聚維酮高絡(luò)合碘溶液體外殺滅豬精液中病原微生物活性的研究及其對(duì)豬精液品質(zhì)和常溫保存的影響.pdf

1、聚維酮高絡(luò)合碘溶液中碘以低毒性的絡(luò)合碘存在，適當(dāng)濃度的碘既能殺滅精液中的細(xì)菌和病毒，又不會(huì)傷害精子，能有效阻止細(xì)菌和病毒性傳染病的垂直傳播，大大保障精液的整體質(zhì)量。由于對(duì)環(huán)境無污染，可以大幅度增加養(yǎng)殖業(yè)的安全保障。在集約化養(yǎng)殖模式的不斷推廣下，聚維酮高絡(luò)合碘溶液的成功研發(fā)，為阻止病原微生物通過精液的垂直傳播，進(jìn)而為全國豬病的防治和凈化提供了強(qiáng)有力的保障措施。本課題通過探究聚維酮高絡(luò)合碘溶液對(duì)常見病原微生物的體外殺滅試驗(yàn)，證實(shí)其對(duì)臨床上常

2、見病原微生物的殺滅效果，進(jìn)而探討將其應(yīng)用于家畜精液保護(hù)方面的適用性及可行性，為其在獸醫(yī)生產(chǎn)中應(yīng)用于豬精液的常溫保存提供理論依據(jù)。
　　1.聚維酮高絡(luò)合碘溶液的體外殺菌試驗(yàn)
　　為考察聚維酮高絡(luò)合碘溶液的體外殺菌活性，在實(shí)驗(yàn)室條件下通過懸液定量殺菌試驗(yàn)研究了1∶50、1∶100、1∶200三種稀釋度的供試品溶液對(duì)部分腸桿菌科、巴氏桿菌科和革蘭氏陽性球菌的殺滅作用，考察了三種稀釋度作用不同時(shí)間的平均殺菌率及殺滅范圍。結(jié)果表明:0

3、.1％卵磷脂+1.0％吐溫80+0.5％硫代硫酸鈉的0.03mol·L-1磷酸鹽緩沖液作為中和劑，可有效中和1∶50稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液的殘留作用;在實(shí)驗(yàn)室條件下，1∶50稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液對(duì)上述細(xì)菌作用5min后殺菌率即可達(dá)到100％;1∶100稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液對(duì)本試驗(yàn)中的大腸桿菌和沙門氏菌不同菌株作用10min的平均殺菌率均大于99％，對(duì)本試驗(yàn)中的革蘭氏陽性球菌的平均殺菌率均大于99.9％;1∶200稀釋的聚維酮高

4、絡(luò)合碘溶液殺菌效果不理想。由以上試驗(yàn)結(jié)果可知:低于100倍稀釋倍數(shù)的聚維酮高絡(luò)合碘溶液具有良好的殺菌效果。
　　2.聚維酮高絡(luò)合碘溶液對(duì)PRRSV、TGEV體外殺毒作用的研究
　　本試驗(yàn)研究了聚維酮高絡(luò)合碘溶液和聚維酮碘對(duì)Marc-145和PK-15細(xì)胞的毒性作用，同時(shí)采用MTT法考察了兩種測(cè)試物對(duì)PRRSV、TGEV病毒增殖的影響，進(jìn)行了阻斷、抑制和直接殺滅PRRSV和TGEV效果的試驗(yàn)。結(jié)果如下:聚維酮高絡(luò)合碘溶液對(duì)Ma

5、rc-145和PK-15的最大無毒濃度分別為312.50μg·mL-1和156.25μg·mL-1，聚維酮碘對(duì)Marc-145和PK-15細(xì)胞的最大無毒濃度分別為2.44μg·mL-1和1.22μg·mL-1，在安全濃度以下均不會(huì)明顯引起細(xì)胞損傷，對(duì)細(xì)胞無毒性作用;阻斷試驗(yàn)結(jié)果表明聚維酮高絡(luò)合碘溶液在安全濃度1.22～312.50μg·mL-1內(nèi)對(duì)PRRSV的阻斷作用極顯著(P＜0.01)，在安全濃度1.22～156.25μg·mL-1

6、內(nèi)對(duì)TGEV的阻斷作用極顯著(P＜0.01);抑制試驗(yàn)結(jié)果表明聚維酮高絡(luò)合碘溶液在安全濃度2.44～312.50μg·mL-1內(nèi)對(duì)PRRSV在Marc-145細(xì)胞上的增殖具有極顯著的抑制作用(P＜0.01)，在安全濃度4.88～156.25μg·mL-1內(nèi)對(duì)TGEV在PK-15細(xì)胞上的增殖具有極顯著的抑制作用(P＜0.01)，直接殺滅試驗(yàn)結(jié)果表明聚維酮高絡(luò)合碘溶液在濃度范圍0.15～312.50μg·mL-1內(nèi)對(duì)PRRSV有極顯著的直接

7、殺滅作用(P＜0.01)，聚維酮高絡(luò)合碘溶液在濃度19.53～156.25μg·mL-1內(nèi)對(duì)TGEV有極顯著的直接殺滅(P＜0.01)作用。結(jié)果表明:聚維酮高絡(luò)合碘溶液在安全范圍內(nèi)對(duì)兩種病毒的殺滅效果比較明顯，可以為臨床上開發(fā)聚維酮高絡(luò)合碘溶液作為豬精液保護(hù)劑從源頭上杜絕精液中疾病的垂直傳播提供參考。
　　3.聚維酮高絡(luò)合碘溶液對(duì)公豬精液品質(zhì)和存活時(shí)間及存活指數(shù)的影響
　　本試驗(yàn)通過對(duì)公豬精液品質(zhì)、存活時(shí)間和存活指數(shù)等指標(biāo)的

8、測(cè)定，考察了聚維酮高絡(luò)合碘溶液三種稀釋度(1∶50、1∶100、1∶200)使用后對(duì)豬精子質(zhì)量的影響，探究將其應(yīng)用于家畜精液保護(hù)的可行性。結(jié)果顯示:1∶100稀釋的聚維酮高絡(luò)合碘溶液對(duì)17℃保存的豬精子質(zhì)量的常規(guī)指標(biāo)無影響，精子的有效存活時(shí)間可以達(dá)到90h，總存活時(shí)間最高可達(dá)300h，存活指數(shù)最高為105.3，結(jié)果均好于對(duì)照的聚維酮碘組，1∶50、1∶200稀釋時(shí)精液的保護(hù)效果不如1∶100稀釋。結(jié)論:綜合考慮各種因素按劑量1∶100稀