蓖麻高效組培與再生體系條件的優(yōu)化.pdf

1、蓖麻油作為一種新型綠色工業(yè)用油，在商業(yè)上應(yīng)用越來越廣泛。中國是世界蓖麻產(chǎn)量的第三大國，栽培品種多，種植面積廣。隨著工業(yè)的高速發(fā)展，蓖麻油需求量劇增，每年仍需從國外進(jìn)口大量的蓖麻油。因此，蓖麻的育種和栽培技術(shù)倍受關(guān)注，培育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的蓖麻品種已成為當(dāng)務(wù)之急。
　　論文從37個(gè)國內(nèi)常規(guī)蓖麻雜交品種中篩選出7個(gè)品種進(jìn)行組織培養(yǎng)初步試驗(yàn)，確定3種較適于蓖麻組織培養(yǎng)的品種，該三個(gè)品種分別為:哲蓖3號(hào)、稼祥2號(hào)和通蓖6號(hào)。實(shí)驗(yàn)通過篩選消毒劑、消

2、毒時(shí)間、預(yù)培養(yǎng)激素、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、接種方式、芽誘導(dǎo)激素及芽誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)間、芽伸長激素以及根誘導(dǎo)等因子，建立了高效可重復(fù)的蓖麻組培與再生體系。
　　實(shí)驗(yàn)確定了最佳消毒體系，70％酒精處理10s，1％NaClO處理30min。該體系可有效降低污染率，同時(shí)保證蓖麻種胚的存活率，其最終效果為平均污染率10.33％，平均存活率84.67％。從上胚軸、下胚軸上部、下胚軸下部、子葉及子葉節(jié)中篩選出最適蓖麻組培和再生外植體，即下胚軸上部。下胚軸上部的

3、芽誘導(dǎo)率較以上五種外植體最好，在添加6-BA激素的MS培養(yǎng)基上，芽誘導(dǎo)率可達(dá)26.82％。實(shí)驗(yàn)篩選出了高效不定芽誘導(dǎo)與伸長體系，包括一個(gè)高效不定芽誘導(dǎo)體系，一個(gè)高效不定芽伸長體系和一個(gè)高效不定芽誘導(dǎo)和伸長體系。高效不定芽誘導(dǎo)體系:在預(yù)培養(yǎng)階段，外植體接種在添加6-BA1.5mg/L的MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)5-6d，轉(zhuǎn)入添加TDZ0.14mg/L的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基。該芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的芽誘導(dǎo)效率最高可達(dá)77.61％。高效不定芽伸長體系:預(yù)培養(yǎng)階段，外

4、植體接種在添加6-BA0.3mg/L的MS培養(yǎng)基，培養(yǎng)5-6d，轉(zhuǎn)移到添加6-BA0.2mg/L的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，1w后繼代，選擇添加6-BA0.5mg/L的MS培養(yǎng)基進(jìn)行芽誘導(dǎo)。該體系的芽誘導(dǎo)效率低，但誘導(dǎo)芽平均長度可達(dá)1.9cm。高效不定芽誘導(dǎo)和伸長體系:預(yù)培養(yǎng)階段，外植體接種在添加6-BA1.5mg/L的MS培養(yǎng)基，培養(yǎng)5-6d，轉(zhuǎn)入添加TDZ0.1mg/L和6-BA0.15mg/L的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基。該體系的芽誘導(dǎo)效率和平均芽長綜合而

5、言，較前兩種體系為最優(yōu)。該體系的最高芽誘導(dǎo)率可達(dá)76.64％，平均芽伸長為1.40cm。通過篩選根誘導(dǎo)激素IBA、NAA以及活性炭的濃度，確定了外植體的最適生根體系。生根培養(yǎng)基為添加IBA0.3mg/L和1％活性炭的1/2MS培養(yǎng)基。通過該體系進(jìn)行根誘導(dǎo)，生根率可達(dá)90.55％，每個(gè)外植體平均生根數(shù)為3.20個(gè)。
　　通過研究不定芽誘導(dǎo)3個(gè)階段的外植體石蠟切片，對(duì)芽發(fā)生過程組織解剖學(xué)分析。結(jié)果顯示，本實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的不定芽發(fā)生于內(nèi)皮層，