及POD57基因克隆和表達(dá)特征研究.pdf

1、茶樹(shù)是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物,目前主要采用短穗扦插方式進(jìn)行繁殖,扦插苗成活率的高低受內(nèi)因和外因的影響。內(nèi)因包括扦插材料和扦插時(shí)間;外因包括促根物質(zhì)、扦插基質(zhì)、和環(huán)境條件等。
　　實(shí)驗(yàn)以皖茶91、舒茶早、石佛翠當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條為材料,研究不同激素處理對(duì)扦插成活率的影響;追蹤扦插生根過(guò)程中生理生化指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化,分析這些指標(biāo)與扦插生根的關(guān)系;對(duì)過(guò)氧化物酶基因POD57的分子生物學(xué)特性進(jìn)行研究。旨在為提高茶樹(shù)扦插成活率提供技術(shù)和理論支持。

2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.三個(gè)品種茶樹(shù)扦插成活率排序?yàn)橥畈?1﹥舒茶早﹥石佛翠。外源激素抑制植株生長(zhǎng),促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng);激素處理對(duì)皖茶91扦插成活率改變不大,舒茶早最適激素使用濃度為IBA200mg/L,石佛翠最佳處理為國(guó)光生根粉1000mg/L。
　　2.扦插生根過(guò)程中,含水率呈下降→上升趨勢(shì),水分含量變化表現(xiàn)出與扦插生根有一定相關(guān)性,但不顯著;石佛翠含水率最低,扦插成活率也低。可溶性糖含量變化葉片中呈上升趨勢(shì),莖中呈上升

3、→下降趨勢(shì);莖中淀粉含量皖茶91先上升后下降再上升,舒茶早和石佛翠呈下降→上升趨勢(shì);扦插前母葉內(nèi)的可溶性糖與扦插生根呈正相關(guān)?？扇苄缘鞍壮氏陆第厔?shì),品種間差異顯著,但沒(méi)有表現(xiàn)出與扦插生根顯著的相關(guān)性。PPO和IAAO活性也與扦插生根有一定相關(guān)性,皖茶91的PPO和IAAO活性在扦插20d內(nèi)較高,成活率較高,而舒茶早和石佛翠兩種酶活性較低,成活率也較低。POD活性與扦插生根呈顯著負(fù)相關(guān)。整個(gè)生根期間皖茶91茶多酚含量高于舒茶早和石佛翠,茶

4、多酚含量與扦插生根呈一定的正相關(guān)。插穗經(jīng)激素處理后,短期內(nèi)葉片和莖的含水率、可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、茶多酚含量上升;POD、PPO和IAAO活性下降。三個(gè)品種各生理指標(biāo)除POD以外變化規(guī)律相似。
　　3.從茶樹(shù)全器官轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)中篩選出POD57的EST片段,以茶樹(shù)葉片為試驗(yàn)材料,通過(guò)RACE技術(shù)克隆得到該基因cDNA全長(zhǎng)序列為1273bp,包含一個(gè)長(zhǎng)為957bp的開(kāi)放閱讀框,編碼318個(gè)氨基酸,存在一定的內(nèi)部跨膜結(jié)構(gòu)。組織特異